Loading article…
TBEまたはTris/Borate/EDTA は、トリス塩基、ホウ酸、およびEDTAの混合物を含む緩衝液です。
分子生物学では、TBE 緩衝液とTAE緩衝液は核酸が関係する手順でよく使用され、最も一般的なものは電気泳動です。トリス酸溶液は、 DNA を脱プロトン化して水に溶けやすい状態に保つ、わずかに塩基性の条件に効果的な緩衝液です。EDTA は、特にマグネシウム(Mg 2+ )の二価カチオンに対するキレート剤です。これらのイオンは、汚染ヌクレアーゼを含む多くの酵素に必要な補因子であるため、EDTA の役割は、核酸を酵素分解から保護することです。しかし、Mg 2+は制限酵素やDNA ポリメラーゼなどの多くの有用な DNA 修飾酵素の補因子でもあるため、TBE 緩衝液または TAE 緩衝液中の Mg 2+ の濃度は、通常低く保たれます (通常は約 1 mM )。
最近では、電気泳動用のTBEおよびTAE緩衝液の代替品が発見され、利用可能となっている。[1]
レシピ(5倍濃縮液1リットル)
- トリス塩基(CAS番号77-86-1、遊離塩基)54g
- ホウ酸27.5 g (CAS番号 10043-35-3)
- 0.5 M EDTA (CAS番号60-00-4) 20 ml (pH 8.0)
HClでpHを8.3に調整する。[2]
TBE は電気泳動に使用する前に 1 倍に希釈できますが、0.5 倍でも問題ありません。濃度が高いと、過剰な熱発生により結果が悪くなります。
