
ミニ染色体は、セントロメア、テロメア、複製起点を含む染色体に似た小さなクロマチン様構造ですが、遺伝物質は比較的少量です。 [ 1 ]細胞分裂中に細胞内で自律的に複製されます。[ 2 ]ミニ染色体は、染色体異常などの自然過程、または遺伝子工学によって作られる可能性があります。[ 1 ]
ミニ染色体は、線状または環状のDNA断片のいずれかである。[ 2 ]分子生物学者は、染色体上の不要な遺伝情報を最小限に抑え、DNA複製に必要な基本構成要素(セントロメア、テロメア、複製配列)を含めることで、宿主細胞に新しい遺伝子を挿入または提示するために利用できる染色体プラットフォームを構築することを目指している。[ 2 ]
遺伝子工学技術によるミニ染色体の作製には、主に2つの方法、すなわちde novo(ボトムアップ)アプローチとトップダウンアプローチがある。[ 1 ]
染色体の最小構成要素(セントロメア、テロメア、およびDNA複製配列)は、分子クローニング技術を用いてin vitroで目的の染色体内容物を構築することにより組み立てられます[ 3 ]。次に、ミニ染色体の目的の内容物を、構成要素を機能的な染色体に組み立てることができる宿主(通常は酵母または哺乳類細胞[ 4 ] )に形質転換する必要があります。このアプローチは、遺伝子工学の可能性のためにトウモロコシにミニ染色体を導入するために試みられてきましたが、成功は限定的で疑問視されています[ 5 ] 。一般的に、de novoアプローチは、種の不適合性の問題とセントロメア領域のヘテロクロマチン性のため、トップダウン法よりも困難です[ 4 ] 。
この方法は、テロメア媒介染色体切断(TMCT)のメカニズムを利用します。このプロセスは、テロメア配列を選択的に宿主ゲノムに組み込むことによって切断を生成するものです。この挿入により、より多くのテロメア配列が生成され、最終的に切断されます。 [ 2 ]新しく合成された切断された染色体は、望ましい形質のための新しい遺伝子を挿入することによって改変することができます。トップダウンアプローチは、植物の遺伝子工学で使用するために余分な染色体を生成するより妥当な方法として一般的に考えられています。特に、細胞分裂中の安定性が実証されているため有用です。[ 6 ]このアプローチの制限は、労力がかかることです。
従来の遺伝子工学の方法とは異なり、ミニ染色体を使用すると、複数の遺伝子セットを1つの操作された染色体パッケージに転送して発現させることができます。[ 7 ]既存の配列に新しい遺伝子を挿入する従来の方法では、内在性遺伝子の破壊[ 1 ]を引き起こし、宿主細胞に悪影響を与える可能性があります。さらに、従来の遺伝子挿入方法では、科学者は新しく挿入された遺伝子が宿主細胞の染色体のどこに位置するかを制御する能力が低く[ 8 ]、世代から世代への複数の遺伝子の遺伝を予測することが困難でした。ミニ染色体技術では、同じ染色体上に遺伝子を並べて積み重ねることができるため、新しい形質の分離の可能性が低くなります。
2006年、科学者たちはトウモロコシ植物のテロメア切断を利用してミニ染色体を生成することに成功し、これを植物ゲノムに遺伝子を挿入するためのプラットフォームとして利用できることを実証した。[ 9 ]植物ではテロメア配列が保存されているため、この戦略は他の植物種でも追加のミニ染色体を構築するために利用できる可能性がある。[ 1 ]
2007年、科学者たちはde novo法を用いて試験管内でミニ染色体を組み立てることに成功したと報告した。[ 5 ]
ミニ染色体を用いた、より望ましい作物形質の創出方法が積極的に研究されている。主な利点としては、宿主ゲノムと高い適合性を持つ遺伝情報を導入できることが挙げられる。これにより、細胞分裂や遺伝子発現などの様々な重要なプロセスを阻害するリスクが排除される。開発が進めば、ミニ染色体の利用は将来、主要作物の生産性に大きな影響を与える可能性がある。[ 10 ]
ミニ染色体は酵母細胞や動物細胞にも挿入することに成功している。これらのミニ染色体はde novo法を用いて構築された。[ 2 ]