Loading article…
DNAワクチンは、免疫反応を誘導するメカニズムとして、特定の抗原をコードするDNA配列を生物の細胞に導入するタイプのワクチンです。 [1] [2]
DNAワクチンは、免疫反応が求められる抗原をコードするDNA配列を含む遺伝子組み換え プラスミドを注入することで機能し、細胞が直接抗原を生成して防御免疫反応を引き起こします。[3] DNAワクチンは、従来のワクチンに比べて理論的な利点があり、「より広範囲の種類の免疫反応を誘発する能力」などがあります。[4]いくつかのDNAワクチンが獣医学での使用 がテストされています。[3]動物の病気からの保護が得られたケースもあれば、得られなかったケースもあります。[3] 人間のウイルス、細菌、寄生虫による病気、および癌に対するアプローチに関する研究が進行中です。[4] 2021年8月、インド当局はZyCoV-Dに緊急承認を与えました。Cadila Healthcareによって開発されたこのワクチンは、人間向けに承認された最初のDNAワクチンです。[5]
歴史
従来のワクチンには、病原体由来の特定の抗原、またはワクチン接種を受けた生物の免疫反応を刺激する弱毒化ウイルスが含まれています。 DNAワクチンは、抗原の細胞生成（タンパク質生合成）をコードする遺伝情報（DNAまたはRNA）を含むため、遺伝子ワクチンのメンバーです。 DNAワクチンには、病原体由来の特定の抗原をコードするDNAが含まれています。 DNAは体内に注入され、細胞に取り込まれ、細胞は通常の代謝プロセスで、取り込んだプラスミドの遺伝コードに基づいてタンパク質を合成します。 これらのタンパク質には、細菌またはウイルスに特徴的なアミノ酸配列の領域が含まれているため、異物として認識され、宿主細胞によって処理されて表面に現れると、免疫系が警戒し、免疫反応を引き起こします。[6] [7]あるいは、DNAをタンパク質にカプセル化して細胞への侵入を容易にすることもできます。 このカプシドタンパク質がDNAに含まれている場合、結果として得られるワクチンは、逆戻りのリスクなしに生ワクチンの効力を組み合わせることができます。[要出典]
1983年、ニューヨーク保健局のエンツォ・パオレッティとデニス・パニカリは、遺伝子工学を用いて通常の天然痘ワクチンを他の病気を予防できる可能性のあるワクチンに変換し、組み換えDNAワクチンを製造する戦略を考案しました。 [8]彼らは、他のウイルス（単純ヘルペスウイルス、B型肝炎、インフルエンザ）の遺伝子を挿入することで、牛痘ウイルスのDNAを改変しました。 [9] [10] 1993年、メルク研究所のジェフリー・ウルマーと同僚は、インフルエンザ抗原をコードするプラスミドDNAをマウスに直接注射すると、その後のインフルエンザウイルスによる実験的感染から動物が保護されることを実証しました。[11] 2016年、国立衛生研究所でジカウイルス のDNAワクチンのヒトに対する試験が開始されました。この研究は、18歳から35歳までの最大120人の被験者を対象に計画された。これとは別に、イノビオ・ファーマシューティカルズとジーンワン・ライフサイエンスはマイアミでジカウイルスに対する別のDNAワクチンの試験を開始した。NIHワクチンは高圧下で上腕に注入される。ワクチンの大量生産は2016年8月時点で未解決のままである。 [12] HIVを予防するDNAワクチンの臨床試験が進行中である。[13]
2021年8月、インド当局はZyCoV-Dに緊急承認を与えた。Cadila Healthcareが開発したこのワクチンは、 COVID-19に対する初のDNAワクチンである。[5]
アプリケーション
2021年現在、[アップデート]米国では人間への使用が承認されているDNAワクチンはない。病気を予防するのに十分な反応を引き起こした実験はほとんどなく、この技術の有用性は人間ではまだ証明されていない。
馬をウエストナイルウイルスから守るための獣医用DNAワクチンが承認されました。[14]別のウエストナイルウイルスワクチンはアメリカのロビンでテストされ、成功しました。[15]
DNA免疫は抗毒素血清の開発手段としても研究されている。[1] DNA免疫はモノクローナル抗体誘導の技術プラットフォームとして利用できる。[2]
利点
- 感染のリスクなし[7]
- MHCクラスIとクラスII分子による抗原提示[7]
- T細胞応答を1型または2型に極性化する[7]
- 関心のある抗原に焦点を当てた免疫反応
- 開発と生産の容易さ[7]
- 保管と輸送の安定性
- 費用対効果
- ペプチド合成、組換えタンパク質の発現と精製、毒性アジュバントの使用の必要性を排除する[16]
- 免疫原の長期持続[6]
- 生体内での発現は、翻訳後修飾を伴うタンパク質の通常の真核生物構造に近づくことを保証する[6]
デメリット
- タンパク質免疫原に限定されます（細菌多糖類などの非タンパク質ベースの抗原には役立ちません）
- 細菌や寄生虫のタンパク質の非定型的な処理の可能性[7]
- プラスミドDNAナノ粒子の鼻腔スプレー投与により、脳細胞などの非標的細胞にトランスフェクションする可能性[17]
- 同じ施設で異なる種類の生ワクチンを製造する場合の交差汚染
プラスミドベクター
ベクターデザイン
DNAワクチンは、高発現ベクターを使用した場合に最良の免疫反応を誘発します。これらは通常、強力なウイルスプロモーターから構成され、目的の遺伝子（または相補DNA ）の体内転写と翻訳を促進します。 [18] mRNAの安定性を向上させ、タンパク質発現を高めるために、イントロンAが含まれる場合があります。 [19]プラスミドには、ウシ成長ホルモンやウサギβグロブリンポリアデニル化配列などの強力なポリアデニル化/転写終結シグナルも含まれています。 [6] [7] [20]ポリシストロニックベクター（複数の目的遺伝子を含む）は、複数の免疫原を発現するため、または免疫原と免疫刺激タンパク質を発現するために構築されることがあります。[21]
プラスミドは、最大約 200 K bpの比較的小さな遺伝子コードを持ち 、免疫原が発現される「媒体」であるため、タンパク質発現を最大化するためにベクター設計を最適化することが不可欠です。[21]タンパク質発現を高める方法の 1 つは、真核細胞の病原性 mRNA のコドン使用を最適化することです。病原体は標的種とは異なるAT 含有量を持つことが多いため、標的種でより一般的に使用されるコドンを反映するように免疫原の遺伝子配列を変更すると、その発現が改善される可能性があります。[22]
もう一つの考慮事項はプロモーターの選択です。研究により、ラウス肉腫ウイルス（RSV）プロモーターによって駆動されるベクターの発現率がはるかに高いことが示されるまで、 SV40プロモーターが従来使用されていました。 [6]最近では、サイトメガロウイルス（CMV）前初期プロモーターとレトロウイルスのシス作用性転写要素を使用することで、モデルシステムでの発現と免疫原性がさらに向上しました。[23]発現率を改善するための追加の変更には、エンハンサー配列、合成イントロン、アデノウイルス三者リーダー（TPL）配列の挿入、およびポリアデニル化および転写終結配列への変更が含まれます。[6] DNAワクチンプラスミドの例は、SV40プロモーターを使用するpVACです。
構造不安定性現象は、プラスミド製造、DNAワクチン接種、遺伝子治療において特に懸念される。[24]プラスミド骨格に関連する補助領域は、広範囲にわたる構造不安定性現象に関与する可能性がある。よく知られている遺伝的不安定性の触媒には、直接反復、逆位反復、タンデム反復があり、これらは多くの市販のクローニングベクターや発現ベクターで顕著である。したがって、余分な非コード骨格配列を削減または完全に排除すると、そのようなイベントが発生する傾向が明らかに減少し、結果としてプラスミド全体の組換え可能性も減少する。[25]
プラスミドのメカニズム
プラスミドがトランスフェクトされた細胞核に挿入されると、外来抗原のペプチド列をコード化します。細胞の表面には、組織適合性複合体（MHC）クラスIとクラスII分子の両方を含む外来抗原が表示されます。抗原提示細胞はリンパ節に移動し、抗原ペプチドと共刺激分子をT細胞に提示して免疫応答を開始します。[26]
