Loading article…
フレンチプレッシャーセルプレス、またはフレンチプレスは、高圧下で細胞を狭いバルブに通すことによって細胞の細胞膜を破壊するために生物学実験で使用される装置です。 [1]フレンチプレスは、葉緑体、動物組織のホモジネート、およびその他の生物学的粒子の崩壊にも使用できます。細胞核を乱さずに細胞壁を破壊することができます。フレンチプレスは、ワシントンのカーネギー研究所のチャールズ・ステイシー・フレンチによって発明されました。[2] プレスは、外部の油圧ポンプを使用して、液体サンプルを含む大きなシリンダー内のピストンを駆動します。次に、高圧のサンプルはニードルバルブを通過して押し出されます。サンプルがバルブを通過すると、流体はせん断応力と減圧を経験し、細胞破壊を引き起こします。フレンチプレスの主要コンポーネントは、サンプルの汚染を防ぐためにステンレス鋼で作られています。
フレンチプレスは、細菌やその他の微生物の弾力性のある細胞膜や細胞壁を破壊し、タンパク質やその他の細胞成分を分離するためによく使用されます。[3]フレンチプレスで細胞を破壊すると、多くのin vitro生化学アッセイに必要な「裏返しの」膜小胞が生成されます。通常、細胞は酵素活性を保つために使用前に一晩冷蔵されます。
このプレスの欠点としては、大量のサンプルを処理するのに適していないこと、また、アセンブリの重量が大きい (約 14 kg) ため操作がやや難しいことが挙げられます。もう 1 つの欠点は、入力細胞量に大きな細胞塊がない必要があることです。このため、前処理手順 (通常は超音波処理) が必要になります。処理前に細胞塊が除去されていない場合、バルブが詰まるため、処理を続行する前にユニットを徹底的に洗浄する必要があります。その結果、多くのタンパク質精製ラボでは、リゾチームと超音波処理を使用すれば、通常の細菌タンパク質発現には十分であることがわかりました。
超音波処理やボールミルなどの他の技術も、同様の目的の多くに利用されており、それぞれに長所と短所があります。たとえば、超音波処理は高いせん断力を発生させ、細胞のDNAを小さな断片に分解します。フレンチプレスでは、ピストン圧力を調整することでせん断力を慎重に調整できます。このプレスは最大せん断力のポイントを1回通過させるため、他の破壊方法で発生する繰り返しのせん断による繊細な生物学的構造への損傷が制限されます。[4]
参照
参考文献
- ^ Vanderheiden GJ、Fairchild AC、Jago GR (1970 年 5 月)。「フレンチプレッシャーセルで使用するための実験室用プレスの構築」。Appl Microbiol . 19 (5): 875–7. doi :10.1128/AEM.19.5.875-877.1970. PMC 376809. PMID 5422315 。
- ^ フォーク、ゴビンジー、C、デイビッド（2006年）。チャールズ・ステイシー・フレンチ。第88巻。米国科学アカデミー伝記回顧録。pp.62–89。
- ^ Fanelli, Alex (2016). 「アッセイ開発」2017年12月8日閲覧。
- ^ 「フランスの圧力セルの使用に関する重要な注意事項」。バード研究所。2010年7月30日時点のオリジナルよりアーカイブ。2009年11月13日閲覧。