エルマン試薬

エルマン試薬^[1]
名前
	推奨されるIUPAC名 5,5′-ジスルファンジイルビス(2-ニトロ安息香酸)
	その他の名前 3,3′-ジスルファンジイルビス(6-ニトロ安息香酸) ; 5-(3-カルボキシ-4-ニトロフェニル)ジスルファニル-2-ニトロ安息香酸; ジチオニトロ安息香酸; 5,5′-ジチオビス(2-ニトロ安息香酸)
識別子
CAS番号	69-78-3 ;
3Dモデル（JSmol）	インタラクティブ画像;
略語	DTNB
チェビ	チェビ:86228 ;
チェムBL	チェムBL395814 ;
ケムスパイダー	6018 ;
ECHA 情報カード	100.000.650
EC番号	200-714-4;
パブケム CID	6254;
ユニ	9BZQ3U62JX ;
CompTox ダッシュボード ( EPA )	ＤＴＸＳＩＤ５０５８７７９;
	InChI InChI=1S/C14H8N2O8S2/c17-13(18)9-5-7(1-3-11(9)15(21)22)25-26-8-2-4-12(16(23)24) 10(6-8)14(19)20/h1-6H,(H,17,18)(H,19,20) キー: KIUMMUBSPKGMOY-UHFFFAOYSA-N ; InChI=1/C14H8N2O8S2/c17-13(18)9-5-7(1-3-11(9)15(21)22)25-26-8-2-4-12(16(23)24) 10(6-8)14(19)20/h1-6H,(H,17,18)(H,19,20) キー: KIUMMUBSPKGMOY-UHFFFAOYAD;
	笑顔 c1cc(c(cc1SSc2ccc(c(c2)C(=O)O)[N+](=O)[O-])C(=O)O)[N+](=O)[O-];
プロパティ
化学式	Ｃ１４Ｈ８Ｎ２Ｏ８Ｓ２
モル質量	396.34 グラムモル−1
融点	240～245℃（464～473℉、513～518K）（分解）
危険
	GHSラベル:
ピクトグラム
シグナルワード	警告
危険有害性情報	H315、H319、H335
注意事項	P261、P264、P271、P280、P302+P352 、P304 + P340 、P305+P351+P338、P312、P321、P332+P313、P337+P313、P362、P403+P233、P405、P501
	特に記載がない限り、データは標準状態（25 °C [77 °F]、100 kPa）の材料に関するものです。確認する（何ですか？）インフォボックス参照

エルマン試薬（5,5′-ジチオビス-（2-ニトロ安息香酸）またはDTNB）は、サンプル中のチオール基の数または濃度を定量化するために使用される発色性化学物質です。 ^[3] ジョージ・L・エルマンによって開発されました。

準備

エルマンの原著論文^[3]では、 2-ニトロ-5-クロロベンズアルデヒドをカルボン酸に酸化し、硫化ナトリウムを介してチオールを導入し、ヨウ素で酸化してモノマーをカップリングすることでこの試薬を調製しました。今日では、この試薬は市販されています。

エルマンテスト

チオールはこの化合物と反応し、ジスルフィド結合を切断して2-ニトロ-5-チオベンゾエート (TNB ⁻ ) を生成します。これは中性およびアルカリ性 pH の水中でTNB ^{2−ジアニオンにイオン化します。この TNB}²⁻イオンは黄色です。

DTNB とチオール (R-SH) の反応。

この反応は迅速かつ化学量論的であり、1 モルのチオールを加えると 1 モルの TNB が放出される。TNB ^{2− は}、分光光度計で412 nm の可視光の吸光度を測定することで定量され、希釈緩衝溶液の場合は14,150 M ⁻¹ cm ^−1の吸光係数を使用し、 ^[4]^{[5] 、6 M}グアニジニウム塩酸塩や 8 M 尿素などの高塩濃度の場合は13,700 M ⁻¹ cm ⁻¹の係数を使用する。 ^[5] Ellman の 1959 年の元の出版物では、モル吸光度は 13,600 M ⁻¹ cm ⁻¹と推定されており、この値は、測定法が改善されたにもかかわらず、この方法のいくつかの現代的な応用で見られる。 [6]市販の DTNB は完全に純粋ではない可能性があるため、完全に正確で再現性のある結果を得るには再結晶化が必要になる場合がある。 ^[5^]

