構造 最初に、INSR 遺伝子由来の代替スプライスバリアントの転写産物が 翻訳され 、2つのモノマー異性体のいずれかが形成される。1つはエクソン11が除外されたIR-A、もう1つはエクソン11が含まれたIR-Bである。エクソン11が含まれることで、内在性 フリン タンパク質分解切断部位の上流に12個のアミノ酸が付加される。
インスリン受容体のカラーコード付き模式図 受容体の二量体化に伴い、タンパク質 分解によってα鎖とβ鎖に切断された後、追加の12個のアミノ酸がα鎖のC末端（αCTと表記）に残り、受容体 とリガンドの 相互作用に影響を与えると予測されている。[ 9 ]
各アイソメトリックモノマーは 、構造的に8つの異なるドメインに組織化されており、ロイシンリッチリピートドメイン（L1、残基1～157）、システインリッチ領域（CR、残基158～310）、追加のロイシンリッチリピートドメイン（L2、残基311～470）、3つのフィブロネクチンタイプIIIドメイン （FnIII-1（残基471～595）、FnIII-2（残基596～808）、FnIII-3（残基809～906））から構成されます。さらに、FnIII-2内には挿入ドメイン（ID、残基638～756）が存在し、α/βフリン切断部位を含んでおり、そこからタンパク質分解によってIDαドメインとIDβドメインが生成されます。 β鎖内では、FnIII-3ドメインの下流に膜貫通ヘリックス（TH）と細胞内膜近傍（JM）領域があり、そのすぐ上流には細胞内チロシンキナーゼ（TK）触媒ドメインがあり、その後の細胞内シグナル伝達経路を担っている。[ 10 ]
モノマーがそれぞれのα鎖とβ鎖に切断されると、受容体のヘテロ二量体化またはホモ二量体化は、鎖間では単一のジスルフィド結合によって、二量体内のモノマー間では各α鎖から伸びる2つのジスルフィド結合によって共有結合的に維持される。4つのリガンド結合部位を持つ全体的な3D細胞外ドメイン 構造は、逆「V」に似ており、各モノマーは逆「V」に平行に走る軸を中心に約2回回転し、各モノマーのL2ドメインとFnIII-1ドメインが逆「V」の頂点を形成する。[ 10 ] [ 11 ]
リガンド結合 ナノディスクに再構成された全長ヒトインスリン受容体におけるリガンド誘導性構造変化。左：非活性化受容体構造、右：インスリン活性化受容体構造。変化は個々の分子の電子顕微鏡観察（上図）で可視化され、模式図（下図）で示されている。[ 12 ] 左 - リガンド飽和IR細胞外ドメインのクライオEM構造。右 - 4つの結合部位と結合時のIR構造を模式的に漫画で示したもの。[ 13 ] インスリン受容体の内因性リガンドには、インスリン 、IGF-I 、IGF-II が含まれます。クライオ電子顕微鏡 を用いて、インスリン結合時の構造変化に関する構造的知見が得られました。リガンドが IR 二量体細胞外ドメインの α 鎖に結合すると、逆 V 字型から T 字型のコンフォメーションに変化し、この変化は構造的に膜貫通ドメインに伝播し、両者が接近することで、最終的に β 鎖の細胞内 TK ドメイン内のさまざまなチロシン残基の自己リン酸化が起こります。[ 12 ] SH2-B ( Src ホモロジー 2-B)、APS 、PTP1B などのタンパク質ホスファターゼに加えて、インスリン受容体基質タンパク質 (IRS) などの特定のアダプタータンパク質 のリクルートが促進され、最終的に血糖恒常性に関わる下流プロセスが促進されます。[ 14 ]
厳密に言えば、IRとリガンドの関係は複雑なアロステリック特性を示します。これは、IRに結合したリガンドと結合していないリガンドの比率の測定値が、IRに結合したリガンドの濃度の変化に対して線形関係に従わないことを示すScatchardプロットの使用によって示され、IRとそのリガンドが協同的 結合 の関係を共有していることを示唆しています。[ 15 ] [ 15 ]
これらのモデルによれば、各 IR モノマーは 2 つのインスリン結合部位を持ち、部位 1 はL1 と αCT ドメインからなるインスリン の「古典的な」結合面と結合し、部位 2 は FnIII-1 と FnIII-2 の接合部のループからなり、インスリンの「新しい」六量体面結合部位と結合すると予測される。[ 5 ] [ 5 ] [ 14 ] 「架橋」 が発生すると予測されます (つまり、[モノマー 1 部位 1 - インスリン - モノマー 2 部位 (4/2')] または [モノマー 1 部位 2 - インスリン - モノマー 2 部位 (3/1')] のように)。現在の IR-インスリン動態の数学的モデルに従って、インスリン架橋の事象には 2 つの重要な結果があります。 1. 前述のIRとそのリガンド間の負の協働の観察により、その後のリガンドのIRへの結合が減少すること、および2. 架橋の物理的作用により、細胞内チロシンリン酸化イベントの発生に必要なコンフォメーション にエクトドメインが移行すること（すなわち、これらのイベントは受容体の活性化と最終的な血糖恒常性の維持に必要なものである）。[ 14 ]
