U.S. Route 421

US 421はフォート・フィッシャー州立レクリエーションエリア付近から始まり、ノースカロライナ州南東部の海岸沿いを通りウィルミントンに至ります。その後、北西方向にクリントン、ダン、リリントン、サンフォード、サイラーシティを経由してピードモント・トライアド地域へと向かいます。ウィルミントン北部とグリーンズボロの間にある主要な高速道路のジャンクションは、ノースカロライナ州道11号線（NC  11）、州間高速道路95号線（I-95）、US  401、US  1、US  64、I-85です。グリーンズボロでは、グリーンズボロの南、プレザントガーデン付近でI-85と、グリーンズボロの北西、コルファックス付近でI-73と並行するグリーンズボロ都市環状線に沿っています。その後、都市環状線を離れ、旧ビジネスループ40のルートに沿って独立した高速道路となり、フォース郡方面のI-40に接続します。グリーンスボロとウィンストン・セーラムの間にある主要な交差点は、 NC 150、NC 66、NC 67、US 158、US 52です。ウィンストン・セーラムを過ぎると、I-40 と再び交差しますが、ルイスビル、ヤドキンビル、ウィルクスボロ、ブーンを通過して西に進みます。ウィンストン・セーラムとブーンの間の主要な高速道路のジャンクションは、US 601、I-77、NC 16、ブルーリッジ・パークウェイ、US 221、US 321 です。US 421は西に進み、テネシー州マウンテン・シティに向かいます。US 421は、サイラー・シティを北に向かう制限付き高速道路です。US 421 は、 NC 49の北からウィルクスボロまで分離帯のある高速道路です。            

US 421は、トレードでノースカロライナ州からテネシー州に入ります。トレードはテネシー州最古の交差点の町であり、州の最東端に位置しています。この道路は、テネシー州内では直線距離は短いものの、2つの山脈を横断します。トレードを過ぎると、ダウンタウンを迂回しながら時速40マイル（64km /h）制限の区域を通ってマウンテンシティへと進みます。マウンテンシティを過ぎると、2つの山脈が始まり、その間にシェイディバレーの地域があります。この2つの山脈は、「ザ・スネーク」として知られる人気のバイクルートです。約30マイル（48km ）の道のりに400以上のカーブがあります。2つ目の山脈を過ぎると、サウスフォーク・ホルストン川を過ぎて平坦になり、ブリストルに向かいます。US 421は、ブリストルのオールドドミニオン側でバージニア州に入ります。ノースカロライナ州とバージニア州の州境を結ぶ主要な高速道路の交差点は、マウンテンシティの州道67号線（SR 67）、マウンテンシティの新しいバイパスである州道91号線、州道394号線、および国道11号線東線です。       

国道421号線はテネシー州ブリストルからバージニア州に入り、西へウェーバーシティ、ダフィールド、そしてバージニア州南西部のペニントンギャップへと続く。このルートはカンバーランド山脈とパウエル山脈を通り抜け、ダフィールド近郊のナチュラルトンネル州立公園のそばを通る。

US 421号線は、バージニア州のペニントンギャップ地域からハーラン郡まで272.4マイル（438.4km ）にわたって走り、ブルーグラス州に入ります。 

バージニア州境からハル・ロジャース・パークウェイ付近までは、南北に走る主要な2車線道路です。ただし、追い越し区間は、バージニア州境を過ぎてハーランを通り、国道 119号線沿いの区間にほぼ限定されています。その後、国道 421号線はパイン山を越えてレスリー郡に入り、ハイデンで西に曲がり、ハル・ロジャース・パークウェイと並行します。マンチェスターとマッキーの間では、国道421号線はカーブが多く、どちらかというと地方道のような様相を呈しています。

カンバーランド高原からマディソン郡のビッグヒル（ベレア近郊）でブルーグラス地方に下りるにつれて、道路の状態は良くなる。リッチモンドの南にあるブルーグラス陸軍補給廠で国道 25号線に合流し、レキシントン方面へ向かう州間高速道路75号線とほぼ並行する。レキシントン市内では、リッチモンド・ロード、メイン・ストリート、リースタウン・ロードと名付けられる。レキシントンとフランクフォート間の区間は、かつてケンタッキー州道50号線（KY 50）に指定されていた。この区間では、国道62号線が国道421号線とわずかに並行して走る。  

フランクフォートでは、国道421号線は町の西側で国道60号線と並走し、その後、市の北側バイパス内を走り、一時的に国道 127号線に合流します。国道421号線はその後、フランクリン郡北西部の非常に起伏の多い地域を横断し、フラッグフォーク地区周辺を通ります。さらにヘンリー郡とトリンブル郡を通過し、ミルトンで州を出て、ミルトン・マディソン橋でオハイオ川を渡り、インディアナ州マディソンに入ります。

国道421号線は、州南東部のマディソンからインディアナポリスまで、インディアナ州南部を蛇行しながら走っています。グリーンズバーグの北で、国道421号線は州間高速道路74号線西行き と交差し、シェルビービル地区を通ってインディアナポリスへと合流します。元々、国道421号線はサウスイースタン・アベニューに沿ってインディアナポリスのダウンタウンに入り、そこで国道40号線（ワシントン・ストリート）と合流してウェスト・ストリートに至り、そこから北に向きを変え、ウェスト・ストリート、ノースウェスタン・アベニュー（後にMLKストリート）、ミシガン・ロードに沿って市の北西側まで進んでいました。国道421号線は、インディアナポリスのランドマークであるピラミッドのそばを通っていました。インディアナポリスの北では、国道421号線は北北西に進み、インディアナポリスとミシガン・シティを直接結ぶ高速道路となっています。国道421号線は、ミシガン・シティの南側で国道20号線と交差して終点となります。元々、この高速道路の終点は、ミシガン湖畔近くの国道12号線との交差点から数マイル北に位置していた。      

国道421号線は、クリントンとウィルミントンの間はほぼ同じルートをたどっている。しかし、クリントンからテネシー州境にかけては、いくつかの古いルートが存在する。

• 国道421号線はクリントンを迂回しており、旧ルートは地元の道路を利用している。
• ダンとサンフォードの間は、古い路線を使用しており、完全に繋がっている。
• ゴールドストンとグリーンズボロの間では、いくつかの古い路線が使われているが、完全に繋がっているわけではない。
• グリーンスボロとウィルクスボロの間では、異なる線形を持つ複数の古い線路が使用されている。さらに、それらはもはや一貫して接続されているわけではない。
• 国道421号線はウィルクスボロを迂回し、専用の国道ビジネスルートが設けられている。
• ディープギャップとブーンの間では、新しいルートが採用されている。
• ビラスとテネシー州境の間では、古い路線が使われている。