パルスチェイス分析

生化学および分子生物学において、パルスチェイス分析は、細胞を標識化合物（パルス）に連続的にさらし、次に同じ化合物を標識されていない形で（チェイス）さらすことによって、時間の経過とともに起こる細胞プロセスを調べる方法です。^[1]

選択された細胞または細胞群は、まず、研究対象の分子またはシステムに組み込まれるラベル付けされた化合物（パルス）にさらされます（パルスラベル付けも参照）。次に、化合物は代謝経路を経て、研究対象の生成物の合成に使用されます。たとえば、放射性ラベル付けされたロイシン（^{3 H-ロイシン）を}膵臓ベータ細​​胞群に供給すると、この細胞群はこのアミノ酸をインスリン合成に使用します。

標識化合物の導入後すぐに（通常は約 5 分ですが、実際に必要な時間は研究対象によって異なります）、同じだが標識のない物質（チェイス）が過剰に環境に導入されます。前の例に倣うと、インスリンの生成は継続しますが、パルス フェーズで導入された放射性ロイシンは含まれなくなり、放射性検出法を使用しても検出できなくなります。ただし、パルス期間中に生成された標識インスリンの動きは、細胞内で追跡できます。^[2]

この方法は、特定の細胞の活動を長期間にわたって測定するのに有用である。この方法は、タンパク質キナーゼC、ユビキチン、その他多くのタンパク質の研究に使用されてきた。この方法は、岡崎フラグメントの存在と機能を証明するためにも使用された。ジョージ・パラデは、放射性アミノ酸のパルスチェイスを使用して、分泌経路を解明した。^{[3] [4]}