全長IR複合体の可視化は、多くの制約のためまだ実現していません。全長IR-インスリン複合体の可視化は、膜貫通（TM）ドメインと細胞外ドメインおよび細胞内ドメインの柔軟な連結のため、まだ実現していません。膜貫通（TM）ドメインは、活性化および下流シグナル伝達に不可欠です。TMドメインの安定化は、ホスファチジルイノシトールの結果である可能性があります。一方、全長IR-下流タンパク質の可視化は、結合の一過性、リン酸化受容体の必要性、および固定されていない相対的な向きのため困難です。[ 16 ]
ナノディスク に再構成された受容体のクライオ電子顕微鏡法と分子動力学 シミュレーションを適用することで、4つのインスリン分子が結合した二量体インスリン受容体細胞外ドメイン全体の構造が可視化され、生化学的に予測された4つの結合部位が確認され、直接示された。[ 13 ]
関数
遺伝子発現の調節 活性化されたIRS-1は、細胞内でセカンドメッセンジャーとして働き、インスリン調節遺伝子の転写を刺激します。まず、タンパク質Grb2がIRS-1のSH2ドメイン にあるP-Tyr残基に結合します。 次にGrb2はSOSに結合し、SOSは Gタンパク質 であるRas上の結合したGDPをGTPに置き換える反応を触媒します。このタンパク質はリン酸化カスケードを開始し、最終的にマイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ MAPK ）を活性化します。MAPKは核内に入り、様々な核内転写因子（ Elk1 など）をリン酸化します。
インスリンの分解 インスリン分子が受容体に結合して作用を発揮すると、細胞外環境に放出されるか、細胞によって分解される。分解は通常、インスリン受容体複合体のエンドサイトーシスに続いて インスリン分解酵素 の作用を伴う。ほとんどのインスリン分子は肝 細胞によって分解される。典型的なインスリン分子は、最初に循環系に放出されてから約71分後に最終的に分解されると推定されている。[ 19 ]
免疫系 インスリン受容体は代謝機能に加えて、マクロファージ、B細胞、T細胞などの免疫細胞にも発現しています。T細胞では、インスリン受容体の発現は静止状態では検出されませんが、T細胞受容体 （TCR）の活性化によって上方制御されます。実際、インスリンを外因的に投与すると、動物モデルにおいて in vitroでの T細胞増殖を促進することが示されています。インスリン受容体シグナル伝達は、急性感染症や炎症時にT細胞の潜在的な効果を最大化するために重要です。[ 20 ] [ 21 ]
病理学 インスリン受容体活性化の主な作用は、グルコースの取り込みを誘導することです。そのため、「インスリン抵抗性」、すなわちインスリン受容体シグナル伝達の低下は、2型糖尿病 を引き起こします。細胞がグルコースを取り込むことができなくなり、結果として高血糖 （血中グルコース濃度の上昇）が生じ、糖尿病に伴うあらゆる合併症が引き起こされるのです。
インスリン抵抗性 のある患者は、黒色表皮腫 を呈することがある。
INSR 遺伝子のホモ接合変異を持つ患者が数例報告されており、これはドノヒュー症候群 またはレプラコニズムを引き起こします。この常染色体劣性 疾患は、完全に機能しないインスリン受容体をもたらします。これらの患者は、低い位置にある、しばしば突出した耳、広がった鼻孔、厚い唇、および重度の成長遅延を呈します。ほとんどの場合、これらの患者の予後は極めて悪く、生後1年以内に死亡します。同じ遺伝子の他の変異は、より軽症のラブソン・メンデンホール症候群 を引き起こし、患者は特徴的に異常な歯、肥大した歯肉 、および松果体の肥大を呈します。どちらの疾患も 血糖 値の変動を呈します。食後、血糖値は最初は非常に高く、その後急速に異常に低いレベルまで低下します。[ 22 ] [ 23 ]
参考文献 1 2 3 GRCh38: Ensemblリリース89: ENSG00000171105 – Ensembl 、2017年5月 1 2 3 GRCm38: Ensembl リリース 89: ENSMUSG00000005534 – Ensembl 、2017年5月 ↑ 「ヒトPubMed参照:」。米国国立生物工学情報センター、米国国立医学図書館 。 ↑ 「マウス PubMed 参照:」 。 米国国立生物工学情報センター、米国国立医学図書館 。 1 2 3 Ward CW 、 Lawrence MC ( 2009 年 4 月)。 「 インスリン受容体のリガンド誘導活性化：リガンドと受容体の両方の構造変化を伴う多段階プロセス」 。BioEssays。31 ( 4 ) : 422–34。doi : 10.1002 / bies.200800210。PMID 19274663。S2CID 27645596 。 ↑ Ebina Y, Ellis L, Jarnagin K, Edery M, Graf L, Clauser E, Ou JH, Masiarz F, Kan YW, Goldfine ID (1985 年 4 月). "ヒトインスリン受容体 cDNA: ホルモン活性化膜貫通シグナル伝達の構造的基盤". Cell . 