ワクチン添付文書のデザイン
免疫原は、抗体や細胞傷害性T細胞の応答を改善するために、さまざまな細胞区画を標的とすることができます。分泌抗原または細胞膜結合抗原は、細胞質抗原よりも抗体応答を誘導するのに効果的ですが、細胞傷害性T細胞応答は、抗原を標的として細胞質分解し、その後主要組織適合性複合体（MHC）クラスI経路に入ることで改善できます。[7]これは通常、 N末端 ユビキチンシグナルの追加によって達成されます。 [27] [28] [29]
タンパク質の構造も抗体反応に影響を与える可能性があります。「秩序だった」構造（ウイルス粒子など）は、秩序のない構造よりも効果的です。[ 30 ]さまざまな病原体からのミニ遺伝子（またはMHCクラスIエピトープ）の文字列は、特にTHエピトープも含まれている場合、一部の病原体に対する細胞傷害性T細胞反応を引き起こします。[7]
配達
DNAワクチンはさまざまな方法で動物組織に導入されてきました。1999年、最も一般的な2つの方法は、標準的な皮下注射針を使用して生理食塩水にDNAを注入する方法と、遺伝子銃を使用して投与する方法でした。[31]その後、他のいくつかの技術が文書化されました。
生理食塩水注射
生理食塩水の注射は通常、骨格筋の筋肉内（IM）または皮内（ID）に行われ、DNAが細胞外スペースに送達されます。これは、1）電気穿孔法、[32] 2）ブピバカインなどのミオトキシンで筋線維を一時的に損傷すること、または3）生理食塩水またはショ糖の高張液を使用することによって補助されます。[6]この方法に対する免疫反応は、針の種類、 [16]針の位置、注射の速度、注射量、筋肉の種類、および受信者の年齢、性別、生理学的状態などの要因によって影響を受ける可能性があります。[6]
遺伝子銃
遺伝子銃による送達は、圧縮ヘリウムを加速剤として使用して、金またはタングステンの微粒子に吸収されたプラスミドDNA（pDNA）を標的細胞に弾道的に加速させる。 [6] [21]
粘膜表面への送達
代替手段としては、鼻や肺の粘膜などの粘膜表面への裸のDNAのエアロゾル注入[21 ]や、眼[33]や膣粘膜[21 ]へのpDNAの局所投与などがある。粘膜表面送達は、カチオン性リポソーム-DNA製剤[7] 、生分解性マイクロスフェア[34]、[21]、弱毒化サルモネラ[35]、腸粘膜への経口投与用の赤痢菌またはリステリアベクター[36]、および組み換えアデノウイルスベクター[21]を使用することでも達成されている。
ポリマービヒクル
細菌細胞と合成ポリマーで構成されたハイブリッドベクターがDNAワクチンの送達に使用されています。大腸菌の内核とポリ（β-アミノエステル）の外層が相乗的に機能し、抗原提示細胞の遺伝子送達に関連する細胞内取り込みと内部化、ファゴソームからの脱出、細胞内貨物の濃縮などの障壁に対処することで効率を高めます。[専門用語]マウスでテストしたところ、ハイブリッドベクターは免疫反応を誘発することがわかりました。[37] [38]
ELI予防接種
DNAワクチン接種のもう一つのアプローチは、発現ライブラリー免疫（ELI）である。この技術を使用すると、病原体のすべての遺伝子を一度に送達できる可能性があり、弱毒化または培養が難しい病原体に対して有用である可能性がある。[6] ELIは、どの遺伝子が防御反応を誘発するかを特定するために使用できる。これは、比較的小さなゲノムを持つマウスの肺病原体であるMycoplasma pulmonisでテストされている。部分的な発現ライブラリーであっても、その後の攻撃に対する防御を誘発することができる。[39]
便利な表形式の比較
投与量
送達方法によって、効果的な免疫反応を起こすために必要な投与量が決まる。生理食塩水注射では、10 μg から 1 mg までのさまざまな量の DNA が必要であるが、遺伝子銃送達では 100 分の 1 から 1000 分の 1 しか必要としない。[40]一般的には 0.2 μg から 20 μg が必要であるが、16 ng という低い量も報告されている。[6]これらの量は種によって異なる。たとえば、マウスは霊長類よりも約 10 分の 1 の DNA しか必要としない。[7]生理食塩水注射では、DNA が標的組織 (通常は筋肉) の細胞外空間に送達されるため、より多くの DNA が必要となる。そこでは、DNA は細胞に取り込まれる前に、基底膜や大量の結合組織などの物理的障壁を乗り越える必要があるが、遺伝子銃送達では DNA が細胞に直接送り込まれるため、「無駄」が少なくなる。[6] [7]
免疫反応
ヘルパーT細胞応答
DNA免疫は、リンパ増殖やさまざまなサイトカインプロファイルの生成など、複数のT H応答を引き起こす可能性があります。DNAワクチンの主な利点は、T細胞の種類をTH1またはTH2応答に偏らせるように操作しやすいことです。[41]各タイプには、リンホカインとケモカインの発現の独特のパターン、特定のタイプの免疫グロブリン、リンパ球の移動パターン、および自然免疫応答のタイプがあります。
他の種類のT細胞の助け
誘発されるT細胞ヘルプの種類は、送達方法、発現される免疫原の種類、および異なるリンパコンパートメントの標的によって影響を受ける。[6] [42]一般に、生理食塩水針注射（IMまたはID）はTH1応答を誘発する傾向があり、遺伝子銃送達はTH2応答を引き起こす。[41] [42]これは細胞内抗原および細胞膜結合抗原には当てはまるが、送達方法に関係なくTH2応答を生成すると思われる分泌抗原には当てはまらない。[43]
一般的に、産生されるT細胞ヘルパーのタイプは時間の経過とともに安定しており、チャレンジ時や、通常は未感作標本で反対のタイプの応答を産生するその後の免疫化後に変化することはありません。[41] [42]しかし、Mor et al. . (1995) [18] は、マウスマラリア原虫Plasmodium yoelii (PyCSP) のサーカムスポロゾイトタンパク質をコードするpDNAでマウスを免疫化し、ブーストしたところ、最初のTH2応答がブースト後にTH1応答に変化したことを発見しました。
さまざまなタイプのT細胞支援の基礎
これらの異なる方法がどのように機能するか、発現する抗原の形態、およびT細胞ヘルパーの異なるプロファイルは理解されていません。 IM注射で使用される比較的大量のDNAがTH1応答の誘導に関与していると考えられていました。 しかし、THタイプにおける用量関連の違いは証拠によって示されていません。[41]誘発されるT細胞ヘルパーのタイプは、抗原提示細胞の分化状態によって決まります。樹状細胞は分化してIL-12（TH1細胞の発達をサポート）またはIL-4（TH2応答をサポート）を分泌できます。[44]針で注入されたpDNAは樹状細胞に取り込まれ、次にTH1サイトカイン（IL-12）産生のために分化するように刺激されます。[45]一方、遺伝子銃はDNAを直接細胞に撃ち込むため、TH1刺激は回避されます。
極性T細胞ヘルプの実用的使用
T細胞ヘルプの極性化は、アレルギー反応や自己免疫疾患に影響を与えるのに有用である。自己免疫疾患では、自己破壊的なTH1反応（それに伴う細胞傷害性T細胞活性）を非破壊的なTH2反応に転換することが目標である。これは、前臨床モデルにおいて望ましいタイプの反応のための疾患前 プライミングにうまく適用されており[7]、確立された疾患に対する反応の転換にもある程度成功している。[46]
細胞傷害性T細胞応答
DNAワクチンの利点の1つは、生ワクチンに伴う固有のリスクなしに細胞傷害性Tリンパ球（CTL）を誘導できることです。CTL応答は、自然感染を模倣する方法で、免疫優位および免疫劣位CTLエピトープ[47]だけでなく、亜優位CTLエピトープ[34] [専門用語]に対しても誘発することができます。これは、CTLエピトープと免疫提供におけるその役割を評価するための有用なツールとなる可能性があります。
