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| セルラーゼ | |||||||||
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 Thermomonospora fuscaによって生産されるセルラーゼ酵素。触媒ドメインの浅い溝にセロトリオースが結合している。 | |||||||||
| 識別子 | |||||||||
| EC番号 | 3.2.1.4 | ||||||||
| CAS番号 | 9012-54-8 | ||||||||
| データベース | |||||||||
| インテンズ | IntEnzビュー | ||||||||
| ブレンダ | BRENDAエントリー | ||||||||
| エクスパス | NiceZyme ビュー | ||||||||
| ケッグ | KEGGエントリー | ||||||||
| メタサイク | 代謝経路 | ||||||||
| プリアモス | プロフィール | ||||||||
| PDB構造 | RCSB PDB PDBe PDBsum | ||||||||
| 遺伝子オントロジー | アミゴー / クイックゴー | ||||||||
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セルラーゼ（EC 3.2.1.4、系統名4-β -D-グルカン4-グルカノヒドロラーゼ）は、主に菌類、細菌、原生動物によって生成される、セルロースおよびいくつかの関連多糖類の分解であるセルロース分解を触媒するいくつかの酵素のいずれかです。
- セルロース、リケニン、穀物β- D-グルカン中の(1→4)-β- D-グルコシド結合のエンド加水分解
この名前は、セルロース物質を分解するために連続的または相乗的に作用する、さまざまな酵素の自然発生的な混合物または複合体にも使用されます。
セルラーゼはセルロース分子をβ-グルコースなどの単糖類（「単純糖」）またはより短い多糖類やオリゴ糖に分解する。セルロース分解は、植物の主要成分を消費および化学反応に利用できるようにするため、経済的に非常に重要である。関与する特定の反応は、セルロース、ヘミセルロース、リケニン、および穀物β -D-グルカンの1,4-β - D-グリコシド結合の加水分解である。セルロース分子は互いに強く結合するため、デンプンなどの他の多糖類の分解と比較して、セルロース分解は比較的困難である。[2]
ほとんどの哺乳類は、セルロースなどの食物繊維を自分で消化する能力が非常に限られています。牛や羊などの反芻動物や馬などの後腸発酵動物など、多くの草食動物では、共生細菌によってセルラーゼが生成されます。内因性セルラーゼは、一部のシロアリ、カタツムリ、[3] [4] [5]、ミミズなど、いくつかの種類の動物によって生成されます。
セルラーゼは緑藻類（クラミドモナス、ゴニウム・ペクトラル、ボルボックス・カルテリ）にも見つかっており、 GH9ファミリーに属するその触媒ドメイン（CD）は、後生動物の内因性セルラーゼと最も高い配列相同性を示しています。藻類セルラーゼはモジュール型で、推定新規システインリッチ炭水化物結合モジュール（CBM）、プロリン/セリン（PS）リッチリンカー、さらに一部のメンバーの推定Ig様ドメインと未知のドメインで構成されています。ゴニウム・ペクトラル由来のセルラーゼは、リンカーで分離された2つのCDとC末端CBMで構成されていました。[6]
セルラーゼには、構造的および機構的に異なる数種類の異なる酵素が知られています。「セルラーゼ」という名称に関連付けられている同義語、誘導体、および特定の酵素には、エンド-1,4-β- D -グルカナーゼ(β-1,4-グルカナーゼ、β-1,4-エンドグルカンヒドロラーゼ、エンドグルカナーゼ D、1,4-(1,3;1,4)-β- D -グルカン 4-グルカノヒドロラーゼ)、カルボキシメチルセルラーゼ (CMCase)、アビセラーゼ、セルデキストリナーゼ、セルラーゼ A、セルロシン AP、アルカリセルラーゼ、セルラーゼ A 3、9.5セルラーゼ、セルキシラナーゼ、およびパンセラーゼ SSがあります。リグニンを切断する酵素はセルラーゼと呼ばれることもありますが、この古い用法は非推奨です。これらはリグニン修飾酵素です。
