ネガティブ染色

顕微鏡検査において、ネガティブ染色は確立された方法であり、診断顕微鏡検査でよく使用され、薄い標本を光学的に 不透明な 液体と対比させます。この技術では、背景が染色され、実際の標本はそのまま残されるため、目に見えるようになります。これは、実際の標本が染色される ポジティブ染色とは対照的です。

明視野顕微鏡では、ネガティブ染色は通常、ニグロシンや墨汁などの黒インク液を使用して行われます。スライドガラスに広げられた湿った細菌培養物などの標本をネガティブ染色液と混ぜて乾燥させます。顕微鏡で見ると、細菌細胞、そしておそらくその胞子が暗い周囲の背景に対して明るく見えます。ネガティブ染色液を入れるために、通常の防水マーカーペンを使用する代替方法が開発されています。^[1]

透過型電子顕微鏡の場合、電子の不透明度は原子番号、すなわち陽子の数に関係する。適切なネガティブ染色剤には、モリブデン酸アンモニウム、酢酸ウラニル、ギ酸ウラニル、リンタングステン酸、四酸化オスミウム、フェリシアン化オスミウム^{[要説明] [2]、}および金グルコチオネートなどがある。これらは電子を強力に散乱させ、生物物質によく吸着するという理由で選ばれている。ネガティブ染色できる構造は、光学顕微鏡で研究するものよりもはるかに小さい。ここでは、この方法は、ウイルス、細菌、細菌鞭毛、生体膜構造、およびタンパク質またはタンパク質凝集体を観察するために使用されるが、これらはすべて電子散乱力が低い。四酸化オスミウムやフェリシアン化オスミウムなどの一部の染色剤は、化学的に非常に活性である。強力な酸化剤として、主に不飽和炭素-炭素結合と反応して脂質を架橋し、それによって組織サンプル中の生体膜を固定すると同時に染色します。^{[3] [4]}

電子顕微鏡検査におけるネガティブ染色の選択は、非常に重要になる場合があります。病気の植物から採取したネガティブ染色葉浸漬液を使用した植物ウイルスの初期の研究では、1 つの染色では球状ウイルスのみが、もう 1 つの染色では桿状ウイルスのみが示されました。検証された結論は、この植物は 2 つの異なるウイルスによる混合感染に苦しんでいたというものでした。光学顕微鏡レベルと電子顕微鏡レベルのネガティブ染色は、厳格な安全対策を講じない限り、感染性生物に対して決して行ってはなりません。ネガティブ染色は通常、非常に穏やかな準備方法であるため、オペレーターの感染の可能性は低減しません。

ネガティブ染色透過型電子顕微鏡法は、ラメラ リポソーム（le）、反転球状ミセル（M）、反転六方晶HII円筒状（H）相などの水性脂質凝集体の研究と同定にも効果的に利用されている（図参照）。^[5]

• 「初心者のためのネガティブ染色」。2009 年 6 月 6 日閲覧。
• 「ネガティブ染色」。2012年12月25日時点のオリジナルよりアーカイブ。 2009年6月6日閲覧。