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凍結切片法は、検体の迅速な顕微鏡分析を行うための病理検査室の手順です。これは、腫瘍外科で最もよく使用されます。[ 1 ]この手順の技術的な名称は、凍結切片法です。凍結した組織の薄いブロックを冷切するミクロトーム装置は、クライオトームと呼ばれます。[ 2 ]
凍結切片法で作製したスライドの品質は、ホルマリン固定パラフィン包埋組織処理法で作製したスライドの品質よりも劣ります。多くの場合、診断は可能ですが、より正確な診断のためには、固定組織処理法が多くの症例で推奨されます。
術中コンサルテーションとは、病理医による介入全体の名称であり、凍結切片だけでなく、検体の肉眼的評価、検体から採取した細胞診標本（タッチインプリントなど）の検査、特殊検査（分子病理学的技術、フローサイトメトリーなど）のための検体の分注も含まれます。病理医による報告は、多くの場合、「良性」または「悪性」の診断に限定され、インターホンを介して手術中の外科医に伝えられます。悪性であることがすでに確認されている腫瘍を手術する場合、病理医の主な目的は、切除縁に癌が残っていないか、切除縁に癌が残っているかを外科医に知らせることです。処理方法は通常、パン切り法で行われます。しかし、マージン制御手術（CCPDMA ）は、モース手術を含むさまざまな組織切断およびマウント方法を使用して実行できます。
今日、医療検査室で行われている凍結切片法は、1905年にルイス・B・ウィルソンが記述したものに基づいている。ウィルソンは、外科医でありメイヨー・クリニックの創設者の一人であるウィリアム・メイヨーの依頼を受けて、以前の報告からこの技術を開発した。[ 3 ]ボルチモアのジョンズ・ホプキンス病院のトーマス・S・カレンによる以前の報告にも凍結切片法が含まれていたが、ホルマリン固定後のみであった。また、同じくホプキンス病院の病理学者ウィリアム・ウェルチはカレンの手順を試したが、臨床的な成果は得られなかった。そのため、ウィルソンが真にこの手順の先駆者であると一般的に認められている（Gal & Cagle、2005）。[ 4 ]
凍結切片作製の主要装置はクライオスタットであり、これは基本的に冷凍庫内のミクロトーム です。ミクロトームは、1マイクロメートルという薄さの切片を作製できる非常に精密な「デリ」スライサーに例えることができます。通常の組織切片は5～10マイクロメートルの厚さで切断されます。外科検体を金属製の組織ディスクに載せ、チャックに固定して約-20～-30 ℃まで急速凍結します。検体はゲル状の包埋剤（通常はポリエチレングリコールとポリビニルアルコールからなるOCT）に入れます。この化合物は多くの名称で知られており、凍結すると凍結組織と同じ密度になります。この温度では、ほとんどの組織は岩のように硬くなります。通常、脂肪や脂質を多く含む組織にはより低い温度が必要です。各組織には処理に適した温度があります。その後、凍結状態でクライオスタットのミクロトーム部分で切断し、切片をスライドガラスに載せて染色します（通常はヘマトキシリンとエオシン、H&E染色）。サンプルの準備は、従来の組織学的手法よりもはるかに迅速です（約10分対16時間）。ただし、切片の技術的な品質ははるかに低くなります。ラボ全体は9平方フィート（0.84平方メートル）未満のスペースを占めることができ、標準的なワックス包埋標本ラボと比較して最小限の換気で済みます。
凍結切開術の手順：
凍結切片法の主な用途は、手術中に組織を検査することです。これにはさまざまな理由があります。モース手術では、手術検体のリアルタイムのマージンコントロールのための簡単な方法です。腫瘍が転移していると思われる場合、疑われる転移のサンプルを凍結切片に送り、その同一性を確認します。これにより、外科医は手術を続ける意味があるかどうかを判断できます。通常、積極的な手術は、患者を治癒させる可能性がある場合にのみ行われます。腫瘍が転移している場合、手術は通常治癒的ではなく、外科医はより保存的な手術を選択するか、切除をまったく行わないことになります。腫瘍が切除されたが、切除マージンに腫瘍がないかどうかが不明な場合は、術中コンサルテーションを依頼して、マージンをクリアにするためにさらに切除する必要があるかどうかを評価します。センチネルリンパ節生検では、腫瘍組織を含むセンチネルリンパ節が見つかった場合は、さらにリンパ節郭清が行われますが、良性リンパ節の場合は、そのような処置は不要です。
手術が探索的なものであれば、病変の迅速な検査によって患者の症状の原因を特定できる可能性がある。しかし、凍結切片の技術的な質が低いため、病理医の診断は制限される。そのため、術中に最終診断が下されることは稀である。
まれに、凍結切片は、従来の組織学的手法では検出できない物質（例えば脂質）の存在を検出するために用いられる。また、ホルマリンによって隠蔽された抗原を検出するためにも使用できる。凍結切片装置は、重量36kg未満の小型携帯型から、230kg以上の大型据え置き型まで、様々なサイズが用意されている。組織学検査室全体を一つの携帯用ボックスに収めることができるため、凍結切片組織学は原始医療において有効な手段となり得る。
2016年に発表されたコクランの系統的レビューでは、卵巣の疑わしい腫瘍の手術を受けた女性における凍結切片の診断精度を報告したすべての研究を分析しました。このレビューでは、凍結切片で良性または悪性のいずれかが明確に判明した腫瘍については、通常の生検で後に確認されたように、診断精度は良好であると結論付けました。一方、凍結切片の診断が境界腫瘍であり、癌を確定も否定もできない場合、診断精度は低くなりました。このレビューでは、このような不確実な状況では、外科医は、平均してこれらの女性の5人に1人が後に癌であることが判明したため、2回目の手術の必要性を減らすために、最初の手術時にこのグループの女性に追加の手術を行うことを選択する可能性があることを示唆しています。[ 5 ]
超低温切断機は、クライオトームと非常によく似た装置で、超薄切片を作製でき、その組織を透過型電子顕微鏡で観察することができます。超低温切断機の切断厚さは約数十ナノメートルです。組織を包埋することなく超微細構造特性を研究できるため、分子の保存状態が良好です。[ 6 ]