種類とアクション
触媒される反応の種類に基づいて、セルラーゼには 5 つの一般的な種類があります。
- エンドセルラーゼ(EC 3.2.1.4) は、非晶質部位で内部結合をランダムに切断し、新しい鎖末端を生成します。
- エキソセルラーゼまたはセロビオヒドロラーゼ（EC 3.2.1.91）は、エンドセルラーゼによって生成された露出鎖の末端から2〜4単位を切断し、四糖類[7]またはセロビオースなどの二糖類を生成します。エキソセルラーゼはさらに、セルロース鎖の還元末端から連続的に作用するタイプIと、非還元末端から連続的に作用するタイプIIに分類されます。
- セロビアーゼ（EC 3.2.1.21）またはβ-グルコシダーゼは、エキソセルラーゼ産物を個々の単糖類に加水分解します。
- 酸化セルラーゼは、例えばセロビオースデヒドロゲナーゼ（アクセプター）などのラジカル反応によってセルロースを脱重合します。
- セルロースホスホリラーゼは水の代わりにリン酸を使用してセルロースを脱重合します。
上記のタイプには、プログレッシブ (プログレッシブとも呼ばれる) タイプと非プログレッシブ タイプもあります。プログレッシブ セルラーゼは単一の多糖鎖と相互作用し続け、非プログレッシブ セルラーゼは一度相互作用した後、離れて別の多糖鎖と相互作用します。
セルラーゼの作用は相乗的であると考えられています。3 種類のセルラーゼを併用すると、3 種類を別々に併用した場合よりもはるかに多くの糖を生成できるからです。反芻動物を除き、ほとんどの動物 (人間を含む) は体内でセルラーゼを生成せず、発酵によってセルロースを部分的にしか分解できないため、繊維質の植物材料に含まれるエネルギーを利用する能力が制限されます。
構造
ほとんどの真菌セルラーゼは、1 つの触媒ドメインと 1 つのセルロース結合ドメインからなる 2 つのドメイン構造を持ち、これらは柔軟なリンカーによって接続されています。この構造は不溶性基質に作用するように適応されており、酵素が毛虫のように表面上で 2 次元的に拡散することを可能にします。ただし、セルロース結合ドメインを持たないセルラーゼ (主にエンドグルカナーゼ) もあります。
基質の結合と触媒作用は両方とも、タンパク質の折り畳みレベルの結果として生じる酵素の3次元構造に依存します。活性部位内のアミノ酸配列と残基の配置、基質が結合する位置は、リガンドの結合親和性、活性部位内での基質の安定化、触媒作用などの要因に影響を及ぼす可能性があります。基質構造は、酵素の正確な活性部位構造を補完します。残基の位置が変化すると、これらの相互作用の1つ以上に歪みが生じる可能性があります。[8]温度、pH、金属イオンなどの追加の要因は、酵素構造間の非共有結合相互作用に影響します。[9] Thermotoga maritima種は、活性部位である中央の触媒領域を囲む2つのβシート（タンパク質構造）で構成されるセルラーゼを作ります。[10]この酵素はエンドグルカナーゼに分類され、セルロース鎖のβ-1,4-グリコシド結合を内部で切断し、ポリマーのさらなる分解を促進します。T . maritimaと同じ科の異なる種は、異なる構造のセルラーゼを作ります。[10] Coprinopsis cinerea種によって生成されるセルラーゼは、β/α バレルと呼ばれる閉鎖されたトンネルの形をした 7 つのタンパク質鎖で構成されています。[11]これらの酵素は、基質カルボキシメチルセルロースを加水分解します。活性部位での基質の結合は、分子の分解を可能にする構造の変化を引き起こします。
セルラーゼ複合体
多くの細菌では、生体内のセルラーゼは、超分子複合体であるセルロソームに組織化された複雑な酵素構造です。セルロソームには、エンドセルラーゼ、エキソセルラーゼ、セロビアーゼ、酸化セルラーゼ、セルロースホスホリラーゼという5つの異なる酵素サブユニットが含まれますが、これらに限定されるわけではありません。エキソセルラーゼとセロビアーゼのみがβ(1→4)結合の実際の加水分解に関与します。セルロソームを構成するサブユニットの数によって、酵素活性の速度も決まります。[12]