細胞傷害性T細胞は、MHCクラスI分子と複合体を形成した小さなペプチド（8〜10個のアミノ酸）を認識する。 [ 48 ]これらのペプチドは細胞質タンパク質に由来し、分解されて小胞体（ER）内の新生MHCクラスI分子に送達される。 [48]遺伝子産物をERに直接標的化すると（N末端にER挿入シグナル配列を追加することにより）、CTL応答が強化されるはずである。これは、インフルエンザタンパク質を発現する組み換えワクシニアウイルスを使用して実証されたが、[48]この原理はDNAワクチンにも適用できるはずである。ユビキチンシグナル配列の追加、または他のシグナル配列の変異により抗原を細胞内分解（したがってMHCクラスI経路への進入）の標的とすることは、CTL応答の増加に効果的であることが示された。[28]
CTL応答は、インフルエンザ核タンパク質に対するDNAワクチンのB7-1またはB7-2などの共刺激分子との共接種によって増強される可能性がある[47] [49]。または、マウスマラリアモデルP. yoeliiに対するDNAワクチンのGM-CSFである[50] 。共刺激分子IL-12およびTCA3をコードするプラスミドとの共接種は、HIV-1およびインフルエンザ核タンパク質抗原に対するCTL活性を増強することが示されている。[49] [51]
体液性（抗体）反応
DNA ワクチン接種によって誘発される抗体反応は、抗原の種類、抗原の位置 (細胞内か分泌か)、抗原の数、頻度、免疫投与量、抗原送達の部位と方法など、複数の変数によって影響を受けます。
抗体反応の動態
1回のDNA注入後の体液性反応は、組み換えタンパク質の1回の注入後よりもはるかに長く持続する可能性があります。B型肝炎ウイルス（HBV）エンベロープタンパク質（HBsAg）に対する抗体反応は、追加免疫なしで最大74週間持続し、インフルエンザヘマグルチニンに対する防御反応は遺伝子銃投与後のマウスで生涯にわたって維持されることが実証されました。[52]抗体分泌細胞（ASC）は、長期にわたる抗体産生のために骨髄と脾臓に移動し、通常は1年後にそこに局在します。[52]
自然（ウイルス）感染、組み換えタンパク質による免疫、pDNAによる免疫によって生成された抗体反応の比較を表4にまとめた。DNAによって生成された抗体反応は、自然感染や組み換えタンパク質による免疫が起こった場合よりもはるかにゆっくりと上昇する。マウスではピーク力価に達するまでに12週間もかかることがあるが、ブーストによりその間隔を短縮できる。この反応はおそらく数週間にわたって発現される抗原レベルが低いためであり、これが抗体反応の一次および二次段階の両方をサポートする。[説明が必要] HBVの小エンベロープタンパク質と中エンベロープタンパク質を発現するDNAワクチンを慢性肝炎の成人に注射した。ワクチンにより特異的なインターフェロンガンマ細胞が産生された。また、中エンベロープタンパク質抗原に対する特異的T細胞も生成された。患者の免疫反応はHBV感染を制御できるほど強力ではなかった[53]
さらに、DNA ワクチン接種によって生成された特定の抗体の力価は、組み換えタンパク質によるワクチン接種後に得られる力価よりも低い。しかし、DNA 免疫誘導抗体は、組み換えタンパク質誘導抗体よりも天然エピトープに対する親和性が高い。言い換えれば、DNA 免疫は質的に優れた反応を誘導する。抗体は DNA による 1 回のワクチン接種後に誘導できるが、組み換えタンパク質ワクチン接種では一般にブーストが必要である。DNA 免疫は、免疫反応の TH プロファイル、ひいては抗体アイソタイプに偏りを与えるために使用できるが、これは自然感染や組み換えタンパク質免疫では不可能である。DNA によって生成された抗体反応は、調製ツールとして有用である。たとえば、試薬として使用するためにポリクローナル抗体とモノクローナル抗体を生成することができる。[引用が必要]
DNAによって引き起こされる免疫反応のメカニズム
DNA取り込み機構
DNAの取り込みとそれに続く発現が初めて生体内で筋細胞で実証されたとき[54] 、これらの細胞はT管の広範なネットワークを持つため独特であると考えられていました。電子顕微鏡を用いたところ、DNAの取り込みは小胞（または、クラスリン非被覆小窩）によって促進されると提案されました。 [55]しかし、その後の研究では、他の細胞（ケラチノサイト、線維芽細胞、上皮 ランゲルハンス細胞など）もDNAを内部化できることが明らかになりました。 [46] [56] DNA取り込みのメカニズムは不明です。
2つの説が支配的である。1つは、生体内でのDNAの取り込みは非特異的に、貪食または飲作用に似た方法で起こるというもの[21]、もう1つは特異的な受容体を介して起こるというもの[57]である。これらには、30kDaの表面受容体、またはマクロファージスカベンジャー受容体が含まれる可能性がある。 [説明が必要] 30kDaの表面受容体は、4500 bpのDNA断片（その後内部化される）に特異的に結合し、プロのAPCおよびT細胞に見られる。マクロファージスカベンジャー受容体は、ポリリボヌクレオチドを含むさまざまな高分子に結合するため、DNA取り込みの候補となる。[57] [58]受容体を介したDNA取り込みは、ポリグアニル酸配列の存在によって促進される可能性がある。[要説明] [要出典] 遺伝子銃送達システム、カチオン性リポソーム包装、およびその他の送達方法は、この侵入方法を回避しますが、これを理解することは、コストを削減するのに役立つ可能性があり (たとえば、サイトフェクチンの必要性を減らすことによって)、これは畜産において重要になる可能性があります。
骨髄由来細胞による抗原提示
キメラマウスを用いた研究では、抗原は骨髄由来細胞によって提示されることが示されており、これには樹状細胞、マクロファージ、および専門抗原提示細胞（APC）と呼ばれる特殊なB細胞が含まれます。 [49] [59]皮膚への遺伝子銃接種後、トランスフェクトされたランゲルハンス細胞は流入領域リンパ節に移動して抗原を提示します。[7] IMおよびID注射後、樹状細胞は流入領域リンパ節で抗原を提示し[56]、トランスフェクトされたマクロファージは末梢血中に発見されています。[60]
樹状細胞やマクロファージの直接トランスフェクションの他に、IM、ID、遺伝子銃によるDNA送達後にクロスプライミングが発生する。クロスプライミングは、骨髄由来細胞がMHCクラス1のコンテキストで別の細胞で合成されたタンパク質のペプチドを提示するときに発生する。これは細胞傷害性T細胞応答をプライミングすることができ、完全な一次免疫応答にとって重要であると思われる。[7] [61]
ターゲットサイトの役割
IM および ID による DNA の送達は、免疫応答を異なる方法で開始します。皮膚では、ケラチノサイト、線維芽細胞、ランゲルハンス細胞が抗原を取り込み、発現し、一次抗体応答を誘発します。トランスフェクトされたランゲルハンス細胞は皮膚から (12 時間以内に) 排出リンパ節に移動し、そこで二次 B 細胞および T 細胞応答を刺激します。骨格筋では、横紋筋細胞が最も頻繁にトランスフェクトされますが、免疫応答には重要ではないようです。代わりに、IM 接種された DNA は数分以内に排出リンパ節に「流れ込み」、そこで遠位の樹状細胞がトランスフェクトされ、免疫応答を開始します。トランスフェクトされた筋細胞は、輸送専門の APC の抗原の「貯蔵庫」として機能するようです。[21] [54] [61]
免疫反応の維持
DNAワクチン接種は、B細胞を刺激する強力な濾胞樹状細胞（FDC）上に抗原抗体複合体を表示することで、効果的な免疫記憶を生成します。T細胞は、同様の胚中心樹状細胞によって刺激されます。抗体産生が抗原の長期発現と「重複」し、抗原抗体免疫複合体が形成されてFDCによって表示されるため、FDCは免疫記憶を生成することができます。[7]
インターフェロン
ヘルパーT細胞と細胞傷害性T細胞はどちらもインターフェロンを分泌することでウイルス感染を制御できます。細胞傷害性T細胞は通常、ウイルスに感染した細胞を殺します。しかし、細胞傷害性T細胞はIFN-γやTNF-αなどの抗ウイルスサイトカインの分泌を刺激されることもあり、これらは細胞を殺さずにウイルス成分の発現を抑制することでウイルス感染を制限します。[62] DNAワクチンは、非破壊的なIFNを介した制御によってウイルス感染を抑制するために使用できます。これはB型肝炎で実証されています。[63] IFN-γはマラリア感染の制御に非常に重要であり[64]、抗マラリアDNAワクチンの検討材料となっています。
