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| 名前 | |
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| 推奨されるIUPAC名
1-エチル-1H-ピロール-2,5-ジオン | |
| その他の名前
エチルマレイミド
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| 識別子 | |
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3Dモデル（JSmol）
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| 略語 | ネム |
| 112448 | |
| チェビ |
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| チェムBL |
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| ケムスパイダー |
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| ドラッグバンク |
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| ECHA 情報カード | 100.004.449 |
| EC番号 |
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| 405614 | |
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| ケッグ |
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パブケム CID
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| ユニ |
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CompTox ダッシュボード ( EPA )
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| プロパティ | |
| Ｃ6Ｈ7ＮＯ2 | |
| モル質量 | 125.12528 |
| 融点 | 43～46℃（109～115℉、316～319K） |
| 沸点 | 210 °C (410 °F; 483 K) |
| 危険 | |
| GHSラベル: | |
  
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| 危険 | |
| H300、H301、H311、H314、H317 | |
| P260、P261、P264、P270、P272、P280、P301+P310、P301+P330+P331、P302+P352、P303+P361+P353、P304+P340、P305+P351+P338、P310、P312、P321、P322、P330、P333+P313、P361、P363、P405、P501 | |
特に記載がない限り、データは標準状態（25 °C [77 °F]、100 kPa）の材料に関するものです。
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 インフォボックス参照
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N-エチルマレイミド（ NEM）はマレイン酸から誘導される有機化合物です。アミド官能基を含みますが、より重要なのはチオールに対して反応性のあるアルケンであり、タンパク質やペプチドのシステイン残基を修飾するためによく使用されます。 [2]
有機化学
NEMはマイケル反応におけるマイケル受容体であり、チオールなどの求核剤を付加する。得られたチオエーテルは強いCS結合を特徴とし、反応は事実上不可逆的である。チオールとの反応はpH範囲6.5～7.5で起こり、NEMはアミンと反応するか、よりアルカリ性のpHで加水分解を受ける可能性がある。NEMは酵素学におけるチオール基の機能的役割を調べるために広く使用されている。NEMはすべてのシステインペプチダーゼの不可逆的阻害剤であり、活性部位のチオール基でアルキル化が起こる（模式図を参照）。[3] [4]
ケーススタディ
NEM は小胞輸送を阻害します。溶解バッファーでは、20 ～ 25 mMの NEM がウェスタン ブロット分析におけるタンパク質の脱SUMO 化を阻害するために使用されます。NEM は脱ユビキチン化酵素の阻害剤としても使用されています。
アーサー・コーンバーグとその同僚は、 DNAポリメラーゼIIIをノックアウトするためにN-エチルマレイミドを使用し、その活性をDNAポリメラーゼIの活性と比較しました（それぞれpol IIIとI）。コーンバーグは、当時細菌の DNA複製のメカニズムであると考えられていたpol Iの発見によりノーベル賞を受賞していましたが、この実験で、彼はpol IIIが実際の複製機構であることを示しました。
NEM は、低 K の羊および山羊の赤血球において、ウアバイン非感受性の Cl 依存性 K 流出を活性化します。[5]この発見は、16 年後に KCC1 アイソフォーム cDNA を導入したヒト胎児細胞における K-Cl 共輸送 (KCC) の分子同定に貢献しました。[6]それ以来、NEM は、動物界の多くの種の細胞における K-Cl 共輸送の膜存在を発見または操作するための診断ツールとして広く使用されています。[7]標的チオール基を化学的に特定する試みが何度も失敗したにもかかわらず、[8]生理学的 pH では、NEM はタンパク質キナーゼ内のチオールと付加物を形成し、主にトランスポーターの C 末端ドメイン内の特定のセリンおよびスレオニン残基で KCC をリン酸化します。[9]続いてタンパク質ホスファターゼによって KCC が脱リン酸化され、KCC が活性化されます。[10]
参考文献
- ^ シグマアルドリッチのN-エチルマレイミド
- ^ チオール反応性プローブ アーカイブ 2008-01-28ウェイバックマシンInvitrogen
- ^ ネルソン、DL; コックス、MM「レーニンガー、生化学の原理」第3版。ワース出版：ニューヨーク、2000年。ISBN 1-57259-153-6。
- ^ グレゴリー、JD (1955) J. Am. Chem. Soc. 77、3922-3923
- ^ 遺伝的に K+ 値が低い羊および山羊の赤血球における N エチルマレイミドによる塩化物依存性 K+ フラックスの誘導。PK Lauf および BE Theg. Biochem. Biophys. Res. Comm., 92:1422, 1980
- ^ Gillen CM、Brill S、Payne JA、Forbush B 3rd: ウサギ、ラット、ヒト由来の K-Cl 共輸送体の分子クローニングと機能発現。陽イオン-塩素共輸送体ファミリーの新メンバー。J Biol Chem. 1996 年 7 月 5 日;271(27):16237-44
- ^ K-Cl 共輸送の制御: 機能から遺伝子まで。NC Adragna、M. Di Fulvio、PK Lauf、J. Membrane Biology、200:1-29、2004
- ^ K+ Cl 共輸送: スルフィドリル、二価カチオンおよび赤血球の容積活性化のメカニズム。PK Lauf。Topical Review、J. Memb. Biol. 88:1 13、1985
- ^ Rinehart, J; Maksimova, YD; Tanis, JE; Stone, KL; Hodson, CA; Zhang, J; Risinger, M; Pan, W; Wu, D; Colangelo, CM; Forbush, B; Joiner, CH; Gulcicek, EE; Gallagher, PG; Lifton, RP (2009). 「K-Cl 共輸送体の活性を制御する調節リン酸化部位」. Cell . 138 (3): 525–536. doi :10.1016/j.cell.2009.05.031. PMC 2811214. PMID 19665974 .
- ^ ジェニングス、ML & アルロヒル、NSJ ジェネレーション生理。 95、1021−1040、1990
外部リンク
- ペプチダーゼとその阻害剤に関する MEROPS オンライン データベース: NEM [永久リンク切れ ]
- p-NN'-フェニレンビスマレイミドなどの二官能性類似体は、シスチン残基の架橋試薬として使用できます。Lutter, LC, Zeichhardt, H., Kurland, CG & Stoffier, G. (1972) Mol. Gen. Genet. 119, 357-366 を参照してください。