放射免疫測定

放射免疫測定
放射免疫測定
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放射免疫測定法( RIA ) は、放射性標識分子を使用して段階的に免疫複合体を形成する免疫測定法です。 RIA は、物質の濃度を測定するために使用される非常に感度の高いin vitroアッセイ技術で、通常は抗体を使用して抗原濃度 ( たとえば、血中のホルモン濃度) を測定します。

RIA 技術は極めて感度が高く、極めて特異的であり、特殊な装置を必要とするものの、このような測定を実行する方法の中で最も安価な方法の 1 つです。放射性物質が使用されるため、特別な注意とライセンスが必要です。^[要出典]

対照的に、免疫放射測定法(IRMA) は、放射性標識分子を段階的ではなく即時に使用する免疫測定法です。

放射性アレルゲン吸着試験（RAST）は放射免疫測定法の一例です。これはアレルギーの原因となるアレルゲンを検出するために使用されます。

方法

従来、放射免疫測定法を実行するには、既知量の抗原を放射性にします。これは、多くの場合、 125-Iなどのヨウ素のガンマ放射性同位元素、またはチロシンに結合したトリチウム^{[1]で標識することによって行われます。この放射性標識抗原を、その抗原に対する既知量の}抗体と混合すると、結果として、2つは互いに特異的に結合します。次に、同じ抗原の量が不明な患者の血清サンプルを追加します。これにより、血清の非標識 (または「コールド」) 抗原が、抗体結合部位をめぐって放射性標識抗原 (「ホット」) と競合します。「コールド」抗原の濃度が増加すると、より多くの抗原が抗体に結合し、放射性標識変異体を置き換え、抗体に結合した放射性標識抗原と遊離放射性標識抗原の比率が低下します。次に、結合した抗原を分離し、上清に残っている遊離 (非結合) 抗原の放射能をガンマカウンターを使用して測定します。この値は標準化された検量線と比較され、患者の血清サンプル中の非標識抗原の濃度が算出されます。^[2] RIAは、高親和性の抗体を使用する場合、実験チューブ内の数ピコグラムの分析対象物を検出できます。^[1]

この方法は、原則としてあらゆる生物学的分子に使用でき、血清抗原に限定されず、捕捉された抗原を直接測定する代わりに遊離抗原を測定する間接的な方法を使用する必要もありません。たとえば、関心のある抗原または標的分子を放射標識することが望ましくない、または不可能な場合、標的を認識する 2 つの異なる抗体が利用可能であり、標的が抗体に対して複数のエピトープを提示するのに十分な大きさ (たとえば、タンパク質) であれば、RIA を実行できます。一方の抗体は上記のように放射標識され、もう一方の抗体は変更されません。RIA は、「コールド」非標識抗体が溶液中の標的分子と相互作用して結合することから始まります。この非標識抗体は、アガロースビーズに結合したり、表面にコーティングしたりするなど、何らかの方法で固定化されるのが望ましいです。次に、「ホット」放射標識抗体が最初の抗体-標的分子複合体と相互作用します。徹底的に洗浄した後、結合した放射性抗体の直接量を測定し、同時に測定した参照量と比較して標的分子の量を定量する。この方法は、原理的には非放射性サンドイッチELISA法に似ている。^[3]

歴史

この方法は、ニューヨークのブロンクスにある退役軍人局病院のソロモン・バーソンとロザリン・サスマン・ヤローによって開発された。 ^[4]^[5] この革命的な開発により、ヤロー博士は1977年にノーベル医学賞を受賞し、女性としては史上2人目となった。^[6]受賞スピーチで、ヤロー博士は「我々を取り巻く多くの問題を解決するためには、国民の半数の才能を失うわけにはいかない」と述べた。^{[7]ヤローは}、ロジャー・ギルマン、アンドリュー・シャリーとともにノーベル賞を共同受賞した。シャリーは「脳のペプチドホルモン生成」に関する研究で賞を受賞した。^[6]

参考文献

^ ab 「ラジオイムノアッセイ（RIA）」。PerkinElmer 。 2023年1月26日閲覧。
^ 「ラジオイムノアッセイ」。オントロジー検索。
^ スミス、ジョン (2006)。「タンパク質およびペプチドの溶液ラジオイムノアッセイ」。分子生物学の最新プロトコル。第10章: ユニット 10.24。doi :10.1002/0471142727.mb1024s74。PMID 18265372。S2CID 20458546 。
^ Berson, Solomon A., et al. 「ヒト被験者におけるインスリン-I 131 代謝: インスリン治療を受けた被験者の循環におけるインスリン結合グロブリンの実証」 The Journal of clinical research 35.2 (1956): 170-190。
^ Berson, Solomon A.、およびRosalyn S. Yalow。「インスリンとインスリン結合抗体の反応の定量的側面」臨床調査ジャーナル38.11（1959）：1996-2016。
^ ab 「1977年ノーベル生理学・医学賞」NobelPrize.org . 2020年10月13日閲覧。
^ ヴァーレ、エスリー・アン、プタチェク、グレッグ（2002年）。特許取得済みの女性：AZTからTVディナーまで：女性発明家とその画期的なアイデアの物語。ニューヨーク：ワイリー。99ページ。ISBN 0471023345。

放射免疫測定法の手順

外部リンク

米国国立医学図書館医学件名標目表(MeSH)における放射免疫測定
放射免疫測定法（RIA）

[perkinelmer-1] 「ラジオイムノアッセイ（RIA）」。PerkinElmer 。 2023年1月26日閲覧。

[2] 「ラジオイムノアッセイ」。オントロジー検索。

[3] スミス、ジョン (2006)。「タンパク質およびペプチドの溶液ラジオイムノアッセイ」。分子生物学の最新プロトコル。第10章: ユニット 10.24。doi :10.1002/0471142727.mb1024s74。PMID 18265372。S2CID 20458546 。

[4] Berson, Solomon A., et al. 「ヒト被験者におけるインスリン-I 131 代謝: インスリン治療を受けた被験者の循環におけるインスリン結合グロブリンの実証」 The Journal of clinical research 35.2 (1956): 170-190。

[5] Berson, Solomon A.、およびRosalyn S. Yalow。「インスリンとインスリン結合抗体の反応の定量的側面」臨床調査ジャーナル38.11（1959）：1996-2016。

[NobelPrize-6] 「1977年ノーベル生理学・医学賞」NobelPrize.org . 2020年10月13日閲覧。

[7] ヴァーレ、エスリー・アン、プタチェク、グレッグ（2002年）。特許取得済みの女性：AZTからTVディナーまで：女性発明家とその画期的なアイデアの物語。ニューヨーク：ワイリー。99ページ。ISBN 0471023345。