ゴルジ法

ゴルジ法は、光学顕微鏡下で神経組織を視覚化するために使用される銀染色技術です。この方法は、イタリアの医師で科学者のカミッロ・ゴルジによって発見され、1873年にこの技術で作成された最初の写真を発表しました。^[1] 当初、ゴルジによって黒色反応( la reazione nera ) と名付けられましたが、ゴルジ染色、または後にゴルジ法 として知られるようになりました。

ゴルジ染色はスペインの 神経解剖学者 サンティアゴ・ラモン・イ・カハール(1852-1934) が神経系の組織に関する数々の新しい事実を発見するために使用し、ニューロン理論の誕生につながった。最終的にラモン・イ・カハールは「二重含浸」と名付けた方法を使用してこの技術を改良した。現在でも使用されているラモン・イ・カハールの染色技術はカハール染色と呼ばれている。^{[出典が必要]}

神経組織の細胞は密集しており、すべての細胞を染色しても、その構造や相互接続に関する情報はほとんど得られません。さらに、ニューロンの軸索や樹状突起を含む神経細胞の細いフィラメントは、通常の染色技術では見るには細すぎて透明です。ゴルジ法は、限られた数の細胞全体をランダムに染色します。これが起こるメカニズムはまだほとんどわかっていません。^{[2]樹状突起と細胞体は茶色と黒にはっきりと染色され、全長にわたって追跡できるため、神経解剖学者はニューロン間の接続を追跡し、}脳と脊髄の多くの部分の複雑なネットワーク構造を可視化することができました。

ゴルジ染色は、アルデヒドで固定した神経組織に二クロム酸カリウムと硝酸銀を染み込ませることで実現します。染色された細胞は、クロム酸銀の微結晶によって満たされます。

SynapseWeb ^[3]によると、ゴルジ染色法の手順は次の通りです。

1. ホルムアルデヒド固定（またはパラホルムアルデヒド-グルタルアルデヒド灌流）脳組織のブロック（約10x5 mm）を2％二クロム酸カリウム水溶液に2日間浸します。
2. ブロックをろ紙で軽く乾かします。
3. ブロックを硝酸銀の 2% 水溶液にさらに 2 日間浸します。
4. 約20～  100μmの厚さに切片を切ります。
5. エタノールで素早く脱水し、透明にしてマウントします（例：Depex または Enthalan に）。

この技術はその後改良され、サンプルを塩化金に浸し、シュウ酸に浸した後、チオ硫酸ナトリウムで銀を除去することで、銀沈殿物を金に置き換えることができるようになりました。これにより、金の小さな粒子によって特徴づけられる超微細構造の詳細を含む微細構造がより高度に保存されます。^[4]

ラモン・イ・カハールはゴルジ法について次のように述べています。

私は、クロム銀反応の驚くべき啓示力を自分の目で見て、その発見によって科学界に何の興奮も起こらなかったことに驚いたことを表明した。

Recuerdos de mi vida、Vol. 2、労働科学の歴史。マドリード: モヤ、1917 年、p. 76.

• ゴルジ体で染色した皮質細胞の顕微鏡写真。IHC 画像ギャラリー。
• ゴルジ体の含浸。ハエの脳の画像。
• ゴルジ法を使用した樹状突起棘の可視化。SynapseWeb。ゴルジ含浸のタイムラプス研究が含まれています。
• Berrebi, Albert: ニューロンの細胞生物学: 構造と研究方法。(PDF)
• BrainMaps プロジェクトの「ゴルジ染色ニューロン」を含む染色された脳スライス画像