免疫反応の調節
サイトカイン調節
効果的なワクチンは、特定の病原体に対して適切な免疫反応を誘発する必要があります。DNAワクチンは、T細胞の補助をTH1またはTH2プロファイルに偏らせ、必要に応じてCTLや抗体を生成することができます。これは、抗原の発現形態（細胞内か分泌か）、送達方法と経路、または投与量を変更することで実現できます。[41] [42] [65] [66] [67]また、免疫調節分子、つまりサイトカイン、リンフォカイン、または共刺激分子をコードするプラスミドDNAを併用することでも実現できます。これらの「遺伝的アジュバント」は、次のように投与できます。
- 2つのプラスミドの混合物。1つは免疫原をコードし、もう1つはサイトカインをコードする。
- スペーサー領域で区切られた単一の2または多シストロンベクター
- プラスミドコード化キメラ、または融合タンパク質
一般的に、炎症誘発物質（さまざまなインターロイキン、腫瘍壊死因子、GM-CSFなど）とTH2誘導サイトカインの併用は抗体反応を増加させますが、炎症誘発物質とTH1誘導サイトカインの併用は体液性反応を減少させ、細胞傷害性反応を増加させます（ウイルス防御においてより重要）。B7-1 、B7-2、CD40Lなどの共刺激分子が使用されることもあります。
この概念は、 IL-10をコードするpDNAの局所投与に応用された。[33] B7-1をコードするプラスミド（APC上のリガンド）は、腫瘍モデルにおいて免疫応答を効果的に増強した。GM-CSFをコードするプラスミドとP. yoeliiのスポロゾイト周囲タンパク質（PyCSP）を混合すると、その後の攻撃に対する防御が強化された（プラスミドでコード化されたPyCSP単独では防御は強化されなかった）。GM-CSFは樹状細胞に抗原をより効率的に提示させ、IL-2産生とTH細胞の活性化を促進し、免疫応答の増強を促すと提案された。[50]これは、最初にpPyCSPとpGM-CSFの混合物でプライミングし、続いてPyCSPを発現する組み換えポックスウイルスでブーストすることでさらに強化できる。[68]しかし、GM-CSF（またはIFN-γ、またはIL-2）をコードするプラスミドとP. chabaudi メロゾイト表面タンパク質1（C末端）とB型肝炎ウイルス表面タンパク質（PcMSP1-HBs）の融合タンパク質を同時注入すると、pPcMSP1-HBs単独の投与によって得られる防御と比較して、感染に対する防御が失われました。[30]
遺伝子アジュバントの利点は、低コストで投与が簡単なこと、不安定な組み換えサイトカインや潜在的に毒性のある「従来の」アジュバント（ミョウバン、リン酸カルシウム、モノホスホリル脂質A、コレラ毒素、カチオン性およびマンナン被覆リポソーム、QS21、カルボキシメチルセルロース、ウベニメクスなど）を回避できることである。[7] [21]しかし、長期にわたるサイトカイン発現の潜在的な毒性は確立されていない。商業的に重要な多くの動物種において、サイトカイン遺伝子は特定および単離されていない。さらに、さまざまなプラスミドコード化サイトカインは、送達時間に応じて免疫系を異なる方法で調節する。たとえば、一部のサイトカインプラスミドDNAは、免疫原pDNAの後に送達するのが最適である。これは、事前送達または同時送達によって特異的応答が減少し、非特異的応答が増加する可能性があるためである。[69]
免疫刺激CpGモチーフ
プラスミドDNA自体は免疫系に補助効果があるようです。[6] [7]細菌由来のDNAは、自然免疫防御機構、樹状細胞の活性化、およびTH1サイトカインの産生を誘発することができます。[45] [70]これは、免疫刺激性の特定のCpGジヌクレオチド配列の認識によるものです。[66] [71] CpG刺激（CpG-S）配列は、真核生物よりも細菌由来DNAで20倍頻繁に発生します。これは、真核生物が「CpG抑制」を示すためです。つまり、CpGジヌクレオチドペアは予想よりもはるかに少ない頻度で発生します。さらに、CpG-S配列は低メチル化されています。これは細菌DNAで頻繁に発生しますが、真核生物で発生するCpGモチーフはシトシンヌクレオチドでメチル化されています。対照的に、免疫応答の活性化を阻害するヌクレオチド配列（CpG中和、またはCpG-Nと呼ばれる）は、真核生物のゲノム中に過剰に存在します。[72]最適な免疫刺激配列は、2つの5'プリンと2つの3'ピリミジンに挟まれたメチル化されていないCpGジヌクレオチドです。[66] [70]さらに、この免疫刺激ヘキサマーの外側の隣接領域は、標的細胞への結合と取り込みを確実にするために、グアニンを豊富に含まなければなりません。
自然免疫系は適応免疫系と連携して、DNAにコード化されたタンパク質に対する反応を起こす。CpG-S配列はポリクローナルB細胞の活性化とサイトカイン発現および分泌の増加を誘導する。[73]刺激されたマクロファージはIL-12、IL-18、TNF-α、IFN-α、IFN-β、IFN-γを分泌し、刺激されたB細胞はIL-6と一部のIL-12を分泌する。[21] [73] [74]
DNAワクチンのプラスミドバックボーンのCpG-SおよびCpG-N配列を操作することで、コード化された抗原に対する免疫応答を確実に成功させ、免疫応答をTH1表現型に誘導することができる。これは、病原体が防御のためにTH応答を必要とする場合に有用である。CpG-S配列は、DNAワクチンと組み換えタンパク質ワクチンの両方の外部アジュバントとしても使用されており、成功率はさまざまである。低メチル化CpGモチーフを持つ他の生物は、ポリクローナルB細胞の増殖を刺激することが実証されている。[75]この背後にあるメカニズムは、単純なメチル化よりも複雑である可能性があり、低メチル化マウスDNAが免疫応答を引き起こすことは確認されていない。
免疫刺激性 CpG 配列に関する証拠のほとんどは、マウスの研究から得られています。このデータを他の種に外挿するには注意が必要です。スカベンジャー受容体の結合特異性は種によって異なるため、個々の種には異なる隣接配列が必要になる場合があります。さらに、反芻動物などの種は、胃腸への負荷が大きいため、免疫刺激性配列に鈍感な場合があります。
代替ブースト
DNA プライミング免疫応答は、組み換えタンパク質または組み換えポックスウイルスの投与によって増強できます。組み換えタンパク質を使用した「プライムブースト」戦略は、HIV-1 エンベロープタンパク質などの弱い免疫原に対する中和抗体力価、抗体の親和性および持続性の両方を効果的に増加させました。[7] [76]組み換えウイルスブーストは、DNA プライミング CTL 応答の増強に非常に効果的であることが示されています。DNA によるプライミングは、必要な免疫原に免疫応答を集中させますが、組み換えウイルスによるブーストは、より多くの抗原を発現させ、特定の CTL 応答を大幅に増加させます。
プライムブースト戦略は、多くの研究でマラリア感染に対する防御を誘導するのに成功している。マラリア原虫Plasmodium yoeliiのサーカムスポロゾイト表面タンパク質 (PyCSP) をコードするプラスミド DNA でプライムされたマウスに、同じタンパク質を発現する組み換えワクシニアウイルスでブーストしたところ、プラスミド DNA のみで免疫付与およびブーストされたマウスに比べて、抗体、CTL 活性、IFN-γ のレベルが有意に高くなり、したがって防御レベルも高くなった。[77]この効果は、組み換えワクシニアウイルスでブーストする前に、PyCSP とマウス GM-CSF をコードするプラスミドの混合物でプライムするとさらに高まる。[68]サルマラリアモデルP. knowlesiに対する効果的なプライムブースト戦略も実証されている。[78] アカゲザルは、肝臓段階の抗原2つ（スポロゾイト周囲表面タンパク質（PkCSP）とスポロゾイト表面タンパク質2（PkSSP2））と血液段階の抗原2つ（頂端メロゾイト表面タンパク質1（PkAMA1）とメロゾイト表面タンパク質1（PkMSP1p42））をコードする多成分多段階DNAワクチンで初回免疫された。その後、4つの抗原すべてをコードする組み換えカナリア痘ウイルス（ALVAC-4）で追加免疫された。免疫されたサルはスポロゾイトと感染赤血球に対する抗体、およびPkCSPからのペプチドに対するIFN-γ分泌T細胞応答を生じた。スポロゾイト攻撃に対する部分的な防御が達成され、対照サルと比較して平均寄生虫血症が大幅に減少した。これらのモデルは、ヒトのP. falciparumへの外挿には理想的ではないが、前臨床試験では重要となるであろう。