エルマン試薬は、純粋な溶液や血液などの生物学的サンプル中のグルタチオンなどの低分子量チオールを測定するために使用できます。 ^[7]また、タンパク質上のチオール基の数を測定することもできます。^[7]

参考文献

^ 5,5′-ジチオビス(2-ニトロ安息香酸)、Sigma-Aldrich
^ 「5,5'-ジチオビス（2-ニトロ安息香酸）」. pubchem.ncbi.nlm.nih.gov . 2021年12月13日閲覧。
^ ab Ellman GL (1959). 「組織のスルフヒドリル基」Arch. Biochem. Biophys . 82 (1): 70–7. doi :10.1016/0003-9861(59)90090-6. PMID 13650640.
^ Collier HB (1973). 「レター：還元型エルマン試薬、3-カルボキシラト-4-ニトロチオフェノレートのモル吸光係数に関する注記」。Anal . Biochem . 56 (1): 310–1. doi :10.1016/0003-2697(73)90196-6. PMID 4764694。
^ abc Riddles PW、 Blakeley RL、Zerner B (1983)。「エルマン試薬の再評価」酵素構造パートI。酵素学の方法。第91巻。pp.49-60。doi :10.1016 / S0076-6879(83)91010-8。ISBN 978-0-12-181991-0. PMID 6855597。
^ Riener CK、Kada G 、Gruber HJ (2002)。「エルマン試薬と4,4'-ジチオジピリジンによるタンパク質スルフヒドリルの迅速測定」。Anal Bioanal Chem。373 ( 4–5): 266–76。doi : 10.1007 /s00216-002-1347-2。PMID 12110978。S2CID 30366479。
^ ab Riener, Christian K.; Kada, Gerald; Gruber, Hermann J. (2002-07-01). 「エルマン試薬および4,4′-ジチオジピリジンによるタンパク質スルフヒドリルの迅速測定」.分析および生物分析化学. 373 (4–5): 266–276. doi :10.1007/s00216-002-1347-2. ISSN 1618-2642. PMID 12110978. S2CID 30366479.

外部リンク

スルフィドリルの定量 DTNB、エルマン試薬（不正確な吸光係数を使用）

[1] 5,5′-ジチオビス(2-ニトロ安息香酸)、Sigma-Aldrich

[2] 「5,5'-ジチオビス（2-ニトロ安息香酸）」. pubchem.ncbi.nlm.nih.gov . 2021年12月13日閲覧。

[ellman-3] Ellman GL (1959). 「組織のスルフヒドリル基」Arch. Biochem. Biophys . 82 (1): 70–7. doi :10.1016/0003-9861(59)90090-6. PMID 13650640.

[4] Collier HB (1973). 「レター：還元型エルマン試薬、3-カルボキシラト-4-ニトロチオフェノレートのモル吸光係数に関する注記」。Anal . Biochem . 56 (1): 310–1. doi :10.1016/0003-2697(73)90196-6. PMID 4764694。

[Riddles-5] Riddles PW、 Blakeley RL、Zerner B (1983)。「エルマン試薬の再評価」酵素構造パートI。酵素学の方法。第91巻。pp.49-60。doi :10.1016 / S0076-6879(83)91010-8。ISBN 978-0-12-181991-0. PMID 6855597。

[Riener-6] ^ Riener CK、Kada G 、Gruber HJ (2002)。「エルマン試薬と4,4'-ジチオジピリジンによるタンパク質スルフヒドリルの迅速測定」。Anal Bioanal Chem。373 ( 4–5): 266–76。doi : 10.1007 /s00216-002-1347-2。PMID 12110978。S2CID 30366479。

[:0-7] Riener, Christian K.; Kada, Gerald; Gruber, Hermann J. (2002-07-01). 「エルマン試薬および4,4′-ジチオジピリジンによるタンパク質スルフヒドリルの迅速測定」.分析および生物分析化学. 373 (4–5): 266–276. doi :10.1007/s00216-002-1347-2. ISSN 1618-2642. PMID 12110978. S2CID 30366479.

準備

エルマンテスト

参考文献

外部リンク

関連するトピック

推奨されるIUPAC名

CAS番号

JSmol

チェビ