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セレクター技術はゲノム DNA を 増幅し多重化する方法である。
プロセス
ゲノムDNA は制限酵素で消化され、セレクターとのハイブリダイゼーションによって環状化され、その後、ライゲーションによってベクター配列に結合されます。この手順により、 PCRまたはRCAによる増幅に使用できる一般的なプライマーペアモチーフを含む環状 DNA分子が生成されます。
セレクタ構造
セレクターは、2 つのオリゴヌクレオチド、1 つのベクター オリゴヌクレオチド、および 1 つのセレクター プローブで構成されます。これらが一緒になって、一般的なプライマー モチーフの両側にターゲット固有の末端を持つ 1 つのセレクターを形成します。
選択メカニズム
- セレクタープローブは選択されたターゲットの両端とハイブリダイズします。
- セレクター プローブは、一方の端をターゲットの 3' 末端に、もう一方の端をターゲットの内部配列にハイブリダイズします。突出している 5' 末端は、Taq ポリメラーゼを使用して切断されます。
出版物
- セレクタメソッドのデモンストレーション
- セレクター実験を設計するためのPieceMakerソフトウェア
