構造 定性的に見ると、グアニン(G)とシトシン(C)は互いに特異的な水素結合を形成するのに対し、アデニン(A)はDNAではチミン(T)と、RNAではウラシル(U)と特異的に結合します。定量的に見ると、GC 塩基対 は3つの水素結合で結びついているのに対し、ATおよびAU塩基対は2つの水素結合で結びついています。この違いを強調するために、塩基対はしばしば「G≡C」対「A=T」または「A=U」と表記されます。
GC含量の低いDNAはGC含量の高いDNAよりも不安定ですが、水素結合自体は分子の安定性に特に大きな影響を与えず、分子の安定性は主に塩基スタッキングの分子間相互作用によって引き起こされます。[ 2 ] GCペアの熱安定性 のため、かつてはDNAのGC含量が高いことは高温への必要な適応 であると推測されていましたが、この仮説は2001年に100以上の原核生物の比較分析によって後に否定されました。[ 3 ] さらに、 GC含量の高いDNAを持つ細菌 種であるP. putrefaciensは、 自己分解 がより容易に起こり、それによって細胞全体の寿命が短くなることが観察されています。[ 4 ] それでもなお、高温での原核生物 の最適な成長と、リボソームRNA 、トランスファーRNA 、および他の多くの非コードRNA などの構造RNAのGC含量との間に強い相関があることが示されています。[ 3 ] [ 5 ] AU塩基対はGC塩基対よりも不安定であるため、GC含有量の高いRNA構造は高温の影響に対してより耐性がある。
近年、二本鎖核酸の熱安定性に寄与する最も重要な要因は、塩基間の水素結合の数ではなく、隣接する塩基のスタッキングによるものであることが実証されている。環外基の相対的な位置関係から、GCペアはATペアやAUペアよりもスタッキングエネルギーが有利である。さらに、塩基のスタッキング順序と分子全体の熱安定性の間には相関関係がある。[ 6 ]
決定 ヒトの核型図の模式図。G バンド染色( ギムザ染色 を含む)によるヒトゲノム の概要を示しており、GC含量の高い領域は明るく、GC含量の低い領域は暗く示されている。 GC含有量は通常パーセント値で表されますが、比率(G+C比 またはGC比 と呼ばれる)で表される場合もあります。GC含有量パーセントは次のように計算されます[ 7 ]
G + C A + T + G + C × 100 % \displaystyle {\cfrac {G+C}{A+T+G+C}}\times 100\%} 一方、AT/GC比は[ 8 ]のように計算される。
A + T G + C {\displaystyle {\cfrac {A+T}{G+C}}} 。GC含有率およびGC比はいくつかの方法で測定できますが、最も簡単な方法の1つは、分光光度計 を使用してDNA二重らせんの 融解温度 を測定することです。260 nm の波長 でのDNAの吸光度 は、十分に加熱されて二本鎖DNA分子が2本の一本鎖に分離すると、かなり急激に増加します。[ 9 ] GC比を決定するために最も一般的に使用されるプロトコルは、多数のサンプルに対してフローサイトメトリーを使用することです。 [ 10 ]
別の方法として、調査対象のDNAまたはRNA分子が確実に配列決定され ている場合は、GC含有量を簡単な算術演算、または無料のオンラインGC計算機などのさまざまな公開ソフトウェアツールを使用して正確に計算でき ます 。
ゲノムコンテンツ
ゲノム内変異 ゲノム内のGC比は著しく変動することがわかっています。より複雑な生物のゲノム内のGC比のこれらの変動は、アイソコア と呼ばれる島状領域を持つモザイク状の形成をもたらします。[ 11 ] これにより、染色体 の染色強度の変動が生じます。[ 12 ] GCリッチなアイソコアには通常、多くのタンパク質コード遺伝子が含まれているため、これらの特定の領域のGC比の決定は、ゲノムの遺伝子リッチ領域のマッピング に貢献します。 [ 13 ] [ 14 ]
アプリケーション
分子生物学 ポリメラーゼ連鎖反応 (PCR)実験では、プライマー と呼ばれる短いオリゴヌクレオチドのGC含量が、鋳型DNAとのアニーリング温度を 予測するためによく用いられる。GC含量が高いほど、融解温度も高くなる。
Illuminaシーケンス などの多くのシーケンス技術は、GC含量の高い配列の読み取りに問題があります。鳥類の ゲノムにはそのような部分が多く存在することが知られており、進化や表現型から存在すると予想されるにもかかわらず、改良された方法が使用されるまで配列決定されなかった「欠落遺伝子」の問題を引き起こしていました。[ 26 ]
GCSpeciesSorter [ 31 ] と TopSort [ 32 ] は、GC 含有量に基づいて種を分類するためのソフトウェア ツールです。
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外部リンク 配列決定されたすべての原核生物のGC含量を示す表 NCBIウェブサイト上のGC比に基づく細菌の分類学的ブラウザ。 様々な種におけるGC比。