IMViC

IMViC検査は、微生物検査室で大腸菌群の微生物を特定するために用いられる一連の個別検査です。大腸菌群とは、グラム陰性で好気性または通性嫌気性の桿菌であり、48時間以内に乳糖からガスを産生します。一部の大腸菌群の存在は、糞便汚染を示唆します。

「IMViC」という用語は、これらの各検査の頭文字をとった略語です。「I」はインドール試験、「M」はメチルレッド試験、「V」はボーゲス・プロスカウエル試験、「C」はクエン酸試験を表します。小文字の「i」は単に「in」を表しており、クエン酸試験では大腸菌群サンプルを「クエン酸溶液中」に置く必要があるためです。

これらの検査は、腸内細菌科の細菌を識別するのに役立ちます。

この試験では、対象となる微生物をペプトン水ブロスで培養します。このブロスにはトリプトファンが含まれており、トリプトファナーゼ酵素の作用により、インドール分子、ピルビン酸、アンモニウムに変換されます。インドールはキシレンを用いてブロスから抽出されます。ブロスは121  ℃前後で15分間滅菌されます。ブロス中のインドール産生を試験するために、コバック試薬を使用します。コバック試薬は、アミルアルコール、パラジメチルアミノベンズアルデヒド、濃塩酸から構成されています。コバック試薬は、実際には微生物がインドールをアミノ酸トリプトファンから分離する能力を判定するために使用され、培養後に添加されます。陽性結果は、液体の表面にピンク/赤色の層が形成されることで示されます。

これらの検査はどちらも、細菌培養に同じ培地を使用します。この培地はMR-VP培地と呼ばれます。培養後、培地は2つの異なる試験管に分けられ、1つはメチルレッド（MR）試験用、もう1つはボーゲス・プロスカウエル（VP）試験用となります。

メチルレッド試験は、ピルビン酸を基質とする混合酸発酵経路による代謝中に生成される酸を検出する試験です。pH指示薬であるメチルレッドを一方の試験管に加え、pHが4.2未満で赤色に変色すれば陽性（混合酸発酵が行われている）と判定されます。一方、pHが6.2以上で黄色のままであれば陰性と判定され、ブタンジオール発酵が行われていることを示します。

VP試験は、α-ナフトールと水酸化カリウムを用いて、2,3-ブタンジオール発酵経路の中間体であるアセチルメチルカルビノール（アセトイン）の存在を検査する。両試薬を加えた後、試験管を激しく振とうし、5～10分間静置する。ピンクがかった赤色に変色すれば陽性反応であり、2,3-ブタンジオール発酵経路が利用されていることを意味する。

1930年代、SA Koserは有機酸の細菌異化作用を研究するための実験を行った。^{[ 1 ]} Koserは、クエン酸代謝が自然環境に存在する細菌の指標になり得ることを発見した。さらに、クエン酸は、腸内細菌科などの土壌や水生環境に存在する細菌性大腸菌群と、糞便で汚染された大腸菌群を区別するために使用できることもわかった。糞便で汚染されていない大腸菌群は増殖したが、糞便で汚染された大腸菌群は増殖しなかったことがわかった。

このテストでは、シモンズのクエン酸寒天培地を使用して、微生物がクエン酸を唯一の炭素源およびエネルギー源として利用できるかどうかを判定します。寒天培地には、クエン酸とアンモニウムイオン（窒素源）およびpH指示薬としてブロモチモールブルー（BTB）が含まれています。^{[ 2 ]}ブロモチモールブルーは、偽陽性を減らすために添加されました。クエン酸寒天培地は接種前は緑色ですが、陽性試験指示薬であるBTBによって青色に変化し、クエン酸が利用されたことを意味します。また、細菌の増殖を最大化してクエン酸の利用をより明確に示すために、このテストは斜面培地で準備されます。

これらのIMViCテストは、特にウレアーゼテストと併用した場合、腸内細菌科の細菌を鑑別するのに役立ちます。

重要な種に関するIMViCの結果を以下に示します。^{[ 3 ]}