マルチドメインセルラーゼは多くの分類群に広く分布していますが、セルロソームに見られる嫌気性細菌由来のセルラーゼは、異なるタイプのモジュールで構成される最も複雑な構造を持っています。たとえば、クロストリジウム・セルロリティカムは、触媒ドメイン（CD）、炭水化物結合モジュール（CBM）、ドッケリン、リンカー、Ig様ドメインの数と配置が異なる13種類のGH9モジュラーセルラーゼを生成します。[13]
例えば、トリコデルマ・リーゼイ由来のセルラーゼ複合体は、結晶性セルロースの鎖を分離するC1（57,000ダルトン）、エンドグルカナーゼ（約52,000ダルトン）、エキソグルカナーゼ（約61,000ダルトン）、およびβ-グルコシダーゼ（76,000ダルトン）という成分で構成されています。[14]
セルロソームを生成する細菌のゲノムには、ドッケリンやコヒーシンとして知られる多数の「シグネチャー」配列が同定されている。アミノ酸配列と三次構造に応じて、セルラーゼは氏族とファミリーに分類される。[15]
マルチモジュールセルラーゼは、酵素とセルロース基質が近接しているため相乗効果があり、遊離酵素（CDのみ）よりも効率的です。CBMはセルロースの結合に関与し、グリコシル化リンカーはCDに柔軟性を与えて活性を高め、プロテアーゼを保護し、セルロース表面への結合を強化します。[6]
セルロース分解のメカニズム
用途
セルラーゼはコーヒーの商業食品加工に使用されています。豆の乾燥中にセルロースの加水分解を行います。さらに、セルラーゼは繊維産業や洗濯用洗剤で広く使用されています。また、パルプおよび製紙産業でもさまざまな目的で使用されており、医薬品用途にも使用されています。セルラーゼはバイオマスをバイオ燃料に発酵させるのに使用されていますが、このプロセスは現時点では比較的実験段階です。
紙・パルプ
セルラーゼは製紙・パルプ産業において多種多様な用途に使用されています。生産・リサイクル工程において、セルラーゼは樹皮剥ぎ、パルプ化、漂白、排水、脱墨の改善に応用されています。[17]
セルラーゼの使用は紙の品質を向上させることもできます。セルラーゼは繊維の形態に影響を与え、繊維間の結合を改善し、繊維の凝集力を高めます。[18]紙への追加効果としては、引張強度の向上、嵩高、多孔性、組織の柔らかさの向上などが挙げられます。
製薬
セルラーゼは、ヒトの胃の中に存在するセルロース胃石の一種である植物胃石の治療薬として医療に使用されており、細胞外高分子物質（EPS）の構造マトリックス多糖類内のβ（1-4）グリコシド結合を加水分解することで、多菌性細菌バイオフィルムを分解する効能を示している。[19] [20]
繊維
繊維産業におけるセルラーゼのさまざまな用途には、ジーンズのバイオストーン処理、繊維の研磨、衣類の柔軟化、余分な染料の除去、色の明るさの回復などがあります。
農業
セルラーゼは、農業分野では植物病原体や病気の防除に利用されています。また、種子の発芽を促進し、根系を改善するためにも利用されており、土壌の質を向上させ、ミネラル肥料への依存を減らす可能性があります。[18]
測定
天然基質であるセルロースは水に不溶性のポリマーであるため、この基質を使用する従来の還元糖アッセイはセルラーゼ活性の測定には使用できません。分析科学者はいくつかの代替方法を開発しました。
- DNSA法セルラーゼ活性は、0.5mlの上清を0.05Mクエン酸緩衝液（pH4.8）中の1％カルボキシメチルセルロース（CMC）0.5mlとともに50℃で30分間インキュベートすることによって決定した。反応は3mlのジニトロサリチル酸試薬の添加によって停止した。吸光度は540nmで読み取った。[21]
粘度計は、カルボキシメチルセルロースなどの水溶性セルロース誘導体を含む溶液をセルラーゼサンプルとインキュベートした際の粘度の低下を測定するために使用できます。[22]粘度の低下はセルラーゼ活性に正比例します。このようなアッセイは、エンドセルラーゼに対して非常に感度が高く、特異的ですが(エキソ作用セルラーゼ酵素は粘度の変化をほとんどまたはまったく示しません)、従来の酵素単位 (1 分間に加水分解される基質または生成される生成物のマイクロモル) で活性を定義するのが難しいという制限があります。
