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細胞生物学において、細胞分画とは、細胞成分を分離するプロセスであり、各成分の個々の機能を保持します。[1]これはもともと、さまざまな生化学プロセスの細胞内位置を示すために使用された方法です。細胞内分画の他の用途は、さらなる精製のための濃縮タンパク質源を提供することと、さまざまな疾患状態の診断を容易にすることです。[2]
均質化
組織は通常、浸透圧による損傷を防ぐために等張性の緩衝液で均質化されます。均質化のメカニズムには、粉砕、ミンチ、チョッピング、圧力変化、浸透圧ショック、凍結融解、超音波などがあります。その後、サンプルは酵素による損傷を防ぐために冷やされます。均質な細胞塊（細胞ホモジェネートまたは細胞懸濁液）の形成です。適切な培地で、適切な pH、イオン組成、温度の特定の酵素の存在下で細胞を粉砕します。たとえば、植物細胞の 中間層を消化するペクチナーゼなどです。
濾過
このステップは、細胞の供給源によっては必要ない場合もあります。ただし、動物組織は結合組織を生じる可能性があり、これを除去する必要が生じます。一般的に、濾過はガーゼを通して行うか、吸引フィルターと適切なグレードのセラミックフィルターを使用して行います。
精製
精製は分画遠心分離によって行われます。重力が連続的に増加すると、密度に応じて細胞小器官が連続的に分離されます。
参照
密度による細胞分離用培地:
参考文献
- ^ Alberts, B; Johnson, A (2002). 細胞の分画。細胞の分子生物学。第4版。
- ^ Ninfa, Alexander J. (2010).生化学とバイオテクノロジーのための基礎実験アプローチ。アメリカ合衆国: John Wiley & Sons, INC. p. 209. ISBN 978-0-470-08766-4。