組織型判定

組織タイピングは、移植前にドナー候補とレシピエントの組織の適合性を検査する手順です。ドナーとレシピエントの組織が適合しないと、組織が拒絶される可能性があります。組織タイピングには複数の方法があります。

組織タイピングでは、個人のヒト白血球抗原（HLA）が特定されます。^[1] HLA分子は細胞表面に存在し、免疫細胞（樹状細胞やT細胞など）間の相互作用を促進し、適応免疫応答を引き起こします。^[2]ドナーのHLAがレシピエントの免疫系によってレシピエント自身のHLAと異なると認識されると、ドナー組織に対する免疫応答が誘発される可能性があります。^[3]より具体的には、臓器ドナーとレシピエントのHLAの不一致により、抗HLAドナー特異的抗体（DSA）が発生する可能性があります。^[4] DSAは、レシピエントにおけるドナー組織の拒絶反応と強く関連しており、その存在は抗体媒介性拒絶反応の指標であると考えられています。^[5]ドナーとレシピエントのHLAが一致すると、ドナー組織がレシピエントの免疫系に受け入れられる可能性が大幅に高まります。^[3]組織タイピングでは、ドナーとレシピエントの両方で、HLAクラスIA A、B、C遺伝子、およびHLAクラスII DRB1、DRB3、DRB4、DRB5、DQA1、DQB1、DPA1、DPB1遺伝子を含む多くのHLA遺伝子をタイピングする必要があります。^[6] HLA領域はヒトゲノムの中で最も遺伝的に可変性の高い領域であるという事実により、HLAタイピングはさらに困難になっています。^[7]

組織タイピングの最初の方法の 1 つは血清学的タイピングによるものでした。この技術では、ドナーの血液細胞を抗 HLA抗体を含む血清と混合してHLAタイピングを行います。抗体がドナーの HLA 上のエピトープを認識すると、補体活性化が起こり、細胞が溶解して死滅し、細胞が染料 (トリパンブルー)を取り込むようになります。これにより、血清中の既知の抗体の特異性に基づいて間接的に細胞の HLA を識別できます。この方法は、簡単、迅速、低コストであるため広く使用されていますが、HLA対立遺伝子の大きな変動により、検査対象の細胞の HLA に特異的な抗体を含む血清が入手できない場合があります。^{[6] [3]}血清学的タイピングでは HLA 領域が明確に示されず、必ずしも HLA タイピングが成功するとは限らないため、多くの研究室では血清学的タイピングの使用を中止し、より効果的な方法を採用しています。^{[6] [8]}

最近では、配列特異的プライマー（SSP）または配列特異的オリゴヌクレオチドプローブ（SSOP）に基づくポリメラーゼ連鎖反応（PCR ）の使用を含む、より効果的な他のアプローチが登場しています。 ^{[3] [6]}しかし、SSP-PCRは時間とリソースの両方を消費する可能性があります。^[8] SSOP-PCRは、骨髄登録のための多数のドナーなど、多数の個人のHLAタイピングに適しています。^[8] RT-PCRは、HLAタイピングの別のアプローチであり、高速で多用途ですが、高価です。^[6]

参照鎖介在立体構造解析（RSCA）は、HLAタイピングに使用されるもう1つの方法です。この方法では、未知のHLAサンプルを参照対立遺伝子と混合し、電気泳動によってゲル内で泳動します。^[8] HLA領域は非常に多様であるため、RSCAは利用可能なHLA参照対立遺伝子の数によって制限されます。^[8]

サンガー法または次世代シーケンシング法による直接DNAシーケンシングは現在HLAタイピングの最良の方法と考えられていますが、時間がかかり、最も高価な方法の1つでもあります。^{[6] [8]} RNAシーケンシングも使用できますが、RNAは不安定で劣化しやすいため、多くの研究室では使用されていません。^[8]

• 移植片対宿主病
• 組織適合性

• 着床前組織型の仕組み、HFEA ウェブサイト
• 米国国立医学図書館の医学件名標目表(MeSH)における組織分類
• 組織型分類を理解する