LB培地ボトルとLB寒天培地プレート
LB寒天培地プレートリゾジェニーブロス(LB)は、主に細菌の増殖に使用される栄養豊富な培地です。その開発者であるジュゼッペ・ベルターニは、LBをリゾジェニーブロスの略称として意図していましたが[ 1 ] 、LBは口語的にルリアブロス、レノックスブロス、ライフブロス、またはルリア・ベルターニ培地を意味するようになりました[ 2 ]。LB培地の組成は、1951年にベルターニが発表した溶原性に関する最初の論文で公表されました。この論文で彼は、改良されたシングルバースト実験とファージP1、P2、およびP3の分離について説明しました。彼は、赤痢菌の増殖とプラーク形成を最適化するためにLB培地を開発しました[ 1 ] [ 3 ]。
LB培地の組成は、1950年代から大腸菌の培養における業界標準となっています。 [ 4 ] [ 5 ]これらの培地は、プラスミドDNAや組換えタンパク質の調製のための分子微生物学の応用において広く使用されてきました。実験室で組換え大腸菌株を維持および培養するために最も一般的に使用されている培地の1つであり続けています。[ 5 ] [ 4 ]ただし、生理学的研究では、LB培地の使用は推奨されません。[ 6 ]
LBにはいくつかの一般的な製剤があります。それらはそれぞれ異なりますが、一般的に成長促進に使用される成分の構成はやや似ており、以下のようなものが含まれます。
ナトリウムイオンの輸送と浸透圧バランスは塩化ナトリウムによって供給されます。トリプトンは、増殖中の細菌にペプチドやペプトンなどの必須アミノ酸を供給するために使用され、酵母エキスは、細菌の増殖に役立つ多数の有機化合物を供給するために使用されます。これらの化合物には、ビタミンや特定の微量元素が含まれます。
ベルタニは1951年の論文で、溶液1リットルあたり10グラムのNaClと1グラムのグルコースを使用しました。ルリアは1957年の「Lブロス」でベルタニの元のレシピをそのままコピーしました。[ 7 ]後に発表されたレシピでは、通常グルコースは省略されています。
LB培地これらの製剤は一般的に塩化ナトリウムの含有量が異なるため、特定の細菌株および望ましい培養条件に適した浸透圧条件を選択できる。低塩製剤であるレノックスとルリアは、塩分感受性抗生物質を必要とする培養に最適である。
- LB(ミラー)(10 g/L NaCl)
- LB(レノックス)(NaCl 5g/L)
- LB(ルリア)(0.5 g/L NaCl)[ 8 ]
pHを調整する
オートクレーブ処理の前に、一部の研究室では水酸化ナトリウムを用いてLB培地のpHを7.5または8に調整します。しかし、水酸化ナトリウムは培地に緩衝能を与えないため、細菌培養中にpHが急速に変化します。これを回避するため、一部の研究室では、目的のpHに調整した1 mol/L TRISストックから希釈した5~10 mmol/L TRIS 緩衝液でpHを調整することを好みます。ただし、ほとんどの場合、pHを調整することは絶対に必要ではありません。一部の研究室では、予防措置としてpHを7.0に調整するだけです。[ 8 ]
参考文献
- 1 2 Bertani, G. (2004). "20世紀半ばの溶原性:P1、P2、およびその他の実験システム" . Journal of Bacteriology . 186 (3): 595– 600. doi : 10.1128/JB.186.3.595-600.2004 . PMC 321500 . PMID 14729683 .
- ↑リンドクヴィスト、BH;ハガード=ユングクヴィスト、E;カレンダー、R (2015 年 4 月 3 日)。「ジュゼッペ・ベルターニ (1923–2015)」。バクテリオファージ。5 (2) e1054060。土井: 10.1080/21597081.2015.1054060。PMC 4588218。PMID 26442191。
- ↑ Bertani, G (1951). "溶原性に関する研究。I. 溶原性大腸菌によるファージ放出様式" . Journal of Bacteriology . 62 (3): 293– 300. doi : 10.1128/jb.62.3.293-300.1951 . PMC 386127 . PMID 14888646 .
- 1 2 Ezraty, Benjamin; Henry, Camille; Hérisse, Marion; Denamur, Erick; Barras, Frédéric (2014 年 9 月) 「市販のリゾジェニー ブロス培養培地と酸化ストレス: 慎重な話」Free Radical Biology and Medicine . 74 : 245– 251. doi : 10.1016/j.freeradbiomed.2014.07.010 . PMID 25048972 .
- 1 2 「微生物培地入門」 .ミリポアシグマ. 2024年8月1日取得.
- ↑二階堂弘(2009)「LB媒体の限界」『小さなことを考えて』
- ↑ Luria, SE; Burrous, Jeanne W. (1957 年 10 月). "大腸菌と赤痢菌のハイブリダイゼーション" . Journal of Bacteriology . 74 (4): 461– 476. doi : 10.1128/jb.74.4.461-476.1957 . PMC 289941 . PMID 13475269 .
- 1 2 MacWilliams, Maria P.; Liao, Min-Ken (2006 年 10 月 9 日). "Luria Broth (LB) および Luria Agar (LA) 培地とその使用プロトコル" (PDF) . American Society For Microbiology . 2023 年3 月 6 日取得.