クームステスト

直接クームス試験と間接クームス試験は抗グロブリン試験（AGT）としても知られ、免疫血液学で使用される血液検査です。直接クームス試験は、赤血球の表面に付着した抗体を検出します。^[1]これらの抗体は赤血球を破壊することがあるため、貧血を引き起こす可能性があります。この検査は、状態を明らかにするのに役立ちます。間接クームス試験は、血液中に自由に浮遊している抗体を検出します。^{[1]これらの抗体は特定の赤血球に対して作用する可能性があります。この検査は、}輸血に対する反応を診断するために行うことができます。^[1]

直接クームス試験は、免疫系が赤血球を破壊して貧血を引き起こす自己免疫性溶血性貧血の検査に使用されます。直接クームス試験は、赤血球の表面に付着した抗体または補体タンパク質を検出するために使用されます。この検査を行うには、血液サンプルを採取し、赤血球を洗浄し (患者の血漿と赤血球から未結合の抗体を除去)、抗ヒトグロブリン (「クームス試薬」) とともに培養します。その後赤血球が凝集すると、検査は陽性となり、抗体または補体タンパク質が赤血球の表面に結合し、それらの細胞の破壊を引き起こしている可能性があることが視覚的に示されます。

間接クームス試験は、妊婦の出生前検査や輸血前の検査に用いられる。この検査では、外来赤血球に対する抗体を検出する。この場合、患者から採取した血液サンプルから血清を抽出し、その血清を抗原性がわかっている外来赤血球とインキュベートする。最後に抗ヒトグロブリンを加える。凝集反応が起これば、間接クームス試験は陽性となる。^[2]

2つのクームス試験は、抗ヒト抗体がヒト抗体（一般的にIgGまたはIgM）に結合することに基づいています。これらの抗ヒト抗体は、ヒト血漿で免疫化された非ヒト動物の形質細胞によって生成されます。さらに、これらの抗ヒト抗体は、赤血球（RBC）表面の抗原に固定される可能性のあるヒト抗体にも結合します。適切な試験管条件では、これにより赤血球が凝集し、結果として生じる赤血球の塊を視覚化できます。凝集が見られればクームス試験は陽性であり、見られなければクームス試験は陰性です。^[3]

クームス試験の一般的な臨床用途としては、交差適合試験における輸血用血液の準備、出産前ケアの一環として妊婦の血漿中の非定型抗体の検出、免疫介在性溶血性貧血の診断のための抗体の検出などがある。^[4]

クームス試験は、静脈穿刺によって患者から採取された静​​脈全血サンプルから赤血球または血清（それぞれ直接または間接）を使用して実施されます。静脈血は研究所（または血液銀行）に運ばれ、そこで訓練を受けた科学技術スタッフがクームス試験を実施します。結果の臨床的意義は、クームス​​試験を依頼した医師によって、おそらく研究所の血液学者の支援を受けて評価されます。^[要出典]

直接クームス試験は直接抗グロブリン試験（DAT）とも呼ばれ、抗体または補体系因子が赤血球表面抗原に結合しているかどうかを検出するために使用されます。 ^[5] DATは輸血前検査に必須ではありませんが^[6]、一部の検査室では実施される場合があります。^{[説明が必要]}輸血前には、間接クームス試験がよく行われます。

直接クームス試験は、免疫介在性溶血性貧血（抗体による赤血球の破壊）が疑われる場合に臨床的に使用されます。クームス試験が陽性であれば、免疫機構が患者の赤血球を攻撃していることを示します。この機構は、自己免疫、同種免疫、または薬剤誘発性の免疫介在機構である可能性があります。^[3]

• 新生児溶血性疾患（HDNまたは胎児赤芽球症とも呼ばれる）
  • 新生児のRh D溶血性疾患（Rh病とも呼ばれる）
  • 新生児ABO溶血性疾患（直接クームス試験では弱陽性となる場合がある）
  • 新生児抗ケル溶血性疾患
  • 新生児Rhc溶血性疾患
  • 新生児RhE溶血性疾患
  • その他の血液型不適合（RhC、Rhe、Kidd、Duffy、Lewis、MN、P など）
• 同種免疫溶血性輸血反応

• 温式抗体自己免疫性溶血性貧血
  • 特発性
  • 全身性エリテマトーデス
  • エヴァンス症候群（抗血小板抗体および溶血抗体）
• 冷抗体免疫溶血性貧血
  • 特発性寒冷血球凝集素症候群
  • ヴァルデンシュトレームマクログロブリン血症
  • 伝染性単核球症
  • 発作性寒冷血色素尿症（まれ）

• メチルドパ（IgG媒介II型過敏症）
• ペニシリン（高用量）
• キニジン（IgM を介した古典的補体経路および膜攻撃複合体 (MAC) の活性化）

( DAT は赤血球を検査し、新生児の溶血性疾患の検査に使用されることを覚えておくための記憶装置は、R h Diseaseです 。R = 赤血球、D = DAT です。)

