顕微鏡スライド

顕微鏡スライドは、通常 75 x 26 mm (3 x 1 インチ) で厚さ約 1 mm の薄い平らなガラス片で、顕微鏡で検査する対象物を保持するために使用します。通常、対象物はスライド上にマウント (固定) され、その後、両方を一緒に顕微鏡に挿入して観察します。この配置により、スライドにマウントされた複数の対象物を顕微鏡に素早く出し入れしたり、ラベルを付けたり、輸送したり、適切なスライドケースやフォルダーなどに保管したりすることができます。

顕微鏡スライドは、多くの場合、カバー スリップまたはカバー ガラスと一緒に使用されます。カバー スリップは、標本の上に置かれる、より小さく薄いガラス板です。スライドは、スライド クリップ、スライド クランプ、またはクロス テーブルによって顕微鏡のステージ上に固定されます。クロス テーブルは、顕微鏡のステージ上でスライドを正確に遠隔移動させるために使用されます (自動/コンピューター操作のシステムの場合や、汚染の危険や精度不足のため、指でスライドに触れることが不適切な場合など)。

この概念の起源は、透明な雲母の円盤の間に標本を挟んだ象牙や骨の破片で、これをステージと対物レンズの間の隙間に滑り込ませるというものでした。 ^[1]これらの「スライダー」は、王立顕微鏡学会が標準化されたガラス製顕微鏡スライドを導入するまで、ビクトリア朝時代のイギリスで人気がありました。 ^[2]

標準的な顕微鏡スライドのサイズは約 75 mm x 25 mm (3 インチ x 1 インチ) で、厚さは約 1 mm です。地質学用の 75 x 50 mm、岩石学研究用の 46 x 27 mm 、薄片用の 48 x 28 mm など、さまざまな特殊目的に合わせてさまざまなサイズが用意されています。スライドは通常、一般的なガラスで作られており、エッジは細かく研磨されていることがよくあります。

顕微鏡のスライドは通常、ソーダ石灰ガラスやホウケイ酸ガラスなどの光学品質のガラスで作られていますが、特殊なプラスチックも使用されます。溶融石英スライドは、蛍光顕微鏡など紫外線透過性が重要な場合によく使用されます。^{[3] [4]}

プレーンスライドが最も一般的ですが、いくつかの特殊なタイプがあります。凹型スライドまたはキャビティスライドには、1つまたは複数の浅いくぼみ（「ウェル」）があり、やや厚い物体や、液体や組織培養などの特定のサンプルを保持するように設計されています。^[5] スライドには、安全性や堅牢性を高めるために丸い角がある場合や、スライドクランプまたはクロステーブルで使用するためにカットオフコーナーがある場合があり、その場合、スライドは、1つのコーナーに接触するバネ仕掛けの湾曲したアームによって固定され、スライドの反対側のコーナーを、動かない直角のアームに押し付けます。このシステムを、これらのカットオフコーナーを組み込んでいないスライドで使用すると、コーナーが欠けてスライドが砕ける可能性があります。^[5]

格子線スライドには格子状の線（例えば 1 mm の格子）が描かれており、拡大して見た物体の大きさを簡単に推定でき、また微小な物体を数えるための参照領域を提供する。格子の 1 つの正方形自体がより細かい格子に分割されていることもある。細胞計数用の血球計数器などの特殊用途のスライドには、上面にエッチングまたは研磨された様々なリザーバー、チャネル、バリアがある。^{[6]製造業者は、通常}PTFEなどの不活性材料を使用して 、様々な恒久的なマーキングやマスクを表面に印刷、サンドブラスト、または堆積させる。^[7]

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  細胞カウント用のノイバウアースライド。
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  細胞を数えるために使用されているノイバウアースライドの目盛りの顕微鏡画像。
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  クロステーブル上のスライドクランプによって顕微鏡スタンドに固定されたノイバウアースライド。
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  標準 (75 x 25 mm または 3x1 インチ) および大型 (75 x 51 mm または 3x2 インチ) の顕微鏡スライド。

スライドによっては、鉛筆やペンでラベルを貼るためのつや消しまたはエナメルコーティングされた部分が片方の端にあるものもあります。^{[5]スライドには、化学的不活性や}細胞接着の強化などのために、製造元によって特殊なコーティングが施されている場合があります。コーティングには、薄いサンプルや粉末状のサンプルを保持するために永久電荷が与えられている場合があります。一般的なコーティングには、ポリ-L-リジン、シラン、エポキシ樹脂、^{[5] [7]}、さらには金などがあります。^[8]

顕微鏡のスライドに標本を載せることは、観察を成功させる上で非常に重要なことです。この問題は過去 2 世紀にわたって大きな注目を集めており、多くの専門的で時には非常に高度な技術が駆使された、よく発達した分野です。標本は、多くの場合、より小さなガラスのカバー スリップを使用して固定されます。

カバーガラスの主な機能は、固体標本を平らに押し付け、液体サンプルを均一な厚さの平らな層に成形することです。高解像度の顕微鏡は焦点を合わせる領域が非常に狭いため、これが必須となります。