免疫反応の強化
DNA
DNA免疫の効率は、DNAを分解に対して安定化させ、抗原提示細胞へのDNAの送達効率を高めることによって改善できる。[7]これは、生分解性カチオン性微粒子（セチルトリメチルアンモニウムブロミドを配合したポリ（乳酸-グリコリド共重合体）など）をDNAでコーティングすることによって実証されている。このようなDNAコーティング微粒子は、特にミョウバンと混合した場合、組換えウイルスと同様にCTLを産生する効果を発揮する可能性がある。直径300 nmの粒子は、抗原提示細胞による取り込みに最も効率的であると思われる。[7]
アルファウイルスベクター
組み換えアルファウイルスベースのベクターは、DNAワクチンの効率を改善するために使用されています。[7]目的の抗原をコードする遺伝子はアルファウイルスレプリコンに挿入され、構造遺伝子を置き換えますが、非構造レプリカーゼ遺伝子はそのまま残ります。シンドビスウイルスとセムリキ森林ウイルスは、組み換えアルファウイルス レプリコンの構築に使用されています。従来のDNAワクチンとは異なり、アルファウイルスベクターはトランスフェクトされた細胞を殺し、一時的にのみ発現します。アルファウイルスレプリカーゼ遺伝子は、ワクチン挿入物に加えて発現されます。アルファウイルスレプリコンがどのように免疫応答を引き起こすかは明らかではありませんが、このベクターによって発現される高レベルのタンパク質、レプリコン誘導性サイトカイン応答、またはレプリコン誘導性アポトーシスによる樹状細胞による抗原の取り込みの強化が原因である可能性があります。
参照
参考文献
- ^ ab Henrique Roman Ramos および Paulo Lee Ho。「遺伝子 免疫によるヘビ抗毒素血清の開発：レビュー」。アジア太平洋およびアフリカの臨床毒性学。2 : 401–414。
- ^ ab Liu S、Wang S、Lu S（2016年4月）。「モノクローナル抗体 誘導のための技術プラットフォームとしてのDNA免疫」。Emerging Microbes & Infections。5（4）：e33。doi ：10.1038 /emi.2016.27。PMC 4855071。PMID 27048742。
- ^ ab Khan KH (2013年3月). 「DNAワクチン：疾患に対する役割」.細菌. 3 (1): 26–35. doi :10.11599/germs.2013.1034. PMC 3882840. PMID 24432284 .
- ^ ab 「インド、世界初のCOVID-19 DNAワクチンを緊急承認」ロイター2021年8月20日2021年8月22日閲覧。
- ^ abcdefghijklmn Alarcon JB、Waine GW、McManus DP (1999)。「DNAワクチン：抗寄生虫薬および抗菌剤としての技術と応用」。寄生虫学の進歩第42巻。第42巻。pp. 343–410。doi :10.1016 / S0065-308X (08)60152-9。ISBN 9780120317424. PMID 10050276。
- ^ abcdefghijklmnopqrstu v Robinson HL、Pertmer TM (2000)。ウイルス感染に対するDNAワクチン：基礎研究と応用。ウイルス研究の進歩。第55巻。pp . 1–74。doi :10.1016/S0065-3527(00) 55001-5。ISBN 9780120398553. PMID 11050940。
- ^ White LO、Gibb E、Newham HC、Richardson MD、Warren RC（1979年7月）。「キチンアッセイによる正常マウスとコルチゾン投与マウスの腎臓におけるカンジダ・アルビカンスの毒性株と弱毒株の増殖の比較」Mycopathologia . 67（3）：173–177. doi：10.1007/bf00470753. PMID 384256. S2CID 31914107.
- ^ Paoletti E, Lipinskas BR, Samsonoff C, Mercer S, Panicali D (1984 年 1 月). 「遺伝子組み換えポックスウイルスを使用した生ワクチンの構築: B 型肝炎ウイルス表面抗原と単純ヘルペスウイルス糖タンパク質 D を発現するワクシニアウイルス組み換え体の生物学的活性」.米国科学アカデミー紀要. 81 (1): 193–197. Bibcode :1984PNAS...81..193P. doi : 10.1073/pnas.81.1.193 . PMC 344637. PMID 6320164 .
- ^ 米国特許 4722848 - 合成改変ワクチンウイルスによる動物の免疫方法
- ^ Ulmer JB、Donnelly JJ、 Parker SE、Rhodes GH、Felgner PL、Dwarki VJ、他 (1993 年 3 月)。「ウイルスタンパク質をコードする DNA の注入によるインフルエンザに対する異種防御」。Science。259 ( 5102 ) : 1745–1749。Bibcode : 1993Sci ...259.1745U。doi :10.1126/science.8456302。PMID 8456302 。
- ^ Regalado A (2016年8月2日). 「米国政府は、初のジカウイルスワクチンのヒトへの試験を開始した」. MIT Technology Review Magazine . 2016年8月6日閲覧。
- ^ Chen Y、Wang S、Lu S ( 2014年2月) 。「 HIVワクチン開発のためのDNA免疫」。 ワクチン。2 ( 1):138–159。doi : 10.3390/ vaccines2010138。PMC 4494200。PMID 26344472。
- ^ Ledgerwood JE、Pierson TC、Hubka SA、Desai N、Rucker S、Gordon IJ、他 (2011 年 5 月)。「改変プロモーターを利用したウエストナイルウイルス DNA ワクチンは、第 I 相臨床試験で若年および高齢の健康な成人に中和抗体を誘導する」。The Journal of Infectious Diseases。203 (10): 1396–1404。doi : 10.1093/ infdis /jir054。PMC 3080891。PMID 21398392。
- ^ Kilpatrick AM、Dupuis AP、Chang GJ、Kramer LD（2010年5月）。「アメリカコマドリ（Turdus migratorius）のウエストナイルウイルスに対するDNAワクチン接種」。ベクター媒介性および人獣共通感染症 。10 （4）：377–380。doi ： 10.1089 /vbz.2009.0029。PMC 2883478。PMID 19874192。
- ^ ab Sedegah M, Hedstrom R, Hobart P, Hoffman SL (1994年10月). 「circumsporozoite proteinをコードするプラスミドDNAによる免疫化によるマラリアに対する防御」. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America . 91 (21): 9866–9870. Bibcode :1994PNAS...91.9866S. doi : 10.1073/pnas.91.21.9866 . JSTOR 2365723. PMC 44918. PMID 7937907 .
