サルコウスキーのテスト

サルコウスキー試験の手順には、ステロールを検査するサンプルと、サルコウスキー試薬となるクロロホルムと濃硫酸が必要です。通常、クロロホルムとサンプルの溶液を最初に調製し、その後濃硫酸（VI）で処理します。その後、溶液全体をよく振とうする必要があります。^{[ 2 ] [ 6 ]}試験手順中に脱水反応が起こるため、乾燥したガラス器具のみを使用することが重要です。 ^{[ 7 ]}

この定性化学試験で陽性反応を示した溶液は、試験管内で2つの異なる層を形成します。上層（クロロホルム）は青みがかった赤色から紫色に変化し、硫酸の層は黄色から緑色に変化し、緑色の光沢が見られます。サンプルにコレステロールやその他のステロールが含まれていない場合、試験溶液の色は変化せず、元の色を維持します。^{[ 2 ] [ 8 ] [ 9 ]}

サルコウスキー試験は、インドール（トリプトファンを含むタンパク質の分解産物である結晶性アルカロイド^{[ 10 ]} ）の存在を調べるためにも使用できます。このような場合、サンプルを硝酸と2%亜硝酸カリウム溶液で処理し、赤色の出現によって陽性反応を示します。^{[ 11 ]}

ステロールを含む試料溶液をクロロホルムと吸湿性の高い硫酸で処理すると、脱水反応（2つのコレステロール分子から2つの水分子が除去される）と新しい二重結合の形成が起こります。化学反応中に2つのステロールが結合してビステロール（ビステロイド）が形成されます。コレステロールの場合は、ビコレスタジエン（2つの二重結合を持つ二重コレステイン）です。溶液の赤色は、硫酸がビコレスタジエンをスルホン化した生成物であるビコレスタジエンのビスルホン酸によるものです。^{[ 12 ] [ 13 ]}