カバーガラスには、他にもいくつかの機能があります。カバーガラスは、標本を所定の位置に保持し (カバーガラスの重さで、またはウェットマウントの場合は表面張力で)、標本をほこりや偶発的な接触から保護します。また、顕微鏡の対物レンズが標本に接触するのを防ぎ、その逆も同様です。油浸顕微鏡法や水浸顕微鏡法では、カバーガラスが浸漬液と標本との接触を防ぎます。カバーガラスは、標本を密封するためにスライドに接着することができ、標本の脱水や酸化を遅らせ、汚染も防ぎます。標本に応じて、市販のシーラント、実験室で調製したもの、または通常の透明なマニキュアなど、さまざまなシーラントが使用されています。生細胞標本に使用できる無溶剤シーラントは、「ヴァラップ」で、ワセリン、ラノリン、パラフィンを同量混合したものです。^[9] 微生物や細胞の培養は、スライド上に置く前にカバーガラス上で直接培養することができ、標本はスライド上ではなくカバーガラス上に永久的に固定されることもある。^[9]

カバーガラスには様々なサイズと厚さのものがあります。^[10]厚さが適切でない場合、球面収差が発生し、解像度と画像強度が低下する可能性があります。特殊な対物レンズを使用すると、カバーガラスなしで標本を撮影したり、ユーザーが別のカバーガラスの厚さに対応できるように補正カラーを備えた対物レンズを使用したりできます。^{[11] [12]}

ドライマウントは最も単純なマウント方法で、対象物をスライド上に置くだけです。標本と顕微鏡の対物レンズを保護し、標本を動かさずに平らに押さえておくために、カバーガラスを上に置くこともあります。このマウントは、花粉、羽毛、毛髪などの標本を観察するのに適しています。また、透明な膜フィルターに捕らえられた粒子を調べるのにも使用されます (例: 空中浮遊粉塵の分析)。

ウェットマウントでは、標本は表面張力によってスライドとカバーガラスの間に保持されたヨウ素またはその他の液体の滴に置かれます。この方法は、たとえば池の水やその他の液体媒体、特に湖で成長する微生物を観察する場合によく使用されます。

病理学や生物学の研究のために、標本は通常、腐敗を防ぐために固定し、含まれる水分を除去し、水をパラフィンに置き換え、ミクロトームを使用して標本を非常に薄い切片に切断し、切片を顕微鏡のスライドに置き、さまざまな染料を使用して組織を染色して特定の組織成分を明らかにし、組織を透明にしてカバーガラスと封入剤で覆うという複雑な組織学的準備を受けます。

散布標本法とは、濃縮したサンプルを蒸留水に懸濁し、そのサンプルをスライド上に置き、水を蒸発させることで花粉学顕微鏡スライドを作成する方法を指します。^[13]

封入剤は、一般的にはカバーガラスの下に置かれた標本を埋め込む溶液である。水やグリセロールのような単純な液体も封入剤とみなされるが、一般的には硬化して永久的な封入物となる化合物を指す。一般的な封入剤には、パーマウント^[14]、ホイヤーの封入剤、代替のグリセリンゼリー ^[15]などがある。 良い封入剤の特性としては、屈折率がガラス（1.518）に近いこと、標本と反応しないこと、経時的に安定して結晶化、暗色化、屈折率の変化がないこと、標本を調製した媒体（水性またはキシレンやトルエンなどの非極性）に溶解すること、標本の染色が褪色したり浸出したりしないことなどがある。^[16]

蛍光を保存できない免疫蛍光細胞化学でよく使用されます。一時的な保管は暗くて湿ったチャンバーで行う必要があります。一般的な例は次のとおりです。

1. グリセロール-PBS（9:1）とアンティークンチ、例えば以下のいずれか^[17]
   1. p-フェニレンジアミン
   2. プロピルガレート
   3. 1,4-ジアザビシクロ（2,2,2）-オクタン（DABCO）（非常に人気がある）
   4. アスコルビン酸
   5. モウィオールまたはゲルバトール
2. ゼラチン
3. マウント
4. ベクターシールド
5. ゴールドを延長
6. CyGEL / CyGEL Sustain（生きた固定されていない細胞や生物を固定化します）

永久マウントが必要な場合に使用します

1. パーマウント（トルエンおよびα-ピネン、β-ピネン、ジペンテン、β-フェランドレンのポリマー）
2. カナダバルサム
3. DPX ( Distrene 80 – 市販のポリスチレン、可塑剤、例：ジブチルフタレート、キシレン)
4. DPX新製品（キシレンを含みますが、発がん性があるジブチルフタレートは含みません）
5. エンテラン（トルエン配合）
6. エンテラン新製品
7. ヘンプステッド ハライド ホイヤー培地（従来のホイヤー培地の独自配合で、クロラールを60% 含み、既知の発がん性物質は含まれていません）
8. ネオマウント（脂肪族ネオクリアーと互換性がありますが、キシレンなどの芳香族溶剤とは互換性がありません）

ガラスカバーガラスに必要なマウントとは対照的に、博物館のガラス容器内のよりかさばる標本保存のために、いくぶんか似たマウントを行うことができる。しかし、サンプルの準備にはまったく異なるタイプのマウントが行われ、これは生物学的または非生物学的材料用であり、さらに「ホット」（圧縮）および「コールド」（鋳造）タイプのマウントプロセスに細分化される。^{[18] [19]}「マウント」という名前が付けられているが、組織学における包埋に似ており、上記のマウントと混同しないでください。他の分野でのマウントという用語は、他にも多くの意味を持っています。

• ペトリ皿

ウィキブックの学校科学には、顕微鏡スライドに関するページがあります。