走化性アッセイ

走化性アッセイは、原核細胞または真核細胞の走化性能力を評価するための実験ツールです。これまでに様々な手法が開発されてきました。定性的な手法では、研究者が細胞の分析対象物質に対する走化性親和性を概算的に判断できますが、定量的な手法では、この親和性を正確に測定できます。

一般的に、最も重要な要件は、アッセイのインキュベーション時間を、評価対象となるモデル細胞とリガンドの両方に合わせて調整することです。インキュベーション時間が短すぎるとサンプル中に細胞が全く検出されず、長すぎると濃度勾配が乱れ、走化性反応よりも化学運動性反応が強く測定されてしまいます。

最も一般的に使用されている手法は、大きく2つのグループに分類されます。

この評価方法は、実験前に作製した寒天またはゼラチンを含む半固体層を扱う。層に小さなウェルを切り込み、細胞と試験物質を充填する。細胞は、半固体層内または層の下の化学勾配に向かって移動する可能性がある。この技術のいくつかのバリエーションでは、実験開始時に切断されたウェルと平行チャネルも扱う（PP技術）。PP技術の放射状配置（3つ以上のチャネル）により、異なる細胞集団の走化性活性を比較したり、リガンド間の選択性を研究したりすることが可能になる。^{[ 1 ]}

細胞の計数：陽性反応を示す細胞は、染色後または生体内の条件下で、光学顕微鏡を用いて、遊走細胞の先端から計数することができる。

上記で最も一般的に用いられている2つの手法以外にも、走化性活性を測定するための様々なプロトコルが開発されてきた。その中には、凝集試験のように定性的なものもあり、その場合は小さな寒天片やフィルターをスライドガラス上に置き、その周囲に集まる細胞の数を測定する。

別の半定量的手法では、細胞を試験物質の上に重ね、培養時間中に元々細胞のない区画の乳白色の変化を記録する。 ^{[ 7 ]}

3番目によく使われる定性的な手法は、T字迷路とそのマイクロプレートへの応用です。オリジナルの方法では、ペグに穴を開けた容器に細胞を入れます。次にペグをひねると、細胞は異なる物質が入った他の2つの容器と接触します。ペグを元に戻すと培養が停止し、容器内の細胞数が数えられます。^{[ 8 ]}

また、近年では、走化性を定量的かつ正確にテストするために、マイクロ流体デバイスがますます頻繁に使用されるようになっている。^{[ 9 ] [ 10 ] [ 11 ]}

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