オキシダーゼ試験

オキシダーゼ試験は、生物がシトクロムcオキシダーゼ酵素を持っているかどうかを判断するために使用されます。この試験は、ナイセリア、モラクセラ、カンピロバクター、パスツレラ属（オキシダーゼ陽性）の区別を補助するために使用されます。また、シュードモナス属と関連種を区別するためにも使用されます。^[1]

菌株はオキシダーゼ陽性 (OX+) またはオキシダーゼ陰性 (OX-) のいずれかになります。

OX+ は通常、細菌がシトクロム c オキシダーゼ (複合体 IV とも呼ばれる) を含み、電子伝達系でO _{2 を}H ₂ O ₂または H ₂ Oに変換することで酸素をエネルギー生成に使用できることを意味します。

Pseudomonadaceae科は典型的にはOX+である。^[1]

グラム陰性 双球菌である ナイセリアとモラクセラはオキシダーゼ陽性である。^[2]

グラム陰性の螺旋状に湾曲した桿菌の多くはオキシダーゼ陽性でもあり、これにはヘリコバクター・ピロリ、コレラ菌、カンピロバクター・ジェジュニが含まれます。

レジオネラ・ニューモフィラはオキシダーゼ陽性である可能性がある。 ^[3]

OX− は通常、細菌にシトクロム c オキシダーゼが含まれず、そのため電子伝達系によるエネルギー生成に酸素を使用できないか、または電子を酸素に伝達するために別のシトクロムを使用することを意味します。

腸内細菌科は典型的にはOX−である。^[4]

この検査では、N,N,N′,N′-テトラメチル-p-フェニレンジアミン、TMPD（またはN,N-ジメチル-p-フェニレンジアミン、DMPD、これも酸化還元指示薬である）などの試薬を染み込ませたディスクを使用する。この試薬は、酸化されると濃い青から栗色になり、還元されると無色になる。酸化酵素陽性細菌は、シトクロム酸化酵素またはインドフェノール酸化酵素（鉄含有ヘムタンパク質）を有する。^[5]これらは両方とも、供与化合物（NADH）から電子受容体（通常は酸素）への電子の輸送を触媒する。検査試薬TMPDは、酵素酸化酵素の人工電子供与体として働く。酸化された試薬は、有色の化合物インドフェノールブルーを形成する。シトクロム系は通常、酸素を最終電子受容体として使用できる好気性生物にのみ存在する。この代謝の最終生成物は、水または過酸化水素（カタラーゼにより分解）である。^[1]

1. 各ディスクを、脱イオン水の接種ループ約 4 つで湿らせます。
2. ループを使用して、大量の純粋な細菌を無菌的にディスクに移します。
3. ディスクを最大 3 分間観察します。接種した部分が濃い青から栗色、ほぼ黒に変色した場合、結果は陽性です。3 分以内に色の変化が見られない場合、結果は陰性です。

代替方法として、トリプチケース大豆寒天培地で培養された生きた細菌は、単線接種による滅菌技術を使用して調製できます。接種された培地は、コロニーを形成するために 37 °C で 24 ～ 48 時間培養されます。新鮮な細菌調製物を使用する必要があります。培地上でコロニーが成長した後、試験する各微生物の表面に試薬 DMPD を 2 ～ 3 滴加えます。

• 陽性反応（OX+）の場合は、10～30 秒以内に色が紫色に変わります。
• 陰性検査（OX-）の場合は、淡いピンク色になるか、または着色が見られません。

• アメリカ微生物学会、オキシダーゼ試験プロトコル。2013年。ASM MicrobeLibrary、1～9。
• Cheng WJ, Lin CW, Wu TG, Su CS, Hsieh M S. 2013. 酸素飽和静脈血サンプルを用いた毛細血管血測定用グルコースオキシダーゼベース試験紙の較正。Clinica Chimica Acta. 415, 152–157。
• Corchia L、Hubault R、Quinquenel B、N'Guyen。2015。免疫不全宿主における動物飛沫の直接接種後に発生する、Pasteurella Multocida による急速進行性結膜炎。BMC Ophthalmology 15.1、21。
• Floch C, Alarcon-Gutiérrez E, Criquet S. 2007.土壌中のフェノールオキシダーゼ活性のABTSアッセイ。Journal of Microbiological Methods。71、319–324。
• Gaby WL、Hadley C. 1957. Pseudomonas aeruginosa の同定のための実用的な実験室検査。細菌学ジャーナル 74、356-358。
• Gilani M, Munir T, Latif M, Gilani M, Rehman S, Ansari M, Hafeez A, Najeeb S, Saad N. 2015. E-テストによるPseudomonas AeruginosaおよびAcinetobacter Baumanniiに対するDoripenemのin vitro有効性。パキスタン内科外科大学ジャーナル25、726-729。
• Kuss S, Tanner EEL, Ordovas-Montanes M, Compton R G. 2017. ','-テトラメチルフェニレンジアミン (TMPD) を使用した好気性菌/嫌気性菌におけるシトクロム C 発現の電気化学的認識および定量化。Chemical Science 8.11, 7682–7688. Web。
• Ivanova NV、Zemlak TS、Hanner RH、Hebert PD N. 2007.魚類DNAバーコーディング用ユニバーサルプライマーカクテル。分子生態学ノート。7、544-54。
• プリンスC. 2009. 医療微生物学実用マニュアル（ジェイピーブラザーズメディカルパブリッシャーズ（P）リミテッド）112–112。
• Shields P、Cathcart L. 2013. オキシダーゼ試験プロトコル - ライブラリ。アメリカ微生物学会、ASM MicrobeLibrary、1–5。
• Steel K J. 1961. 分類ツールとしての酸化酵素反応。一般微生物学ジャーナル。25、297-306。
• Zanderigo F et al. 2018. [11C]ハルミンの脳モノアミン酸化酵素Aへの結合：再テスト特性と非侵襲的定量化。分子イメージングと生物学。20、667–681。

• オキシダーゼテストビデオ
• オキシダーゼ試験手順