トリクローム染色

トリクローム染色は、 2 種類以上の酸性染料をポリ酸と組み合わせて使用​​する組織学的 染色法です。染色では、対照的な色で着色することで組織を区別します。これにより、細胞や組織の微細な特徴のコントラストが増し、顕微鏡で観察したときに見やすくなります。

トリクロームという言葉は「3つの色」を意味します。「トリクローム」と説明された最初の染色法はマロリーのトリクローム染色で、赤血球を赤色、筋肉組織を赤色、コラーゲンを青色にそれぞれ染色しました。その他のトリクローム染色法には、マッソンのトリクローム染色、リリーのトリクローム染色、ゴモリのトリクローム染色などがあります。

トリクローム染色がなければ、ある特徴を別の特徴と区別することは極めて困難です。例えば、平滑筋組織はコラーゲンと区別するのが困難です。トリクローム染色は、筋肉組織を赤く染め、コラーゲン繊維を緑や青に染めることができます。肝生検では、肝細胞の間に細いコラーゲン繊維が見られることがあり、染色法に基づいてコラーゲンの量を推定することができます。トリクローム法は現在、筋肉とコラーゲン、下垂体α細胞とβ細胞、フィブリンとコラーゲン、新鮮凍結筋肉切片のミトコンドリアの区別などに使用されています。この方法は、肝硬変などでのコラーゲン組織の増加（線維性変化）の特定や、筋細胞と線維芽細胞から発生する腫瘍の区別に役立ちます。^[1]

トリクローム染色法では、2 種類以上の酸性染料を使用します。通常、酸性染料は同じ基本タンパク質を染色しますが、それらを連続して適用することで染色パターンを操作できます。ポリ酸 (リンモリブデン酸やリンタングステン酸など) は、染料を選択的に除去するために使用されます。ポリ酸は高分子量の染料として作用すると考えられており、コラーゲンから簡単に除去できる染料を置き換えます。^{[引用が必要]}

通常、最初に希酢酸中の赤色染料を塗布して、すべての成分を染色します。次に、置換によりコラーゲンと他の成分から赤色染料を除去するためにポリ酸を塗布します。希酢酸中の 2 番目の酸性染料 (青または緑) を塗布すると、ポリ酸が置換され、最初に使用した染料とは対照的な色でコラーゲンが染色されます。赤血球を染色する場合は、赤色染料で染色する前に、分子量の小さい黄色またはオレンジ色の染料を塗布します。通常は、80% エタノールの飽和溶液から塗布され、ピクリン酸 (それ自体が染料) とポリ酸と組み合わせて使用​​されることがよくあります。これらの方法は、染料、密度、アクセス性などに対する組織の反応のわずかな違いを利用します。^{[引用が必要]}

染料とポリ酸を順に塗布するトリクローム染色は、マルチステップ トリクローム染色と呼ばれます。「ワンステップ」法では、ポリ酸の有無にかかわらず、すべての染料が 1 つの溶液に混合されます。トリクローム染色の最も古いワンステップ アプローチの 1 つは、筋肉と細胞質を黄色に、コラーゲンを赤色に染色する van Gieson 法です。もう 1 つは、Masson のトリクローム染色によく似たGömöri トリクローム染色です。「イエローソルブ」法では、最初に希酢酸に溶かした赤色染料を塗布し、次に切片を徹底的に脱水して水分が残らないようにします。次に赤色染料を、セロソルブ (2-エトキシエタノール) などの溶媒に溶かした黄色染料で置き換えます。イエローソルブという名前は、イエローとセロソルブを組み合わせたものです。細胞封入体用の Lendrum のフロキシン-タートラジンは、イエローソルブ染色の一例です。^{[出典が必要]}

トリクローム染色に使用される染料には以下のものがあります。

赤

酸フクシン、キシリジンポンソー、クロモトロープ2R、ビーブリッヒスカーレット、ポンソー6R、フロキシン

青と緑

ライトグリーンSF黄色、ファストグリーンFCF、メチルブルー、ウォーターブルー

黄色

ピクリン酸、オレンジG、マルティウスイエロー、タートラジン、ミリングイエロー

• 分散染色
• 顕微鏡検査
• 位相差顕微鏡

• Baker JR (1958) Principles of biologic Microtechnique. ロンドン: メシューエン。(ペーパーバックの再版も出版、Franklin Classics Trade Press、米国、2018年。ISBN 978-0353331044。)
• Horobin RW (1982) 組織化学。シュトゥットガルト：グスタフ・フィッシャー。 ISBN 3437107003。
• Horobin RW (1988) 『組織化学の理解』 チチェスター: Ellis Horwood。ISBN 9780470210604。
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• マッソンのトリクロームプロトコル