イソプロピルβ-D-1-チオガラクトピラノシド

イソプロピルβ-d-1-チオガラクトピラノシド
名前
	IUPAC名プロパン-2-イル 1-チオ-β- D-ガラクトピラノシド
	体系的なIUPAC名 (2 R ,3 R ,4 S ,5 R ,6 S )-2-(ヒドロキシメチル)-6-[(プロパン-2-イル)スルファニル]オキサン-3,4,5-トリオール
識別子
CAS番号	367-93-1 ;
3Dモデル（JSmol）	インタラクティブ画像;
ケムスパイダー	571154;
ECHA 情報カード	100.006.094
メッシュ	イソプロピル+チオガラクトシド
パブケム CID	656894;
ユニ	X73VV2246B ;
CompTox ダッシュボード ( EPA )	DTXSID6041052;
	InChI InChI=1S/C9H18O5S/c1-4(2)15-9-8(13)7(12)6(11)5(3-10)14-9/h4-13H,3H2,1-2H3/t5- 、6+、7+、8-、9+/m1/s1 キー: BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N; InChI=1/C9H18O5S/c1-4(2)15-9-8(13)7(12)6(11)5(3-10)14-9/h4-13H,3H2,1-2H3/t5- 、6+、7+、8-、9+/m1/s1 キー: BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXBD;
	笑顔 CC(C)S[C@H]1[C@@H]([C@H]([C@H]([C@H](O1)CO)O)O)O;
プロパティ
化学式	C9H18O5Sの
モル質量	238.30 グラムモル−1
	特に記載がない限り、データは標準状態（25 °C [77 °F]、100 kPa）の材料に関するものです。インフォボックス参照

イソプロピルβ- d -1-チオガラクトピラノシド（IPTG）は分子生物学試薬です。この化合物は、lacオペロンの転写を誘発するラクトース代謝産物であるアロラクトースの分子模倣物であり、遺伝子がlacオペレーターの制御下にある場合にタンパク質発現を誘導するために使用されます。

作用機序

アロラクトースと同様に、IPTG はlac リプレッサーに結合し、アロステリックな方法で lac オペレーターからテトラマーリプレッサーを解放し、それによって lac オペロン内の遺伝子の転写を可能にします。たとえば、β-ガラクトシドを単糖類に加水分解する加水分解酵素である β-ガラクトシダーゼをコードする遺伝子などです。しかし、アロラクトースとは異なり、硫黄 ( S ) 原子は細胞によって加水分解されない化学結合を形成するため、細胞が誘導物質を代謝または分解するのを防ぎます。したがって、実験中、その濃度は一定に保たれます。

大腸菌によるIPTGの取り込みは、他の輸送経路も関与しているため、ラクトースパーミアーゼの作用とは無関係である可能性がある。 ^[1]低濃度では、IPTGはラクトースパーミアーゼを介して細胞内に入るが、高濃度（通常はタンパク質誘導に使用される）では、IPTGはラクトースパーミアーゼとは無関係に細胞内に入ることができる。^[2]

研究室での使用

粉末として 4 °C 以下で保存した場合、IPTG は 5 年間安定しています。溶液状態では安定性が大幅に低下するため、Sigma は室温で 1 か月以内の保存を推奨しています。^[3] IPTG は、100 μmol/L ～ 3.0 mmol/L の濃度範囲でタンパク質発現を効果的に誘導します。通常、滅菌濾過した 1 mol/L の IPTG 溶液を指数関数的に増殖する細菌培養物に 1:1000 の割合で加え、最終濃度を 1 mmol/L にします。使用する濃度は、必要な誘導の強さ、および使用する細胞またはプラスミドの遺伝子型によって異なります。lacリプレッサーを過剰に産生する変異体であるlacI ^{q が}存在する場合は、より高い IPTG 濃度が必要になる場合があります。^[4]

ブルーホワイトスクリーンでは、IPTGはX-galと一緒に使用されます。ブルーホワイトスクリーンにより、クローニング実験で非組み換えプラスミドではなく組み換えプラスミドで形質転換されたコロニーを識別できます。^[要出典]^[5]

参考文献

^ Hansen LH、Knudsen S、Sørensen SJ (1998 年 6 月)。「IPTG 誘導性プロモーターの誘導に対する lacY 遺伝子の影響、大腸菌と蛍光菌で研究」。Curr . Microbiol . 36 (6): 341– 7. doi :10.1007/s002849900320. PMID 9608745. S2CID 22257399. 2000 年 10 月 18 日のオリジナルからアーカイブ。
^ Marbach A, Bettenbrock K (2012). 「大腸菌におけるlacオペロン誘導：IPTGとTMG誘導の系統的比較およびトランスアセチラーゼLacAの影響」Journal of Biotechnology . 157 (1): 82– 8. doi :10.1016/j.jbiotec.2011.10.009. PMID 22079752.
^ https://www.sigmaaldrich.com/content/dam/sigma-aldrich/docs/Sigma-Aldrich/Product_Information_Sheet/i5502pis.pdf ^{[リンク切れ‍ ]}
^ BL21(DE3) コンピテントセル、BL21 (DE3)pLysS コンピテントセル、および BL21 コンピテントセル取扱説明書(改訂版 #066004e ed.)。カリフォルニア州ラホヤ: Stratagene。2006 年、p. 7。
^ https://www.agilent.com/Library/usermanuals/Public/200521.pdf ^{[ベア URL PDF ]}

外部リンク

PDB内のタンパク質に結合したIPTG

[1] Hansen LH、Knudsen S、Sørensen SJ (1998 年 6 月)。「IPTG 誘導性プロモーターの誘導に対する lacY 遺伝子の影響、大腸菌と蛍光菌で研究」。Curr . Microbiol . 36 (6): 341– 7. doi :10.1007/s002849900320. PMID 9608745. S2CID 22257399. 2000 年 10 月 18 日のオリジナルからアーカイブ。

[2] Marbach A, Bettenbrock K (2012). 「大腸菌におけるlacオペロン誘導：IPTGとTMG誘導の系統的比較およびトランスアセチラーゼLacAの影響」Journal of Biotechnology . 157 (1): 82– 8. doi :10.1016/j.jbiotec.2011.10.009. PMID 22079752.

[3] ttps://www.sigmaaldrich.com/content/dam/sigma-aldrich/docs/Sigma-Aldrich/Product_Information_Sheet/i5502pis.pdf ^{[リンク切れ‍ ]}

[4] BL21(DE3) コンピテントセル、BL21 (DE3)pLysS コンピテントセル、および BL21 コンピテントセル取扱説明書(改訂版 #066004e ed.)。カリフォルニア州ラホヤ: Stratagene。2006 年、p. 7。

[5] ttps://www.agilent.com/Library/usermanuals/Public/200521.pdf ^{[ベア URL PDF ]}