40 (4): 747– 58. doi : 10.1016/0092-8674(85)90334-4 . PMID 2859121 . S2CID 23230348 . ↑ Malaguarnera R、Sacco A 、 Voci C、Pandini G、Vigneri R、Belfiore A (2012年5月)。 「プロインスリン はインスリン受容体アイソフォームA に 高い親和性で結合し、主に有糸分裂経路を 活性化する」 。Endocrinology。153 ( 5): 2152–63。doi : 10.1210 / en.2011-1843。PMID 22355074 。 1 2 Belfiore A、Frasca F 、 Pandini G、Sciacca L、Vigneri R (2009 年 10 月)。 「生理学 および 疾患におけるインスリン受容体アイソフォームとインスリン受容体/インスリン様成長因子受容体ハイブリッド」 。Endocrine Reviews。30 ( 6 ) : 586–623。doi : 10.1210 / er.2008-0047。PMID 19752219 。 ↑ Knudsen L、De Meyts P、Kiselyov VV (2011年12月)。 「2 つ のインスリン受容体アイソフォーム間の速度論的差異 の 分子基盤に関する考察」 ( PDF) 。The Biochemical Journal。440 ( 3): 397–403。doi : 10.1042 /BJ20110550。PMID 21838706 。 1 2 Smith BJ, Huang K, Kong G, Chan SJ, Nakagawa S, Menting JG, Hu SQ, Whittaker J, Steiner DF, Katsoyannis PG, Ward CW, Weiss MA, Lawrence MC (April 2010). "Structural resolution of a tandem hormone-binding element in the insulin receptor and its implications for design of peptide agonists". Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America . 107 (15): 6771– 6. Bibcode :2010PNAS..107.6771S. doi :10.1073/pnas.1001813107 . PMC 2872410 . PMID 20348418. ↑ McKern NM, Lawrence MC, Streltsov VA, Lou MZ, Adams TE, Lovrecz GO, Elleman TC, Richards KM, Bentley JD, Pilling PA, Hoyne PA, Cartledge KA, Pham TM, Lewis JL, Sankovich SE, Stoichevska V, Da Silva E, Robinson CP, Frenkel MJ, Sparrow LG, Fernley RT, Epa VC, Ward CW (September 2006). "Structure of the insulin receptor ectodomain reveals a folded-over conformation". Nature . 443 (7108): 218– 21. Bibcode :2006Natur.443..218M. doi :10.1038/nature05106. PMID 16957736. S2CID 4381431. 1 2 Gutmann T, Kim KH, Grzybek M, Walz T, Coskun Ü (May 2018). "Visualization of ligand-induced transmembrane signaling in the full-length human insulin receptor". The Journal of Cell Biology . 217 (5): 1643– 1649. doi :10.1083/jcb.201711047. PMC 5940312 . PMID 29453311. 1 2 Gutmann T, Schäfer IB, Poojari C, Brankatschk B, Vattulainen I, Strauss M, Coskun Ü (January 2020). "Cryo-EM structure of the complete and ligand-saturated insulin receptor ectodomain". The Journal of Cell Biology . 219 (1) e201907210. doi :10.1083/jcb.201907210 . PMC 7039211 . PMID 31727777. 1 2 3 Kiselyov VV、 Versteyhe S、Gauguin L、De Meyts P (2009 年 2 月)。 