- ^ Harmon BT、Aly AE、Padegimas L、Sesenoglu-Laird O、Cooper MJ、Waszczak BL (2014 年 5 月)。「プラスミド DNA ナノ粒子の鼻腔内投与により、ラットの脳内でレポータータンパク質のトランスフェクションと発現が成功」。遺伝子治療。21 ( 5 ) : 514–521。doi : 10.1038/gt.2014.28。PMID 24670994。S2CID 5560134 。
- ^ ab Mor G、Klinman DM、Shapiro S、Hagiwara E、Sedegah M、Norman JA、他 (1995 年 8 月)。「Plasmodium yoelii circumsporozoite protein plasmid DNA でマウスを免疫化することによって誘発されるサイトカインおよび抗体反応の複雑性」。Journal of Immunology。155 ( 4 ): 2039–2046。doi : 10.4049 / jimmunol.155.4.2039。PMID 7636255。S2CID 37290980 。
- ^ Leitner WW、Seguin MC、Ballou WR、Seitz JP、Schultz AM、Sheehy MJ、Lyon JA (1997 年 12 月)。「マラリア原虫 Plasmodium berghei のサーカムスポロゾイトタンパク質を発現する防御デオキシリボ核酸ワクチンの筋肉内または遺伝子銃注射によって誘導される免疫応答」。Journal of Immunology。159 ( 12 ): 6112–6119。doi : 10.4049 / jimmunol.159.12.6112。PMID 9550412。S2CID 37685499 。
- ^ Böhm W、Kuhröber A、Paier T、Mertens T、Reimann J、Schirmbeck R (1996 年 6 月)。「筋肉内注射後にマウスで B 型肝炎表面抗原特異的細胞傷害性 T リンパ球および抗体反応をプライミングする DNA ベクター構造」。Journal of Immunological Methods。193 ( 1): 29–40。doi :10.1016/0022-1759(96)00035-X。PMID 8690928 。
- ^ abcdefghijk Lewis PJ、Babiuk LA ( 1999)。DNAワクチン：レビュー。第54巻。アカデミックプレス。pp. 129–88。doi :10.1016/S0065-3527(08)60367- X。ISBN 978-0-12-039854-6. PMID 10547676。
{{cite book}}:|journal=無視されました (ヘルプ) - ^ André S、Seed B、Eberle J、Schraut W、Bültmann A、Haas J (1998 年 2 月)。「最適化されたコドン使用法による合成 gp120 配列を用いた DNA ワクチン接種によって誘発される免疫応答の増強」。Journal of Virology。72 ( 2 ) : 1497–1503。doi : 10.1128 /JVI.72.2.1497-1503.1998。PMC 124631。PMID 9445053 。
- ^ Muthumani K、Zhang D、Dayes NS、Hwang DS、Calarota SA、Choo AY、他 (2003 年 9 月)。「新規に設計された HIV-1 East African Clade-A gp160 プラスミド構築物は、生体内で強力な体液性および細胞性免疫応答を誘導します」。Virology . 314 ( 1): 134–146. doi : 10.1016/S0042-6822(03)00459-8 . PMID 14517067。
- ^ Oliveira PH、Prather KJ、Prazeres DM 、 Monteiro GA（2009年9月）。「プラスミドバイオ医薬品の構造的不安定性：課題と影響」。Trends in Biotechnology。27（9）：503–511。doi ： 10.1016 /j.tibtech.2009.06.004。PMID 19656584 。
- ^ Oliveira PH、Mairhofer J (2013 年 9 月)。「バイオテクノロジーへの 応用のためのマーカーフリープラスミド - 影響と展望」。Trends in Biotechnology。31 ( 9): 539–547。doi : 10.1016 /j.tibtech.2013.06.001。PMID 23830144 。
- ^ Kutzler MA 、Weiner DB (2008 年 10 月)。「DNA ワクチン: プライムタイムの準備は整ったか?」Nature Reviews。遺伝学。9 ( 10 ) : 776–788。doi : 10.1038 /nrg2432。PMC 4317294。PMID 18781156。
- ^ Rodriguez F、Zhang J、Whitton JL (1997 年 11 月)。「DNA 免疫: ウイルスタンパク質のユビキチン化により細胞傷害性 T リンパ球誘導と抗ウイルス防御が強化されるが、抗体誘導は阻害される」。Journal of Virology。71 ( 11 ) : 8497–8503。doi :10.1128/JVI.71.11.8497-8503.1997。PMC 192313。PMID 9343207 。
- ^ ab Tobery TW、Siliciano RF（1997年3月）。「HIV-1抗原を標的とした急速な細胞内分解により、免疫付与後の生体内での細胞傷害性Tリンパ球（CTL）認識とde novo CTL反応の誘導が促進される」。The Journal of Experimental Medicine。185 （ 5 ）：909–920。doi ：10.1084/jem.185.5.909。PMC 2196169。PMID 9120397 。
- ^ Huebener N, Fest S, Strandsby A, Michalsky E, Preissner R, Zeng Y, et al. (2008年7月). 「合理的に設計されたチロシン水酸化酵素DNAワクチンは、特異的な抗神経芽腫免疫を誘導する」. Molecular Cancer Therapeutics . 7 (7): 2241–2251. doi :10.1158/1535-7163.MCT-08-0109. PMID 18645033. S2CID 35652424.
- ^ ab Wunderlich G、Moura IC、del Portillo HA (2000 年 10 月)。「ハイブリッド メロゾイト表面タンパク質 1 と B 型肝炎ウイルス表面タンパク質の融合をコードする遺伝子を持つプラスミドによる BALB/c マウスの遺伝的免疫化により、マウスは致死的な Plasmodium chabaudi chabaudi PC1 感染から保護される」。感染と免疫 。68 ( 10 ): 5839–5845。doi :10.1128/IAI.68.10.5839-5845.2000。PMC 101545。PMID 10992493。
- ^ Weiner DB, Kennedy RC (1999年7月). 「遺伝子ワクチン」. Scientific American . 281 (1): 50–57. Bibcode :1999SciAm.281a..50W. doi :10.1038/scientificamerican0799-50. PMID 10396782. 2009年3月25日時点のオリジナルよりアーカイブ。 2007年11月21日閲覧。
- ^ Widera G、Austin M、 Rabussay D、Goldbeck C、Barnett SW、Chen M、他 (2000 年 5 月)。「生体内での電気穿孔法による DNA ワクチン送達と免疫原性の向上」。Journal of Immunology。164 ( 9): 4635–4640。doi : 10.4049 /jimmunol.164.9.4635。PMID 10779767。
- ^ ab Daheshia M、Kuklin N、 Kanangat S、Manickan E、Rouse BT（1997年8月）。「IL-10をコードするプラスミドDNAの局所投与による進行中の眼炎症性疾患の抑制」。Journal of Immunology。159（4）：1945–1952。doi ：10.4049 / jimmunol.159.4.1945。PMID 9257860。S2CID 43203331 。
- ^ ab Chen Y、Webster RG、Woodland DL (1998年3月)。「DNAワクチン接種による優勢および準優勢エピトープに対するCD8+ T細胞応答の誘導とセンダイウイルス感染に対する防御免疫」。Journal of Immunology。160 ( 5 ): 2425–2432。doi : 10.4049 /jimmunol.160.5.2425。PMID 9498786。S2CID 2250871 。
- ^ Lode HN、Huebener N、Zeng Y、Fest S、Weixler S、Gaedicke G (2004 年 12 月)。「神経芽腫の補助療法のための DNA ミニ遺伝子ワクチン接種」。Annals of the New York Academy of Sciences。1028 ( 1 ): 113–121。Bibcode :2004NYASA1028..113L。doi : 10.1196 /annals.1322.012。PMID 15650237。S2CID 27240738。
- ^ Sizemore DR、 Branstrom AA、Sadoff JC (1995 年 10 月)。「DNA 媒介免疫のための DNA 送達媒体としての弱毒化赤痢菌」。Science。270 ( 5234 ): 299–302。Bibcode : 1995Sci ...270..299S。doi : 10.1126 /science.270.5234.299。PMID 7569980。S2CID 12532901 。
- ^ Nealon, Cory (2014年11月25日). 「DNAを運ぶハイブリッド車両」ニューヨーク州立大学バッファロー校。 2014年12月16日閲覧。
- ^ Jones CH, Ravikrishnan A, Chen M, Reddinger R, Kamal Ahmadi M, Rane S, et al. (2014年8月). 「ハイブリッド生合成遺伝子治療ベクターの開発と二重エンジニアリング能力」. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America . 111 (34): 12360–12365. Bibcode :2014PNAS..11112360J. doi : 10.1073/pnas.1411355111 . PMC 4151754 . PMID 25114239.
