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リポフェクタミンまたはリポフェクタミン2000は、 Invitrogen社が製造・販売する分子生物学および細胞生物学で使用される一般的なトランスフェクション 試薬です。[1]これは、リポフェクションによってRNA（mRNAおよびsiRNAを含む）またはプラスミドDNAをin vitro細胞培養物に導入する効率を高めるために使用されます。[1]リポフェクタミンには、水性環境でリポソームを形成できる脂質サブユニットが含まれており、DNAプラスミドなどのトランスフェクションペイロードを捕捉します。
リポフェクタミンは、DOSPA（2,3-ジオレオイルオキシ-N-[2(スペルミンカルボキサミド)エチル]-N,N-ジメチル-1-プロパニミニウムトリフルオロ酢酸）とDOPEの3:1混合物から構成され、[2]負に帯電した核酸分子と複合体を形成し、細胞膜の静電反発を克服できるようにします。[3]リポフェクタミンのカチオン性脂質分子は、中性共脂質（ヘルパー脂質）とともに配合されています。[3] DNAを含むリポソーム（表面が正に帯電）は、中性共脂質がリポソームと細胞膜の融合を媒介するため、生細胞の負に帯電した細胞膜と融合することができ、核酸カーゴ分子が複製または発現のために細胞質に入ることを可能にします。[3]
細胞がトランスジーンを発現するには、核酸が細胞の核に到達して転写を開始する必要があります。しかし、トランスフェクトされた遺伝物質はそもそも核に到達せず、送達プロセスのどこかで破壊される可能性があります。[3]分裂細胞では、物質は有糸分裂後に再構築中の核膜に閉じ込められて核に到達する可能性があります。[3]しかし、分裂していない細胞でも、研究によりリポフェクタミンはトランスフェクションの効率を向上させることが示されており、これはトランスフェクトされた遺伝物質が無傷の核膜に浸透するのをさらに助けることを示唆しています。[3]
このトランスフェクション法は、Yongliang Chu博士によって発明されました。[4]
参照
参考文献
- ^ ab Invitrogen (2012). 「リポフェクタミン 2000 試薬」
- ^ Yang, J., Huang, L. 血清耐性のためのカチオン性リポソーム-DNA複合体の時間依存的成熟。Gene Ther 5, 380–387 (1998). https://doi.org/10.1038/sj.gt.3300596
- ^ abcdef Dalby B、Cates S、 Harris A、Ohki EC、Tilkins ML、Price PJ、Ciccarone VC (2004 年 6 月)。「Lipofectamine 2000 試薬による高度なトランスフェクション: 一次ニューロン、siRNA、およびハイスループットアプリケーション」。方法。33 (2 ) : 95–103。doi :10.1016/j.ymeth.2003.11.023。PMID 15121163 。
- ^ 米国特許出願 US7479573B2、Yongliang Chu、Malouk Masoud および Gulliat Gebeyehu、「トランスフェクション試薬」、Life Technologies Corp および Invitrogen Group に譲渡
米国で有効な US7479573B2、Yongliang Chu、Malek Masoud および Gulliat Gebeyehu、「トランスフェクション試薬」、Life Technologies Corp および Invitrogen Group に譲渡