「インスリンおよび IGF1 受容体のアロステリック結合と活性化の調和振動子モデル」 。Molecular Systems Biology。5 ( 5 ) 243。doi : 10.1038 / msb.2008.78。PMC 2657531。PMID 19225456 。 1 2 de Meyts P、Roth J、Neville DM、Gavin JR、Lesniak MA (1973 年 11 月)。「インスリンと受容体の相互作用：負の協同性に関する実験的証拠」。Biochemical and Biophysical Research Communications。55 ( 1 ): 154–61。Bibcode : 1973BBRC...55..154D。doi : 10.1016 /S0006-291X(73 ) 80072-5。PMID 4361269 。 ↑ Choi E、Bai XC ( 2023 年 6月20日)。 「インスリン受容体の活性化メカニズム：構造的観点」 。Annual Review of Biochemistry。92 ： 247–272。doi ： 10.1146 / annurev - biochem - 052521-033250。ISSN 0066-4154。PMC 10398885。PMID 37001136 。 ↑ Kumar L、Vizgaudis W 、Klein - Seetharaman J (2022年7月)。 「ヒトインスリン受容体におけるリガンド結合の構造に基づく調査」 。Br J Pharmacol。179 ( 14 ) : 3512–3528。doi : 10.1111 / bph.15777。PMID 34907529。S2CID 245242018 。 ↑ Berg JM、Tymoczko JL 、 Gatto GJ、Stryer L (2019)。 生化学 （第9 版）。WH Freeman/Macmillan International。p. 897。ISBN 978-1-319-11465-7 。{{cite book}}: CS1 maint: 複数の名前: 著者リスト (リンク)↑ Duckworth WC、Bennett RG、Hamel FG (1998 年10 月 )。 「インスリン分解：進歩と可能性」 。Endocrine Reviews。19 ( 5 ): 608–24。doi : 10.1210 / edrv.19.5.0349。PMID 9793760 。 ↑ Tsai S、Clemente-Casares X、Zhou AC 、 Lei H、Ahn JJ、Chan YT、et al . (2018 年 8 月)。 「インスリン受容体介在刺激は炎症および感染時の T 細胞免疫を増強する」 。Cell Metabolism。28 ( 6 ): 922–934.e4。doi : 10.1016/ j.cmet.2018.08.003。PMID 30174303 。 ↑ Fischer HJ、Sie C、Schumann E、Witte AK、Dressel R、van den Brandt J、Reichardt HM (2017 年 3 月)。 「 インスリン 受容体は T 細胞機能と適応免疫において重要な役割を果たす」 。Journal of Immunology。198 ( 5): 1910–1920。doi : 10.4049 / jimmunol.1601011。PMID 28115529 。 ↑ Longo N、Wang Y、Smith SA、Langley SD、DiMeglio LA、Giannella-Neto D (2002年6月)。 「 遺伝 性 重症 インスリン 抵抗性における遺伝子型と表現型の相関」 。Human Molecular Genetics。11 ( 12 ): 1465–75。doi : 10.1093/hmg/11.12.1465。PMID 12023989。S2CID 15924838 。 ↑ Melvin A、Stears A (2017)。 「 重度のインスリン抵抗性：病態」 。Practical Diabetes。34 (6): 189–194a。doi : 10.1002/pdi.2116。S2CID 90238599。 2020 年 10 月 31 日 取得 。 ↑ Maddux BA、Goldfine ID (2000年1月)。 「膜糖タンパク質PC- 1 による インスリン受容体機能の阻害は、 受容体αサブユニットとの直接的な相互作用を介して起こる」 。Diabetes。49 ( 1 ) : 13–9。doi : 10.2337 /diabetes.49.1.13。PMID 10615944 。 ↑ Langlais P、Dong LQ 、Hu D、Liu F ( 2000年6 月 )。「Srcチロシンキナーゼファミリーのメンバーの直接基質としてのGrb10の同定」 。Oncogene。19 ( 25 ) : 2895–903。doi : 10.1038 / sj.onc.1203616。PMID 10871840。S2CID 25923169 。 ↑ Hansen H、Svensson U、Zhu J、Laviola L、Giorgino F、Wolf G、Smith RJ、Riedel H (1996 年 4 月)。 「 Grb10 SH2 ドメインとインスリン受容体カルボキシル末端との相互作用」 。The Journal of Biological Chemistry。271 (15): 8882–6。doi : 10.1074 / jbc.271.15.8882。PMID 8621530 。 ↑ Liu F、Roth RA (1995 年 10 月)。 「Grb-IR: インスリン受容体に結合してその機能を阻害する SH2 ドメイン含有タンパク質」 。 米国 科学 アカデミー 紀要 。92 ( 22 ): 10287–91。Bibcode : 1995PNAS ... 9210287L。doi : 10.1073 / pnas.92.22.10287。PMC 40781。PMID 7479769 。 ↑ He W、Rose DW、Olefsky JM、Gustafson TA (1998 年 3 月)。 「Grb10 は、Grb10 Src ホモロジー 2 (SH2) ドメインと、プレクストリン ホモロジー ドメインと SH2 ドメインの間に位置する第 2 の新規ドメイン を介して 、 インスリン受容体、インスリン様成長因子 I 受容体、および上皮成長因子受容体と異なる相互作用をする」 。The Journal of Biological Chemistry。273 ( 12): 6860–7。doi : 10.1074 /jbc.273.12.6860。PMID 9506989 。 ↑ Frantz JD、Giorgetti-Peraldi S、Ottinger EA、Shoelson SE (1997 年 1 月)。 「ヒト GRB-IRbeta/GRB10。PH ドメインと SH2 ドメインを持つインスリンおよび成長因子受容体結合タンパク質のスプライスバリアント」 。The Journal of Biological Chemistry。272 ( 5): 2659–67。doi : 10.1074 / jbc.272.5.2659。PMID 9006901 。 ↑ Kasus-Jacobi A、Béréziat V、Perdereau D、Girard J、Burnol AF (2000 年 4 月)。「インスリン受容体と Grb7 の相互作用の証拠。その結合ドメインの 2 つ、PIR と SH2 の 役割 」 。Oncogene。19 ( 16 ) : 2052–9。doi : 10.1038 / sj.onc.1203469。PMID 10803466。S2CID 10955124 。 ↑ Aguirre V、Werner ED、Giraud J、Lee YH、Shoelson SE、White MF (2002 年 1 月)。 「インスリン受容体基質-1 の Ser307 のリン酸化はインスリン受容体との相互作用 を 阻害し、インスリン作用を 抑制する」 。The Journal of Biological Chemistry。277 ( 2): 1531–7。doi : 10.1074 / jbc.M101521200。PMID 11606564 。 ↑ Sawka-Verhelle D、Tartare-Deckert S、White MF、Van Obberghen E (1996 年 3 月)。 「インスリン受容体基質-2 は 、そのホスホチロシン結合ドメインと、新たに同定されたアミノ酸 591-786 からなるドメインを 介し て インスリン受容体に結合する」 。The Journal of Biological Chemistry。271 ( 11): 5980–3。doi : 10.1074 /jbc.271.11.5980。PMID 8626379 。 ↑ O'Neill TJ、Zhu Y、Gustafson TA (1997 年 4 月)。 「MAD2 はインスリン受容体のカルボキシル末端と相互作用するが、IGFIR とは相互作用しない。活性化後のインスリン受容体からの放出の証拠」 。The Journal of Biological Chemistry。272 ( 15 ): 10035–40。doi : 10.1074 / jbc.272.15.10035。PMID 9092546 。 ↑ Braiman L、Alt A、Kuroki T、Ohba M、Bak A、Tennenbaum T、Sampson SR (2001 年 4 月)。 「インスリンは 、初代培養骨格筋においてインスリン受容体とプロテインキナーゼ C デルタとの特異 的 な相互作用 を 誘導する」 。Molecular Endocrinology。15 (4): 565–74。doi : 10.1210 / mend.15.4.0612。PMID 11266508 。 ↑ Rosenzweig T、Braiman L、Bak A、Alt A、Kuroki T、Sampson SR (2002年6月)。 