ブアン溶液

ブアン溶液（ブアンのじゅうぶん）は、組織学で使われる複合固定液である。^{[1]フランスの生物学者}ポル・ブアンによって発明され、水溶液中のピクリン酸、酢酸、ホルムアルデヒドから構成されている。 ^[2]ブアン液は、10%中性緩衝ホルマリンよりも鮮明で優れた核染色を可能にするため、消化管生検の固定に特に有用である。電子顕微鏡検査のために組織の超微細構造を保存する必要がある場合、これは良い固定液ではない。しかし、柔らかく繊細な質感を持つ組織構造を保存する必要がある場合には良い固定液である。この固定液中の酢酸は、赤血球を溶解し、組織内の小さな鉄分とカルシウム沈着物を溶解する。酢酸をギ酸に置き換えた変種は、組織の固定と脱灰の両方に使用できる。^[3]ブアン溶液中の3つの化学物質の効果は互いにバランスをとっている。ホルマリンは細胞質を好塩基性にするが、この効果はピクリン酸の効果によって相殺される。その結果、核と細胞質のH&E染色は優れたものとなる。ホルマリンの組織硬化効果は、ピクリン酸と酢酸の軟組織固定効果によって相殺される。酢酸の組織膨張効果は、ピクリン酸の組織収縮効果によって相殺される。^[4]

ホルムアルデヒドで固定した組織の水和切片は、通常、ブアン溶液で前処理され、コラーゲン繊維と細胞質（筋肉）繊維の色の対比をトリクローム染色で正確に検出する。トリクローム法は、塩化水銀を含む酸性混合物で固定した組織用に考案されたが、現在は小規模にしか使用されていない。トリクローム染色の補正には、ブアン溶液のピクリン酸成分のみが必要である。^[5]

ブアン溶液を使用する場合、いくつかの潜在的な問題が発生する可能性があります。溶液にはホルマリンが含まれているため、顕微鏡で組織切片を観察するとホルマリン色素が残っている場合があります。湿った組織は、ブアン溶液で 24 時間未満固定する必要があります。余分なピクリン酸は、いくつかのアルコールと水の溶液を使用して組織から洗い流す必要があります。そうしないと、染色の品質が時間の経過とともに低下する可能性があります。ブアン溶液で固定した湿った組織は、ブアン溶液ではなく、アルコールと水の溶液で保管する必要があります。ブアン溶液にはホルムアルデヒド、ピクリン酸、酢酸が含まれているため、これらの物質に対する適切な安全対策を講じ、規制に従う必要があります。特に、ピクリン酸は爆発性があり、乾燥すると摩擦と衝撃に敏感で、一部の金属と接触すると不安定な金属ピクリン酸を形成する可能性があることに注意してください。

この固定液は「ブアン液」という名前で、海洋無脊椎動物にも広く使用されています。^[6]調製方法は、ピクリン酸飽和水溶液 75 ml、ホルマリン 40% 水溶液 25 ml、氷酢酸 5 ml です。^[7]

バリエーション

ジェンダーソリューション

ジャンドル溶液はブアン溶液のアルコール版である。この溶液を作る際には、ピクリン酸飽和水溶液の代わりにピクリン酸飽和アルコール溶液を使用する。この溶液は、組織中のグリコーゲンやその他の炭水化物を保存する必要がある場合に有用である。この溶液は、95% エタノール中のピクリン酸飽和溶液 (80 ml) とホルマリン (37-40% ホルムアルデヒド) (15 ml) および氷酢酸 (5 ml) を混合して作る。^[8]ジャンドルの固定液にはブアンの固定液よりも多くのピクリン酸が含まれている。これは、エタノールへの溶解度 (6.23%w/v) が水への溶解度 (1.23%w/v) よりも高いためである。^[9]

オランドの解決策

オランド液はブアン液の一種で、酢酸銅が含まれています。酢酸銅は赤血球膜と好酸球および内分泌細胞の顆粒を安定化させるため、通常のブアン液よりもこれらの細胞成分の溶解が少なくなります。^[10]オランド固定液は、酢酸銅6.25g、ピクリン酸（湿潤粉末）10g、ホルマリン（37〜40%ホルムアルデヒド）25ml、氷酢酸（100%）2.5mlを水250mlに加えて作られます。^[11]

