H&E染色

ヘマトキシリン・エオシン染色（または ヘマトキシリン・エオシン染色、ヘマトキシリン・エオシン染色、しばしばH&E染色またはHE染色と略される）は、組織学で使用される主要な組織染色の1つである。^{[1] [2] [3]これは}医療診断で最も広く使用されている染色であり^[1]、多くの場合ゴールドスタンダードである。^[4]たとえば、病理学者が癌の疑いのある生検を観察する場合、組織学的切片はH&E染色で染色される可能性が高い。

H&Eは、ヘマトキシリンとエオシンという2つの組織学的染色を組み合わせたものです。ヘマトキシリンは細胞核を紫がかった青に染め、エオシンは細胞外マトリックスと細胞質をピンクに染め、他の構造はさまざまな色合いや色調、およびこれらの色の組み合わせになります。^{[5] [6]}そのため、病理学者は細胞の核と細胞質部分を簡単に区別でき、さらに、染色による全体的な色のパターンから細胞の一般的なレイアウトと分布がわかり、組織サンプルの構造の概要がわかります。^{[7]このように、}専門家自身によるパターン認識と、専門家を支援するソフトウェア（デジタル病理学）の両方によるパターン認識によって、組織学的情報が得られます。

この染色法は1877年にロシアのカザン帝国大学の化学者ニコラウス・ヴィソツキーによって導入されました。^{[8] [7]}

H&E染色法は組織学における主要な染色法である^{[3] [7] [2] [5]。}その理由は、迅速に行えること、^[7]費用がかからず、組織を染色することでかなりの量の顕微鏡的解剖学的構造が明らかになり、^{[9] [10] [7] [5] [4]}、広範囲の組織病理学的状態の診断に使用できることなどがある。^[8] H&E染色法の結果は、組織を固定するために使用される化学物質や実験室プロトコルのわずかな不一致にあまり左右されないため、 ^[11]これらの要因が組織学における日常的な使用に貢献している。^[7]

H&E染色では、必ずしもすべての組織、細胞構造、化学物質の分布を区別するのに十分なコントラストが得られない^[9]ため、このような場合には、より特異的な染色と方法が使用されます。^{[10] [7]}

H&E法で使用するヘマトキシリン溶液（製剤）を調製する方法は数多くあり^{[11] [12] [6]}、さらにH&E染色スライドを作成するための実験室プロトコルも数多くあり^[9] 、そのいくつかは特定の実験室に固有のものである可能性があります。^[7]標準的な手順はありませんが^{[11] [9]、慣例により、細胞核は青く染色され、}細胞質と細胞外マトリックスはピンクに染色されるという結果がかなり一貫しています。[7]組織学研究室では、特定の病理学者のために染色の量や種類を調整することもあります。^{[7 ]}

組織を採取（多くの場合は生検として）して固定した後、通常は脱水して溶かしたパラフィンワックスに包埋し、得られたブロックをミクロトームに載せて薄いスライスに切断します。^[6]スライスは顕微鏡のスライドに貼り付けられ、その時点でワックスが溶剤で除去され、スライドに貼り付けられた組織スライスは再水和されて染色の準備が整います。^{[6]また、H&E染色は}モーズ手術で最もよく使用される染色で、通常、組織は凍結され、クライオスタット（凍結組織を切断するミクロトーム）で切断され、アルコールで固定されてから染色されます。^[9]

H&E染色法では、金属塩または媒染剤と混合したヘマトキシリンを塗布し、その後に弱酸性溶液ですすいで余分な染色（分化）を除去し、弱アルカリ性水で青く染めることが多い。 ^{[13] [8] [14]}ヘマトキシリンを塗布した後、組織をエオシン（最も一般的なのはエオシンY ）で対比染色する。^{[6] [8] [7]}

ヘマトキシリンは主に細胞の核を青や濃い紫色に染め、^{[6] [15] [14]}ケラトヒアリン顆粒や石灰化物質などの他の組織にも染める。エオシンは細胞質やコラーゲンなどの細胞外マトリックスを含む他の構造を最大5段階のピンク色に染める^{[5] [7] [14] 。 [8]}好酸性（エオシンで染色される物質）^{[5]構造は一般に細胞内または細胞外}タンパク質で構成される。レビー小体やマロリー小体は好酸性構造の例である。細胞質の大部分は好酸性でピンク色に染められる^{[10] [15]}赤血球は濃い赤色に染められる。^[要出典]

ヘマテイン（ヘマトキシリンの酸化型） ^{[5] [16] [14]}は活性色素であるが（媒染剤と組み合わせた場合）、染色は依然としてヘマトキシリンと呼ばれている。^{[8] [13]}ヘマトキシリンは媒染剤（最も一般的なのはアルミニウムミョウバン）と組み合わせると、塩基性、正電荷、または陽イオン性染色に「似ている」とよく考えられている。^{[5]エオシン}は陰イオン性（負電荷）で酸性の染色剤である。^{[5] [10]}ヘマラム（アルミニウムイオンとヘマテインの組み合わせ）^[14]による核の染色は通常、染料-金属錯体がDNAに結合することによって起こるが、組織切片から^DNAを抽出した後で核の染色を得ることもできる。そのメカニズムは、チオニンやトルイジンブルーなどの塩基性（陽イオン性）染料による核の染色とは異なる。^[10]塩基性染料による染色はヘマラムより酸性度の低い溶液からのみ起こり、核酸を事前に化学的または酵素的に抽出することで防ぐことができる。アルミニウムとヘマテインを結合させるものと同様の配位結合がヘマラム複合体をDNAおよび核クロマチン中のタンパク質のカルボキシル基に結合させることを示す証拠がある。^[要出典]

好塩基性や好酸性と呼ばれるためには、構造が酸性や塩基性である必要はなく、この用語は細胞成分の染料に対する親和性に基づいています。サンプルには、メラニンなどの内因性色素によって生じる黄色や茶色などの他の色が存在する場合があります。基底膜は、よく見えるようにするには、PAS 染色または一部の銀染色で染色する必要があります。網状繊維も銀染色が必要です。疎水性構造も透明なままである傾向があり、これらは通常、脂肪を豊富に含み、たとえば脂肪細胞、ニューロン軸索の周囲のミエリン、ゴルジ体膜などです。^{[出典が必要]}

• Kiernan JA (2008)「組織学的および組織化学的方法：理論と実践」第 4 版。Bloxham、英国：Scion。
• Lillie RD、Pizzolato P、Donaldson PT (1976) 可溶性メタクローム媒染レーキ染料による核染色。化学的末端基遮断反応と組織への酸性基の人工導入の影響。組織化学 49: 23–35。
• Llewellyn BD (2009)「ミョウバンヘマトキシリンによる核染色」バイオテクノロジー組織化学84:159–177。
• Puchtler H, Meloan SN, Waldrop FS (1986) 「金属ヘマテインおよび金属ブラジレイン染色への最新化学概念の応用」 組織化学 85: 353–364。

ウィキメディア・コモンズには、H&E 染色に関連するメディアがあります。

• SIGMA-ALDRICH H&E 情報入門

• 通常のマイヤーのヘマトキシリン・エオシン染色（H&E）は、2023年6月2日にWayback Machineにアーカイブされました
• ヘマトキシリン＆エオシン（H&E）染色プロトコル
• ローゼン研究室、ベイラー医科大学分子細胞生物学科）ステップバイステップのプロトコル
• HE染色