プロテインL

タンパク質L b1ドメイン
マウスFabの軽鎖に結合するタンパク質Lの構造（PDB：1MHH ​）。[1]
識別子
シンボル	人々
パム	PF02246
インタープロ	著作権
SCOP2	1MHH / スコープ / SUPFAM
利用可能なタンパク質構造: パム   構造 / ECOD   電子データ RCSB PDB; PDBe; PDBj PDBサム 構造の概要 電子データ 1mhh ​、1xcq ​、1xct ​、1hez ​、1ynt ​、1xf5 ​、1ymh ​、1k52 ​、1k50 ​、1hz5 ​、1hz6 ​、1k51 ​、1k53 ​、2ptl ​、2jzp ​、2kac ​、1jml ​、1kh0

プロテインLは、細菌種ペプトストレプトコッカス・マグナスの表面から最初に単離され、L鎖相互作用を介して免疫グロブリンに結合することがわかり、そこから名前が付けられました。^[2] 719個のアミノ酸残基で構成されています。^[3]ペプトストレプトコッカス・マグナスの細胞壁から精製されたプロテインLの分子量は、還元剤2-メルカプトエタノール存在下でのSDS-PAGEによって最初に95kDと推定され、6 MグアニジンHCl存在下でのゲルクロマトグラフィーによって分子量が76kDと決定されました。プロテインLには鎖間ジスルフィドループが含まれておらず、ジスルフィド結合サブユニットも含まれていません。pIが4.0の酸性分子です。^{[4]免疫グロブリン（}抗体）のFc領域に結合するプロテインAやプロテインGとは異なり、プロテインLは軽鎖相互作用を介して抗体に結合します。重鎖のどの部分も結合相互作用に関与しないため、プロテイン L はプロテイン A や G よりも広範囲の抗体クラスに結合します。プロテイン L は、IgG、IgM、IgA、IgE、IgDを含むすべての抗体クラスの代表に結合します。単鎖可変フラグメント ( scFv ) と Fab フラグメントもプロテイン L に結合します。

この広い結合範囲にもかかわらず、プロテインLは普遍的な抗体結合タンパク質ではありません。プロテインLの結合は、κ軽鎖を含む抗体に限定されています。ヒトとマウスでは、ほとんどの抗体分子はκ軽鎖を含み、残りはλ軽鎖を含みます。プロテインLは、κ軽鎖の特定のサブタイプに結合する場合にのみ有効です。たとえば、ヒトのVκI、VκIII、VκIVサブタイプには結合しますが、VκIIサブタイプには結合しません。マウス免疫グロブリンの結合は、VκI軽鎖を持つものに限定されています。^[5]

効果的な結合のためのこれらの特定の要件を考慮すると、固定化プロテイン L の主な用途は、κ 軽鎖を持つことが知られている腹水または細胞培養上清からのモノクローナル抗体の精製です。プロテイン L は、血清サプリメントとして培地中に存在することが多いウシ免疫グロブリンに結合しないため、培養上清からの VLκ 含有モノクローナル抗体の精製に非常に役立ちます。また、プロテイン L は抗体の抗原結合部位を妨害しないため、IgM を使用した免疫沈降アッセイにも役立ちます。

タンパク質 L の遺伝子には、18 個のアミノ酸からなるシグナル配列、 79 個の残基からなるNH2 末端領域 (「A」)、それぞれ 72 ～ 76 個のアミノ酸からなる 5 つの相同「B」リピート、2 つの追加「C」リピート (それぞれ 52 個のアミノ酸) からなる COOH 末端領域、C リピートの後の親水性でプロリンに富む推定細胞壁貫通領域 (「W」)、疎水性膜アンカー (「M」) の 5 つの構成要素が含まれています。B リピート (36kD) は、Ig 軽鎖との相互作用に関与していることが判明しました。^[2]

プロテイン L に加えて、プロテイン A、プロテイン G、プロテイン A/Gなどの他の免疫グロブリン結合細菌タンパク質も、免疫グロブリンの精製、固定化、または検出によく使用されます。これらの免疫グロブリン結合タンパク質はそれぞれ、認識される抗体の部分と、結合する抗体の種とタイプに関して、異なる抗体結合プロファイルを持っています。