セロオリゴ糖基質
DPの低いセロオリゴ糖（DP2-6）は、水に十分溶けるため、セルラーゼ酵素の基質として機能します。[23]しかし、これらの基質自体が「還元糖」であるため、高い「ブランク」値を生成するため、従来の還元糖アッセイには適していません。ただし、セルラーゼを介した加水分解は、 HPLCまたはIC法で監視でき、特定のセルラーゼ酵素の基質要件に関する貴重な情報を得ることができます。
還元型セロオリゴ糖基質
セルロオリゴ糖は、水素化ホウ素ナトリウムの作用によって化学的に還元され、対応する糖アルコールを生成する。これらの化合物は還元糖分析では反応しないが、加水分解生成物は反応する。このため、水素化ホウ素還元セルロオリゴ糖は、ネルソン・シモジ法などの従来の還元糖分析法を用いたセルラーゼ分析の貴重な基質となる。[24] [25]
染色多糖類基質
[26]
これらの基質は2つのクラスに分類できます。
- 不溶性発色基質: AZCL-HE-セルロースなどの不溶性セルラーゼ基質は、溶液に入れると水を吸収してゼラチン状の粒子を生成します。この基質はセルラーゼの作用によって徐々に脱重合され、可溶化されます。反応は、酵素の活性を止めるためにアルカリ溶液を加えることで終了し、反応スラリーは濾過または遠心分離されます。濾液または上清の色を測定し、酵素活性と関連付けることができます。
- 可溶性発色基質: セルラーゼサンプルをアゾ-CM-セルロースなどの水溶性基質とインキュベートし、反応を停止して、高分子量の部分的に加水分解された断片をエタノールやメトキシエタノールなどの有機溶媒で溶液から沈殿させます。懸濁液をよく混合し、遠心分離し、上澄み溶液の色 (小さな可溶性の染色された断片による) を測定します。標準曲線を使用して、酵素活性を判定できます。
酵素結合試薬
エンドセルラーゼの特異的測定を可能にする新しい試薬が開発されている。[27] [28]これらの方法では、補助酵素の存在下で官能基化されたオリゴ糖基質を使用する。示されている例では、セルラーゼ酵素はセルロースの三糖フラグメントを認識し、このユニットを切断することができる。試薬混合物（β-グルコシダーゼ）に存在する補助酵素は、次に発色団または蛍光団を含むフラグメントを加水分解するように作用する。アッセイは、酵素反応を停止し、遊離したフェノール化合物を脱プロトン化してフェノラート種を生成する塩基性溶液の添加によって終了する。与えられたサンプルのセルラーゼ活性は、分光光度計を使用して測定できる遊離したフェノラートの量に正比例する。三糖基質の非還元末端のアセタール官能化は、補助β-グルコシダーゼの親基質への作用を防ぐ。
参照
- セルロース1,4-β-セロビオシダーゼ、効率的なセルラーゼ
- セルラーゼ単位、セルラーゼ活性を定量化する単位
参考文献
- ^ PDB : 1NLR ; Sulzenbacher G, Shareck F, Morosoli R, Dupont C, Davies GJ (1997年12月). 「ストレプトマイセス・リビダンスファミリー12エンドグルカナーゼ: 触媒コアの構築、発現、および1.75Å解像度でのX線構造」.生化学. 36 (51): 16032–9. doi :10.1021/bi972407v. PMID 9440876.; PyMOLでレンダリング
- ^ Barkalow DG、Whistler RL。「セルロース」。AccessScience、McGraw-Hill。[永久リンク切れ]
- ^ Bignell DE、Roisin Y、Lo N (2011)。シロアリの生物学：現代の総合。ドルドレヒト：Springer。ISBN 978-9048139767。
- ^ Watanabe H, Noda H, Tokuda G, Lo N (1998年7月). 「シロアリ由来のセルラーゼ遺伝子」. Nature . 394 (6691): 330–1. Bibcode :1998Natur.394..330W. doi :10.1038/28527. PMID 9690469. S2CID 4384555.