「 腫瘍壊死因子αのタンパク質キナーゼCアイソフォームαおよびδに対する異なる効果は、インスリン受容 体 シグナル伝達の阻害を媒介する」 。Diabetes。51 ( 6 ): 1921–30。doi : 10.2337 / diabetes.51.6.1921。PMID 12031982 。 ↑ Maegawa H, Ugi S, Adachi M, Hinoda Y, Kikkawa R, Yachi A, Shigeta Y, Kashiwagi A (1994年3月). "インスリン受容体キナーゼはSrc相同性2領域を含むタンパク質チロシンホスファターゼをリン酸化し、試験管内でそのPTPase活性を調節する". Biochemical and Biophysical Research Communications . 199 (2): 780–5 . Bibcode : 1994BBRC..199..780M . doi : 10.1006/bbrc.1994.1297 . PMID 8135823 . ↑ Kharitonenkov A、Schnekenburger J、Chen Z、Knyazev P、Ali S、Zwick E、White M、Ullrich A (1995 年 12 月)。 「 インスリン受容体/インスリン受容体基質-1相互作用におけるタンパク質チロシンホスファターゼ 1D の アダプター機能」 。The Journal of Biological Chemistry。270 ( 49): 29189–93。doi : 10.1074 / jbc.270.49.29189。PMID 7493946 。 ↑ Kotani K, Wilden P, Pillay TS (1998 年 10 月). "SH2-Balpha はインスリン受容体アダプタータンパク質であり、インスリン受容体キナーゼの活性化ループと相互作用する基質である" . The Biochemical Journal . 335 (1): 103– 9. doi : 10.1042/bj3350103 . PMC 1219757 . PMID 9742218 . ↑ Nelms K、O'Neill TJ、Li S、Hubbard SR、Gustafson TA、Paul WE (1999 年 12 月)。 「 SH2 - B の 代替スプライシング、遺伝子局在、およびインスリン受容体キナーゼドメインへの結合」 。Mammalian Genome。10 ( 12 ) : 1160–7。doi : 10.1007 / s003359901183。PMID 10594240。S2CID 21060861 。
さらに読む Pearson RB、Kemp BE (1991)「[ 3 ] プロテインキナーゼリン酸化部位配列とコンセンサス特異性モチーフ：表」プロテインキナーゼ リン酸化部位配列とコンセンサス特異性モチーフ：表 。Methods in Enzymology、第200巻、 62～ 81 ページ。doi : 10.1016 /0076-6879(91)00127- I。ISBN 9780121821012 PMID 1956339 . Joost HG (1995年2月)「インスリン受容体の構造的および機能的異質性」Cellular Signalling . 7 (2): 85–91 . doi : 10.1016/0898-6568(94)00071-I . PMID 7794689 . O'Dell SD、Day IN（1998年 7月）。「インスリン様成長因子II（IGF-II）」。The International Journal of Biochemistry & Cell Biology。30 （7）：767–71。doi ： 10.1016 / S1357-2725(98)00048 - X。PMID 9722981 。 Lopaczynski W (1999). "インスリンとインスリン様成長因子Iのシグナル伝達経路の異なる調節" . Acta Biochimica Polonica . 46 (1): 51–60 . doi : 10.18388/abp.1999_4183 . PMID 10453981 . 佐々岡拓也、小林満 (2000 年 8 月) 「インスリン受容体の基質としてのインスリンシグナル伝達におけるShcの機能的重要性」。内分泌ジャーナル 。47 (4): 373–81 .土井 : 10.1507/endocrj.47.373 。PMID 11075717。 Perz M、Torlińska T (2001)「インスリン受容体―構造的および機能的特徴」Medical Science Monitor . 7 (1): 169–77 . PMID 11208515 . Benaim G、Villalobo A（2002年8月）。「カルモジュリンのリン酸化。機能的意義」。European Journal of Biochemistry。269 （ 15 ）：3619–31。doi ：10.1046 / j.1432-1033.2002.03038.x。hdl ： 10261 / 79981。PMID 12153558 。 
