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シェーファー・フルトン染色法は、存在する内生胞子を緑色に、その他の細菌体を赤色に染色することで内生胞子を分離するように設計された技術である。 [ 1 ]主染色剤はマラカイトグリーンで、対比染色剤はサフラニンであり、その他の細菌体を赤色に染色する。
内生胞子は、その細胞壁がほぼ全ての化学物質に対して不透過性であるため、通常の染色法では染色できません。シェーファー・フルトン内生胞子染色法は、加熱によって主染色剤(マラカイトグリーン)を内生胞子内部に浸透させます。冷却後、スライドを水で脱色し、サフラニンで対比染色します。
無菌操作を用いて、細菌をスライドガラス上に置き、加熱固定する。次に、スライドガラスを多孔質の紙で覆った状態で水浴上に吊るし、蒸気で加熱する。スライドガラスにマラカイトグリーンを塗布すると、内生胞子の硬い壁を透過して緑色に染色される。5分後、スライドガラスを蒸気から外し、ペーパータオルを取り除く。冷却後、スライドガラスを30秒間水ですすぐ。次に、希釈したサフラニンで2分間染色する。サフラニンは、他のほとんどの微生物を赤色またはピンク色に染色する。その後、スライドガラスを再度すすぎ、吸水性の紙で水分を吸い取る。[ 2 ]
乾燥後、スライドは光学顕微鏡で観察することができる。
この方法は、1930年代にミドルベリー大学の微生物学者であるアリス・B・シェーファーとマクドナルド・フルトンによって考案されました。この方法は、1900年代の2人の細菌学者にちなんで、ヴィルツ・コンクリン法とも呼ばれています。[ 2 ]