- ^ Barry MA 、 Lai WC、Johnston SA ( 1995 年 10 月)。「発現ライブラリ免疫化によるマイコプラズマ感染からの保護」。Nature。377 ( 6550 ): 632–635。Bibcode :1995Natur.377..632B。doi : 10.1038 / 377632a0。PMID 7566175。S2CID 4306972 。
- ^ Fynan EF、Webster RG、Fuller DH、Haynes JR、Santoro JC、Robinson HL (1993 年 12 月)。「DNA ワクチン: 非経口、粘膜、遺伝子銃接種による予防免疫」。米国科学アカデミー紀要。90 (24): 11478–11482。Bibcode : 1993PNAS ... 9011478F。doi : 10.1073 / pnas.90.24.11478。PMC 48007。PMID 8265577 。
- ^ abcde Feltquate DM、Heaney S、Webster RG、Robinson HL (1997 年 3 月)。「生理食塩水および遺伝子銃 DNA 免疫化によって生成されるさまざまな T ヘルパー細胞タイプと抗体アイソタイプ」。Journal of Immunology。158 ( 5 ): 2278–2284。doi : 10.4049 / jimmunol.158.5.2278。PMID 9036975。S2CID 41368723 。
- ^ abcd Boyle CM、Morin M、 Webster RG、Robinson HL (1996 年 12 月)。「インフルエンザウイルス H1 糖タンパク質に対する DNA 産生抗体反応の開始と維持におけるさまざまなリンパ組織の役割」。Journal of Virology。70 ( 12 ): 9074–9078。doi : 10.1128 /JVI.70.12.9074-9078.1996。PMC 191015。PMID 8971047。
- ^ Sällberg M、Townsend K、Chen M、O'Dea J、Banks T、Jolly DJ、他 (1997 年 7 月)。「異なる形態の B 型肝炎ウイルスコア抗原および e 抗原を発現するレトロウイルスベクターによる遺伝的免疫化後の体液性および CD4+ 細胞性応答の特徴」。Journal of Virology。71 ( 7 ): 5295–5303。doi : 10.1128 /JVI.71.7.5295-5303.1997。PMC 191766。PMID 9188598。
- ^ Banchereau J 、Steinman RM (1998 年 3 月)。「樹状細胞と免疫の制御」。Nature。392 (6673 ) : 245–252。Bibcode : 1998Natur.392..245B。doi :10.1038/32588。PMID 9521319。S2CID 4388748。
- ^ ab Jakob T、Walker PS、Krieg AM、Udey MC、Vogel JC (1998 年 9 月)。「CpG 含有オリゴデオキシヌクレオチドによる皮膚樹状細胞の活性化: 免疫刺激 DNA による Th1 応答の増強における樹状細胞の役割」。Journal of Immunology。161 ( 6 ): 3042–3049。doi : 10.4049 / jimmunol.161.6.3042。PMID 9743369。S2CID 35107733 。
- ^ ab Raz E, Tighe H, Sato Y, Corr M, Dudler JA, Roman M, et al. (1996年5月). 「プラスミドDNA免疫によるTh1免疫応答の優先的誘導と特異的IgE抗体形成の阻害」Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America . 93 (10): 5141–5145. Bibcode :1996PNAS...93.5141R. doi : 10.1073/pnas.93.10.5141 . PMC 39421 . PMID 8643542.
- ^ ab Fu TM、Friedman A、Ulmer JB、Liu MA、Donnelly JJ (1997 年 4 月)。「保護的細胞免疫: DNA 免疫によって誘導されるインフルエンザウイルス核タンパク質の優性および劣性エピトープに対する細胞傷害性 T リンパ球応答」。Journal of Virology。71 ( 4 ) : 2715–2721。doi : 10.1128 /JVI.71.4.2715-2721.1997。PMC 191393。PMID 9060624 。
- ^ abc Restifo NP、Bacík I、Irvine KR、Yewdell JW、McCabe BJ、Anderson RW、他 (1995 年 5 月)。「生体内での抗原処理と一次 CTL 応答の誘発」。Journal of Immunology。154 ( 9 ): 4414–4422。doi : 10.4049 /jimmunol.154.9.4414。PMC 1952186。PMID 7722298。
- ^ abc Iwasaki A, Stiernholm BJ, Chan AK, Berinstein NL, Barber BH (1997 年 5 月). 「共刺激分子およびサイトカインをコードするプラスミド DNA 免疫原によって媒介される CTL 応答の強化」. Journal of Immunology . 158 (10): 4591–4601. doi :10.4049/jimmunol.158.10.4591. PMID 9144471. S2CID 41779568.
- ^ ab Weiss WR、Ishii KJ、Hedstrom RC、Sedegah M、Ichino M、Barnhart K、et al. (1998 年 9 月)。「マウス顆粒球マクロファージコロニー刺激因子をコードするプラスミドは、マラリア DNA ワクチンによる防御力を高める」。Journal of Immunology。161 ( 5 ): 2325–2332。doi : 10.4049 / jimmunol.161.5.2325。PMID 9725227。S2CID 21038927 。
- ^ Tsuji T, Hamajima K, Fukushima J, Xin KQ, Ishii N, Aoki I, et al. (1997年4月). 「プラスミドエンコードされたHIV-1抗原とIL-12発現プラスミドの同時接種によるHIV-1に対する細胞性免疫の増強」Journal of Immunology . 158 (8): 4008–4013. doi : 10.4049/jimmunol.158.8.4008 . PMID 9103472. S2CID 38099483.
- ^ ab Justewicz DM、 Webster RG（1996年10月）。「DNAベースの免疫化後のマウスにおけるインフルエンザウイルスヘマグルチニンに対するB細胞免疫の長期維持」。ウイルス学。224 （1 ）：10–17。doi ：10.1006 /viro.1996.0501。PMID 8862394。
- ^ Mancini-Bourgine M、Fontaine H、Bréchot C、Pol S、Michel ML（2006年5月）。「慢性HBVキャリアに投与されたB型肝炎DNAワクチンの免疫原性」。ワクチン。24 （ 21）：4482–4489。doi ：10.1016/ j.vaccine.2005.08.013。PMID 16310901 。
- ^ ab Wolff JA、Dowty ME、Jiao S、Repetto G、Berg RK、Ludtke JJ、et al. (1992 年 12 月)。「培養された筋管による裸プラスミドの発現と哺乳類骨格筋の T 管と小胞へのプラスミドの侵入」。Journal of Cell Science。103。103 ( 4): 1249–1259。doi :10.1242/ jcs.103.4.1249。PMID 1487500 。
- ^ Anderson RG、Kamen BA、 Rothberg KG、Lacey SW (1992 年 1 月)。「Potocytosis: caveolae による小分子の隔離と輸送」。Science 255 ( 5043): 410–411。Bibcode : 1992Sci ...255..410A。doi : 10.1126/science.1310359。PMID 1310359 。
- ^ ab Casares S、Inaba K、Brumeanu TD、Steinman RM、Bona CA (1997 年 11 月)。「主要組織適合遺伝子複合体クラス II 制限ウイルスエピトープをコードする DNA による免疫化後の樹状細胞による抗原提示」。The Journal of Experimental Medicine。186 ( 9 ) : 1481–1486。doi :10.1084 / jem.186.9.1481。PMC 2199124。PMID 9348305。
- ^ ab Bennett RM、Gabor GT、Merritt MM（1985年12月）。「ヒト白血球へのDNA結合。受容体を介したDNAの会合、内部化、および分解の証拠」。The Journal of Clinical Investigation。76（6）：2182–2190。doi ： 10.1172 /JCI112226。PMC 424340。PMID 3001145。
- ^ Bennet RM、Hefeneider SH、Bakke A、Merritt M、Smith CA、Mourich D、Heinrich MC (1988 年 5 月)。「ヒト白血球上の DNA 受容体に対するマウスモノクローナル抗体の産生と特性評価」。Journal of Immunology。140 ( 9 ): 2937–2942。doi : 10.4049 / jimmunol.140.9.2937。PMID 2452195。S2CID 22923379 。
- ^ Corr M、Lee DJ、Carson DA、Tighe H (1996 年 10 月)。「裸のプラスミド DNA による遺伝子ワクチン接種: CTL プライミングのメカニズム」。実験医学ジャーナル。184 (4): 1555–1560。doi : 10.1084 / jem.184.4.1555。PMC 2192808。PMID 8879229。
- ^ Chattergoon MA、Robinson TM、Boyer JD、Weiner DB (1998 年 6 月)。「マクロファージ/抗原提示細胞の in vivo トランスフェクションおよび活性化による DNA ベースの免疫化後の特異的免疫誘導」。Journal of Immunology。160 ( 12 ): 5707–5718。doi : 10.4049 / jimmunol.160.12.5707。PMID 9637479。S2CID 33499198 。
- ^ ab Torres CA、Iwasaki A、Barber BH 、 Robinson HL (1997 年 5 月)。「遺伝子銃および筋肉内 DNA 免疫に対する標的部位組織への異なる依存性」。Journal of Immunology。158 ( 10): 4529–4532。doi : 10.4049 / jimmunol.158.10.4529。PMID 9144463。S2CID 45069087 。
- ^ Franco A、Guidotti LG、Hobbs MV、Pasquetto V、Chisari FV (1997 年 8 月)。「B 型肝炎ウイルストランスジェニックマウスにおける CD4 陽性 T ヘルパー 1 細胞の病原性エフェクター機能」。Journal of Immunology。159 ( 4 ): 2001–2008。doi : 10.4049 / jimmunol.159.4.2001。PMID 9257867。S2CID 20528634 。
- ^ Mancini M、Hadchouel M、Davis HL、Whalen RG、Tiollais P、Michel ML (1996 年 10 月)。「B 型肝炎表面抗原慢性キャリア状態のトランスジェニックマウスモデルにおける DNA 介在免疫」。米国科学アカデミー紀要。93 (22): 12496–12501。Bibcode : 1996PNAS ... 9312496M。doi : 10.1073 / pnas.93.22.12496。PMC 38020。PMID 8901610 。
- ^ Doolan DL、Hoffman SL (1999年7月)。「マラリア原虫モデルにおいてCD8+ T細胞によって誘導されるマラリアに対する抗原特異的適応免疫にはIL-12およびNK細胞が必要である」。Journal of Immunology。163 ( 2 ) : 884–892。doi : 10.4049/ jimmunol.163.2.884。PMID 10395683。S2CID 41651105 。
- ^ Cardoso AI、Blixenkrone-Moller M、Fayolle J、Liu M、Buckland R、Wild TF（1996年11月）。「麻疹ウイルスのヘマグルチニンと核タンパク質をコードするプラスミドDNAによる免疫化は、体液性免疫と細胞性免疫をもたらす」。Virology . 225 ( 2): 293–299. doi : 10.1006/viro.1996.0603 . PMID 8918915。
- ^ abc Sato Y, Roman M, Tighe H, Lee D, Corr M, Nguyen MD, et al. (1996年7月). 「効果的な皮内遺伝子免疫化に必要な免疫刺激DNA配列」. Science . 273 (5273): 352–354. Bibcode :1996Sci...273..352S. doi :10.1126/science.273.5273.352. PMID 8662521. S2CID 9333197.
