TCEP

TCEP
名前
	推奨されるIUPAC名 3,3′,3′′-ホスファントリイルトリプロパン酸
	その他の名前 TCEP; トリス(2-カルボキシエチル)ホスフィン
識別子
CAS番号	51805-45-9（塩酸塩） ;
3Dモデル（JSmol）	インタラクティブ画像;
ケムスパイダー	106653 ;
パブケム CID	119411;
ユニ	型番 ;
CompTox ダッシュボード ( EPA )	DTXSID90208290;
	インチ InChI=1S/C9H15O6P/c10-7(11)1-4-16(5-2-8(12)13)6-3-9(14)15/h1-6H2,(H,10,11)(H,12,13)(H,14,15) キー: PZBFGYYEXUXCOF-UHFFFAOYSA-N ; InChI=1/C9H15O6P/c10-7(11)1-4-16(5-2-8(12)13)6-3-9(14)15/h1-6H2,(H,10,11)(H,12,13)(H,14,15) キー: PZBFGYYEXUXCOF-UHFFFAOYAQ;
	笑顔 OC(CCP(CCC(O)=O)CCC(O)=O)=O;
プロパティ
化学式	Ｃ9Ｈ15Ｏ6Ｐ
モル質量	250.187 グラムモル−1
	特に記載がない限り、データは標準状態（25 °C [77 °F]、100 kPa）の材料に関するものです。確認する（何ですか？）インフォボックス参照

TCEP (トリス(2-カルボキシエチル)ホスフィン) は、生化学や分子生物学の分野で頻繁に使用される還元剤です。多くの場合、分子量 286.65 グラム/モルの塩酸塩(TCEP-HCl)として調製され、使用されます。TCEP は水に溶け、中性 pH で安定化された溶液として利用でき、還元剤の除去を容易にするためにアガロース支持体上に固定化されています。

合成

TCEPはトリス（シアノエチル）ホスフィンの酸加水分解によって製造することができる。^[1]

アプリケーション

TCEP は、ゲル電気泳動の準備段階として、タンパク質内およびタンパク質間のジスルフィド結合を破壊する還元剤としてよく使用されます。

この目的で使用される他の2つの最も一般的な試薬（ジチオトレイトールとβ-メルカプトエタノール）と比較して、TCEPは無臭であること、より強力な還元剤であること、不可逆的な還元剤であること（TCEPは再生しないという意味で、TCEPを介したジスルフィド切断の最終生成物は実際には2つの遊離チオール/システインである）、より親水性であること、空気中での酸化に対してより耐性があることなどの利点があります。^[2]また、固定化金属アフィニティークロマトグラフィーで使用される金属を還元しません。

TCEPは、システイン残基をマレイミドで標識する場合に特に有用である。TCEPはシステインがジスルフィド結合を形成するのを防ぎ、ジチオトレイトールやβ-メルカプトエタノールとは異なり、マレイミドと容易に反応しない。^[2]しかし、TCEPは特定の条件下でマレイミドと反応することが報告されている。^[3]^[4]

TCEPはRNA分離のための組織均質化プロセスにも使用されます。^[5]

紫外可視分光法の用途では、ジチオトレイトールで発生する可能性のある 250 ～ 285 ナノメートルの吸収を妨害するのを避けることが重要である場合に TCEP が役立ちます。ジチオトレイトールは、さまざまな酸化還元反応が発生するにつれて、時間の経過とともにこのスペクトルの光を徐々に吸収するようになります。

歴史

トリアルキルホスフィンによる生体分子の還元は、歴史的に利用可能なホスフィンが極度の悪臭を放ち、水に不溶であったため、数十年にわたってほとんど注目されませんでした。^[6] 1969年、TCEPは生化学用途に適した無臭で水溶性のトリアルキルホスフィンとして報告されましたが、^[7]生化学用途でのTCEPの潜在的な用途は数十年にわたってほぼ完全に無視されていました。1991年、BurnsはTCEPの新しい便利な合成手順を報告し、^[8] TCEPはより広く利用できるようになり、生化学用途の「新しい」還元剤として販売され、1990年代を通じてTCEPはより広く使用されるようになりました。^[6]

反応

TCEPT は水の存在下でジスルフィドをチオールに還元します。

同様のプロセスを経て、スルホキシドやN-オキシドも還元することができる。^[9]他にもいくつかの副反応が報告されている。

TCEPと熱（90℃）の存在下でのシステイン残基のアラニンへの変換。 ^[10]
穏やかな条件下では、システイン残基でのタンパク質骨格の切断は遅い（しかし顕著で、4℃で2週間保存すると40％の切断が報告されている）。^[11]

生物学研究での使用

TCEPは塩酸塩として様々な化学薬品供給業者から入手可能である。水に溶解すると、TCEP-HClは酸性になる。報告されている調製法は、0.5M TCEP-HCl水性ストック溶液であり、pHをほぼ中性に調整し、-20℃で凍結保存する。^[12] TCEPはリン酸緩衝液中では安定性が低いと報告されている。^[12]

参照

参考文献

^ Yost JM、Knight JD、Coltart DM (2008 年 9 月 15 日)。「トリス (2-カルボキシエチル) ホスフィン塩酸塩」。有機合成試薬百科事典。doi : 10.1002/047084289X.rn00973。
^ ab TCEP技術情報、Interchimより
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[1] Yost JM、Knight JD、Coltart DM (2008 年 9 月 15 日)。「トリス (2-カルボキシエチル) ホスフィン塩酸塩」。有機合成試薬百科事典。doi : 10.1002/047084289X.rn00973。

[FT-242214-2] TCEP技術情報、Interchimより

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[4] Tyagarajan K, Pretzer E, Wiktorowicz JE (2003). 「プロテオームサンプルの蛍光標識用チオール反応性染料」.電気泳動. 24 (14): 2348– 2358. doi :10.1002/elps.200305478. PMID 12874870. S2CID 20446141.

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[cytiva-12] 「タンパク質精製のための戦略」。Cytiva 。 2023年2月24日閲覧。