- ^渡辺 浩、徳田 剛(2001年8 月)。「動物セルラーゼ」。細胞および分子生命科学。58 ( 9 ): 1167–78。doi : 10.1007 / PL00000931。PMC 11337393。PMID 11577976。S2CID 570164。
- ^ ab ゲリエロ、ギア;ケル軍曹。レジ、シルヴァン。オスマン、ジャン＝フランソワ。アンリ＝ミシェル・コーシー。アフマド、イルシャド。シディキ、カワール（2018-06-15）。 「緑色微細藻類セルラーゼの比較インシリコ分析からの新たな洞察」。国際分子科学ジャーナル。19 (6): 1782.土井: 10.3390/ijms19061782。ISSN 1422-0067。PMC 6032398。PMID 29914107。
- ^ Zverlov VV、 Schantz N、Schwarz WH（2005年8月）。「Clostridium thermocellumのセルロソームの主な新成分は、セルテトラオースを生成するプロセッシブエンド-β-1,4-グルカナーゼである」。FEMS Microbiology Letters。249 （ 2 ）：353–8。doi ：10.1016/j.femsle.2005.06.037。PMID 16006068。
- ^ Payne CM、Bomble YJ、Taylor CB、McCabe C、Himmel ME、Crowley MF、Beckham GT (2011 年 11 月)。「分子シミュレーションによるプロセッシブセルラーゼの芳香族炭水化物相互作用の複数の機能の検討」。The Journal of Biological Chemistry。286 ( 47 ): 41028–35。doi : 10.1074/ jbc.M111.297713。PMC 3220501。PMID 21965672 。
- ^ Lee YJ、Kim BK、Lee BH、Jo KI、Lee NK、Chung CH、他 (2008 年 1 月)。「米殻を利用した Bacillus amyoliquefaciens DL-3 によるセルラーゼの精製と特性評価」。バイオリソーステクノロジー。99 ( 2): 378–86。Bibcode :2008BiTec..99..378L。doi :10.1016/j.biortech.2006.12.013。PMID 17320379 。
- ^ ab Cheng YS, Ko TP, Wu TH, Ma Y, Huang CH, Lai HL, et al. (2011年4月). 「Thermotoga maritima由来セルラーゼ12Aの結晶構造と基質結合モード」.タンパク質. 79 (4): 1193–204. doi :10.1002/prot.22953. PMID 21268113. S2CID 23572933.
- ^ Liu Y, Yoshida M, Kurakata Y, Miyagi T, Igarashi K, Samejima M, et al. (2010 年 3 月). 「Coprinopsis cinerea が恒常的に生成するセルラーゼであるグリコシド加水分解酵素ファミリー 6 酵素 CcCel6C の結晶構造」. The FEBS Journal . 277 (6): 1532–42. doi : 10.1111/j.1742-4658.2010.07582.x . PMID 20148970. S2CID 6338050.
- ^ Tsai SL 、 DaSilva NA、Chen W (2013年1月)。「適応的アセンブリによる酵母表面での複雑なセルロソームの機能的表示」ACS Synthetic Biology。2 ( 1 ):14–21。CiteSeerX 10.1.1.701.5515。doi :10.1021/sb300047u。PMID 23656322 。
- ^ Ravachol J、Borne R、Tardif C、de Philip P、Fierobe HP (2014 年 3 月)。「セルロソーム産生細菌 Clostridium cellulolyticum によって合成されるすべてのファミリー 9 グリコシド加水分解酵素の特性」。The Journal of Biological Chemistry。289 ( 11 ): 7335–48。doi : 10.1074/ jbc.M113.545046。PMC 3953250。PMID 24451379。
- ^ ワージントン・バイオケミカル・コーポレーション (2014)、セルラーゼ。2014-07-03 にアクセス
- ^ Bayer EA、Chanzy H、Lamed R、Shoham Y (1998年10月)。「セルロース、セルラーゼ、セルロソーム」。Current Opinion in Structural Biology 8 ( 5): 548–57。doi : 10.1016 /S0959-440X(98)80143-7。PMID 9818257。
- ^ Bhaumik, Prasenjit; Dhepe, Paresh Laxmikant (2015-01-01). 「第 1 章 バイオマスの糖への変換」非燃料用途向けバイオマス糖 グリーンケミストリーシリーズ 英国王立化学協会 pp. 1–53. doi :10.1039/9781782622079-00001. ISBN 978-1-78262-113-3。
- ^ Singh, S; Singh, V; Aamir, M; Dubey, M; Patel, J; Upadhyay, R; Gupta, V (2016 年 8 月 2 日)。「第 13 章: パルプおよび製紙産業におけるセルラーゼ」。微生物バイオテクノロジーとバイオエンジニアリングにおける新しい、そして将来の開発: 微生物セルラーゼシステムの特性とアプリケーション。doi :10.1016/ B978-0-444-63507-5.00013-7。
- ^ ab Kuhad, RC; Gupta, R.; Singh, A. (2011). 「微生物セルラーゼとその産業応用」.酵素研究. 10 : 6065–6072. doi : 10.4061/2011/280696 .