参考文献

^ カーソン、フリーダ L.; フラディク、クリスタ (2009)。『組織技術：自己指導テキスト』（第 3 版）。香港：アメリカ臨床病理学会出版局。p. 19。ISBN 978-0-89189-581-7。
^ Culling, CFA 1974. 組織病理学および組織化学技術ハンドブック（博物館技術を含む）、第3版。ロンドン：バターワース、p.49。
^ Bancroft, John D.; Gamble, Marilyn 編 (2008)。組織学技術の理論と実践(第 6 版)。中国: Churchill Livingstone Elsevier。p. 72。ISBN 978-0-443-10279-0。
^ ベイカー、JR 1958. 生物学的マイクロテクニックの原理。ロンドン、メシューエン、pp.149-150。
^ Kiernan, JA 2015 組織学的および組織化学的方法。理論と実践。バンバリー、イギリス：Scion、p.195。
^ リンカーン、ロジャー J.; シールズ、ジョンゴードン、編 (1979)。無脊椎動物 - 収集と保存(第 1 版)。英国: 大英博物館 (自然史)。p. 128。ISBN 0-521-296773。
^ Culling, CFA 1974. 組織病理学および組織化学技術ハンドブック（博物館技術を含む）、第3版。ロンドン：バターワース、p.49。
^ Culling, CFA 1974. 組織病理学および組織化学技術ハンドブック（博物館技術を含む）、第3版。ロンドン：バターワース、p.49。
^ Dean, JA 1973. Lange's Handbook of Chemistry、第11版。ニューヨーク：McGraw-Hill、p.7-383。
^ カーソン、フリーダ L.; フラディク、クリスタ (2009)。『組織技術：自己指導テキスト』（第 3 版）。香港：アメリカ臨床病理学会出版局。p. 19。ISBN 978-0-89189-581-7。
^ Gray, P. 1954. The Microtomist's Formulary and Guide. 1975年に再版。ハンティントン、ニューヨーク：Kreiger、p.220。

[1] カーソン、フリーダ L.; フラディク、クリスタ (2009)。『組織技術：自己指導テキスト』（第 3 版）。香港：アメリカ臨床病理学会出版局。p. 19。ISBN 978-0-89189-581-7。

[2] Culling, CFA 1974. 組織病理学および組織化学技術ハンドブック（博物館技術を含む）、第3版。ロンドン：バターワース、p.49。

[3] Bancroft, John D.; Gamble, Marilyn 編 (2008)。組織学技術の理論と実践(第 6 版)。中国: Churchill Livingstone Elsevier。p. 72。ISBN 978-0-443-10279-0。

[4] ベイカー、JR 1958. 生物学的マイクロテクニックの原理。ロンドン、メシューエン、pp.149-150。

[5] Kiernan, JA 2015 組織学的および組織化学的方法。理論と実践。バンバリー、イギリス：Scion、p.195。

[6] リンカーン、ロジャー J.; シールズ、ジョンゴードン、編 (1979)。無脊椎動物 - 収集と保存(第 1 版)。英国: 大英博物館 (自然史)。p. 128。ISBN 0-521-296773。

[7] Culling, CFA 1974. 組織病理学および組織化学技術ハンドブック（博物館技術を含む）、第3版。ロンドン：バターワース、p.49。

[8] Culling, CFA 1974. 組織病理学および組織化学技術ハンドブック（博物館技術を含む）、第3版。ロンドン：バターワース、p.49。

[9] Dean, JA 1973. Lange's Handbook of Chemistry、第11版。ニューヨーク：McGraw-Hill、p.7-383。

[10] カーソン、フリーダ L.; フラディク、クリスタ (2009)。『組織技術：自己指導テキスト』（第 3 版）。香港：アメリカ臨床病理学会出版局。p. 19。ISBN 978-0-89189-581-7。

[11] Gray, P. 1954. The Microtomist's Formulary and Guide. 1975年に再版。ハンティントン、ニューヨーク：Kreiger、p.220。