- ^ Weiss R、Leitner WW、Scheiblhofer S、Chen D、Bernhaupt A、Mostböck S、他 (2000 年 10 月)。「マラリア感染に対する遺伝子ワクチン接種。マラリア原虫 Plasmodium berghei の circumsporozoite タンパク質をコードする遺伝子を含むプラスミドの皮内および表皮注射による」。感染と 免疫。68 ( 10): 5914–5919。doi :10.1128/ IAI.68.10.5914-5919.2000。PMC 101554。PMID 10992502。
- ^ ab Sedegah M, Weiss W, Sacci JB, Charoenvit Y, Hedstrom R, Gowda K, et al. (2000 年 6 月). 「DNA ベースの免疫化によって誘導される保護免疫の改善: 抗原および GM-CSF をコードするプラスミド DNA によるプライミングと抗原発現組換えポックスウイルスによるブースティング」. Journal of Immunology . 164 (11): 5905–5912. doi : 10.4049/jimmunol.164.11.5905 . PMID 10820272.
- ^ Barouch DH、Santra S、Steenbeke TD、Zheng XX、Perry HC、Davies ME、他 (1998年8月)。「プラスミドサイトカイン/Ig投与によるHIV-1 DNAワクチンに対する免疫応答の増強および抑制」。Journal of Immunology。161 ( 4 ): 1875–1882。doi : 10.4049 / jimmunol.161.4.1875。PMID 9712056。S2CID 36488254 。
- ^ ab Krieg AM, Yi AK, Matson S, Waldschmidt TJ, Bishop GA, Teasdale R, et al. (1995年4月). 「細菌DNAのCpGモチーフが直接B細胞活性化を引き起こす」. Nature . 374 (6522): 546–549. Bibcode :1995Natur.374..546K. doi :10.1038/374546a0. PMID 7700380. S2CID 4261304.
- ^ Klinman DM、Yamshchikov G、Ishigatsubo Y (1997年4月)。「DNAワクチンの免疫原性に対するCpGモチーフの寄与」。Journal of Immunology。158 ( 8 ): 3635–3639。doi : 10.4049 / jimmunol.158.8.3635。PMID 9103425。S2CID 41861994 。
- ^ Krieg AM, Wu T, Weeratna R, Efler SM, Love-Homan L, Yang L, et al. (1998年10月). 「アデノウイルスDNAの配列モチーフは刺激性CpGモチーフによる免疫活性化をブロックする」. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America . 95 (21): 12631–12636. Bibcode :1998PNAS...9512631K. doi : 10.1073/pnas.95.21.12631 . PMC 22882 . PMID 9770537.
- ^ ab Klinman DM、Yi AK、Beaucage SL、Conover J、Krieg AM (1996 年 4 月)。「細菌 DNA に存在する CpG モチーフは、リンパ球によるインターロイキン 6、インターロイキン 12、インターフェロン ガンマの分泌を急速に誘導する」。米国 科学アカデミー紀要。93 (7): 2879–2883。Bibcode : 1996PNAS... 93.2879K。doi : 10.1073 / pnas.93.7.2879。PMC 39727。PMID 8610135。
- ^ Yi AK、Chace JH、Cowdery JS、Krieg AM (1996 年 1 月)。「IFN-γ は細菌 DNA およびオリゴデオキシヌクレオチドの CpG モチーフに反応して IL-6 および IgM の分泌を促進する」。Journal of Immunology。156 ( 2 ): 558–564。doi : 10.4049/ jimmunol.156.2.558。PMID 8543806。S2CID 42145608 。
- ^ Barwick BG、Scharer CD、Martinez RJ、Price MJ、Wein AN、Haines RR、他 (2018年5月)。「B細胞の活性化と形質細胞の分化は、de novo DNAメチル化によって阻害される」。Nature Communications。9 ( 1 ) : 1900。Bibcode : 2018NatCo ...9.1900B。doi :10.1038/s41467-018-04234-4。PMC 5953949。PMID 29765016。
- ^ Letvin NL、Montefiori DC、Yasutomi Y、Perry HC、Davies ME、Lekutis C、他 (1997 年 8 月)。「二峰性 HIV エンベロープ DNA とタンパク質ワクチン接種によって生成される強力な保護的抗 HIV 免疫応答」。米国科学アカデミー紀要。94 (17): 9378–9383。Bibcode : 1997PNAS ...94.9378L。doi : 10.1073 / pnas.94.17.9378。PMC 23198。PMID 9256490。
- ^ Sedegah M、Jones TR、Kaur M、Hedstrom R、Hobart P、Tine JA、Hoffman SL (1998 年 6 月)。「組み換えワクチンによるブーストはマラリア DNA ワクチンの免疫原性と予防効果を高める」。米国科学アカデミー紀要。95 (13): 7648–7653。Bibcode : 1998PNAS ...95.7648S。doi : 10.1073 / pnas.95.13.7648。PMC 22711。PMID 9636204。
- ^ Rogers WO、Baird JK、Kumar A、Tine JA、Weiss W、Aguiar JC、他 (2001 年 9 月)。「マラリア Plasmodium knowlesi に対する多段階多抗原異種プライムブーストワクチンはアカゲザルに部分的な防御を提供する」。感染と 免疫。69 ( 9): 5565–5572。doi : 10.1128 /IAI.69.9.5565-5572.2001。PMC 98670。PMID 11500430。
さらに読む
Scholia には DNA ワクチン (Q578537) のプロファイルがあります。
- Hooper JW、Thompson E、Wilhelmsen C、Zimmerman M、Ichou MA、Steffen SE、他 (2004 年 5 月)。「天然痘 DNA ワクチンは非ヒト霊長類を致死的なサル痘から保護する」。Journal of Virology。78 ( 9 ): 4433–4443。doi : 10.1128 /JVI.78.9.4433-4443.2004。PMC 387704。PMID 15078924。