- ^ Fleming D、Rumbaugh KP（2017年4月）。「医療用バイオフィルムを分散させるアプローチ」。微生物 。5 （2）：15。doi ：10.3390/ microorganisms5020015。PMC 5488086。PMID 28368320。
- ^ Fleming D、Chahin L、Rumbaugh K（2017年2月）。「グリコシド加水分解酵素は創傷における多菌性細菌バイオフィルムを分解する」。抗菌剤および化学療法。61（2）：AAC.01998–16。doi ：10.1128 / AAC.01998-16。PMC 5278739。PMID 27872074 。
- ^ Jasani H、Umretiya N、Dharajiya D、Kapuria M、Shah S、Patel J (2016年6月)。「農業廃棄物からのAspergillus nigerによるセルラーゼの分離、最適化および生産」。純粋応用微生物学ジャーナル。10 (2):1159–66。
- ^ Umezurike GM (1979年1月). 「Botryodiplodia theobromae Patのセルロース分解酵素。セルラーゼとβ-グルコシダーゼの分離と特徴付け」。The Biochemical Journal . 177 (1): 9–19. doi :10.1042/bj1770009. PMC 1186335. PMID 106849 .
- ^ Telke AA, Zhuang N, Ghatge SS, Lee SH, Ali Shah A, Khan H, et al. (2013). 「セルロース基質の効率的な加水分解のための、培養されていない細菌からのファミリー5グリコシド加水分解酵素（Cel5A）のエンジニアリング」PLOS ONE . 8 (6): e65727. Bibcode :2013PLoSO...865727T. doi : 10.1371/journal.pone.0065727 . PMC 3681849 . PMID 23785445.
- ^ Nelson N (1944). 「グルコース測定のためのソモジ法の光度測定への応用」J. Biol. Chem . 153 (2): 375–80. doi : 10.1016/S0021-9258(18)71980-7 .
- ^ Smogyi M (1952年3月). 「糖の測定に関する注記」. The Journal of Biological Chemistry . 195 (1): 19–23. doi : 10.1016/S0021-9258(19)50870-5 . PMID 14938350.
- ^ McCleary BV (1980 年 11 月). 「α-アミラーゼおよび (1 から 4)-β-D-グルカナーゼのアッセイのための新しい発色基質」.炭水化物研究. 86 (1): 97–104. doi :10.1016/s0008-6215(00)84584-x. PMID 6159974.
- ^ McCleary BV、Mangan D、Daly R、Fort S、Ivory R、McCormack N (2014 年 2 月)。「エンド-1,4-β-グルカナーゼ (エンド-セルラーゼ) の測定のための新しい基質」。炭水化物研究。385 :9–17。doi :10.1016/ j.carres.2013.12.001。PMID 24398300 。
- ^ Mangan D、McCleary BV、 Liadova A、Ivory R 、 McCormack N (2014 年 8 月)。「エンド-1,4-β-グルカナーゼの測定のための定量的蛍光アッセイ」。炭水化物研究。395 :47–51。doi :10.1016/j.carres.2014.05.002。PMID 25038461 。
さらに読む
- Chapin FS、Matson PA、Mooney HA (2002)。陸生生態系生態学の原理(PDF)。ニューヨーク：Springer。ISBN 978-0-387-95439-4. 2016年3月5日時点のオリジナル（PDF）からアーカイブ。2014年7月4日閲覧。
- メルクマニュアル診断と治療、第24章
- Deka D、Bhargavi P、Sharma A、Goyal D、Jawed M、Goyal A ( 2011 )。「培地の最適化とさまざまなセルロース基質による分析による、新しい Bacillus subtilis 株のセルラーゼ活性の強化」。酵素 研究。2011 : 151656。doi : 10.4061 /2011/ 151656。PMC 3102325。PMID 21637325。
- Zafar M、Ahmed S、Khan MI、Jamil A (2014 年 5 月)。「Bacillus subtilis由来の新規エンドグルカナーゼの大腸菌における組み換え発現と特性評価」。分子生物学レポート。41 (5 ) : 3295–302。doi : 10.1007 /s11033-014-3192-8。PMID 24493451。S2CID 203374。