放射性免疫沈降アッセイ緩​​衝液

放射性免疫沈降アッセイ緩​​衝液（RIPA緩衝液）は、放射性免疫沈降アッセイ（RIPA）のために細胞や組織を溶解するために使用される溶解緩衝液です。 ^{[1] [2]} この緩衝液は、イオン性界面活性剤SDSとデオキシコール酸ナトリウムを有効成分として含んでいるため、 NP-40やTriton X-100よりも変性が強く、核抽出物の調製において核膜を破壊するのに特に有用です。RIPA緩衝液中のより強力な界面活性剤（SDSなど）は、タンパク質の変性を大きく引き起こし、タンパク質間相互作用を減少させます。

RIPA バッファーのレシピは作成者によって若干異なり、次のようなものが含まれます。

• 10～50 mMトリス-HCl（代わりに10 mMリン酸ナトリウムを使用してもよい）、pH 7～8
• 浸透圧を生理学的レベルに近づけるために150mM NaCl
• タンパク質間またはチューブとの非特異的相互作用を防ぐための非イオン性界面活性剤（1％トリトンX-100またはNP-40 ）
• 陰イオン性洗剤（0.1～0.5%デオキシコール酸、0.1～0.5% SDS）。

以下の材料はオプションであり、必要に応じて含められます。

• プロテアーゼ阻害剤（1 mM PMSF（i-プロパノール中の1 Mストックからの新鮮）、ロイペプチン、アプロチニン、ペプスタチン各1 μg/mL 、1-5 mM EDTA、0.5-1 mM EGTA、5 mMアミノカプロン酸）または市販のプロテアーゼ阻害剤カクテル（製造元の指示に従って使用）
• _{ホスファターゼ阻害剤としてNa 3} VO ₄とNa ₄ P ₂ O ₇をそれぞれ1 mM （リン酸化状態が重要な場合）
• 防腐剤として1mM NaF
• 還元剤として5～10 mMジチオトレイトール（DTT）またはβ-メルカプトエタノール。