患者の赤血球を洗浄し（患者自身の血清を除去）、抗ヒトグロブリン（クームス試薬とも呼ばれる）で遠心分離する。免疫グロブリンまたは補体因子が体外で赤血球表面に固定されている場合、抗ヒトグロブリンは赤血球を凝集させ、直接クームス試験は陽性となる。（直接クームス試験が陽性の場合の視覚的表現を図式の上半分に示す。）^[要出典]

間接クームス試験は間接抗グロブリン試験 (IAT) とも呼ばれ、インビトロの抗体抗原反応を検出するために使用されます。輸血前に患者の血漿/血清中に存在する非常に低濃度の抗体を検出するために使用されます。出産前ケアでは、IAT は妊婦の新生児溶血性疾患を引き起こす可能性のある抗体をスクリーニングするために使用されます。IAT は適合性試験、抗体同定、赤血球表現型検査、滴定研究にも使用できます。 ^{[引用が必要]}

間接クームス試験は、輸血用の血液を準備する際に抗体を検査するために使用されます。ドナーとレシピエントの血液は、ABOと Rh D が適合している必要があります。輸血用のドナー血液は、別のプロセスで感染症の検査も行われます。^{[引用が必要]}

• 抗体スクリーニング

受血者からの血液サンプルとドナー血液の各単位からの血液サンプルは、間接クームス試験で抗体のスクリーニングが行われます。各サンプルは、さまざまな表面抗原（つまり、血液型）を示すさまざまな赤血球に対して培養されます。

• クロスマッチング

間接クームス試験は、受血者の血清サンプルに、献血者の赤血球サンプルに対する抗体が含まれているかどうかを検査するために使用されます。これは交差適合試験血液と呼ばれることもあります。

間接クームス試験は、胎盤を通過して胎児の血液に入り、新生児の溶血性疾患を引き起こす可能性のあるIgG 抗体を妊婦から検査するために使用されます。^[要出典]

IAT は 2 段階のテストです。(図の下半分には、間接クームス テストの例として交差試験が視覚的に示されています)。^{[引用が必要]}

患者以外の、既知の抗原を含む洗浄された赤血球（RBC）を、未知の抗体含有量を含む患者の血清とともに培養する。血清に赤血球表面の抗原に対する抗体が含まれている場合、抗体は赤血球の表面に結合します。^{[引用が必要]}

赤血球は等張食塩水で 3 回または 4 回洗浄され、その後抗ヒトグロブリンとともに培養されます。第 1 段階で抗体が赤血球表面抗原に結合している場合、この段階で抗ヒトグロブリン (別名クームス試薬) とともに培養すると赤血球が凝集し、間接クームス試験は陽性になります。

抗体を含む血清を希釈することで、血清中の抗体の量を測定することができます。これは、血清の連続希釈を行い、関連する赤血球の凝集を生成できる試験血清の最大希釈率を見つけることによって行われます。^{[引用が必要]}

クームス試薬（クームス抗グロブリンまたは抗ヒトグロブリンとも呼ばれる）は、直接クームス試験と間接クームス試験の両方で使用されます。クームス試薬は抗ヒトグロブリンです。ヒトグロブリンを動物に注射して作られ、ヒト免疫グロブリンとヒト補体系因子に特異的なポリクローナル抗体が生成されます。より特異的なクームス試薬またはモノクローナル抗体を使用することもできます。^{[引用が必要]}

IgM 抗体とIgG 抗体は両方とも、それぞれの相補抗原と強力に結合します。IgG抗体は37°C で最も反応性が高くなります。IgM 抗体はサイズが大きいため赤血球間を橋渡しして凝集と見られるものを効率的に作り出すことができるため、IgM 抗体は室温の生理食塩水中で容易に検出されます。IgG 抗体はより小さく、視覚的な凝集反応を形成するのに十分な橋渡しをするためには補助が必要です。IgG 検出を強化するために使用される試薬は増強剤と呼ばれます。赤血球はゼータ電位と呼ばれる正味の負電荷を持ち、これが赤血球同士の自然な反発を引き起こします。増強剤は赤血球膜のゼータ電位を低下させます。一般的な増強剤には、低イオン強度溶液 (LISS)、アルブミン、ポリエチレングリコール(PEG)、およびタンパク質分解酵素があります。

クームス試験は、1945年にケンブリッジの 免疫学者 ロビン・クームス（この名前の由来）、アーサー・モーラント、ロブ・レースによって初めて説明されました。^{[8]歴史的には、}試験管 で行われていました。今日では、自動化された固相またはゲル技術を使用して行われるのが一般的です。

• クームステスト - Medlineplus.org。
• 溶血性貧血を引き起こす薬剤 - Merck Manual。
• 米国国立医学図書館医学件名標目表(MeSH)の Coombs'+ テスト