SH-SY5Y

SH-SY5Y は、科学研究に使用されるヒト由来の細胞株です。サブクローンの元となった SK-N-SH と呼ばれる元の細胞株は、神経芽腫を患う 4 歳の女性の骨髄生検から分離されました。SH-SY5Y 細胞は、ニューロンの機能と分化のin vitroモデルとしてよく使用されます。表現型はアドレナリン作動性ですが、ドーパミン作動性マーカーも発現するため、パーキンソン病、神経発生、および脳細胞のその他の特性 の研究に使用されています。

SH-SY5Yは、ジューン・ビードラーの研究室によってSK-N-SHと呼ばれる骨髄生検由来の細胞株からクローン化され 、1973年に初めて報告されました。 ^[1] SK-N-SHの神経芽細胞様サブクローンであるSH-SYは、SH-SY5としてサブクローン化され、さらに3回目のサブクローン化によってSH-SY5Y細胞株が作られ、1978年に初めて説明されました。^[2]クローン化のプロセスでは、ニューロンのような特性を示す個々の細胞またはクラスターが選択されました。SH-SY5Y細胞株は、4歳の雌に由来することから予想されるとおり、遺伝的には雌で、X染色体を2本持ち、Y染色体を持っていません。

細胞は、通常、組織培養で2つの異なる方法で増殖する。培地に浮遊する細胞塊に増殖するものもあれば、シャーレに付着する塊を形成するものもある。SH-SY5Y細胞は、in vitroで神経芽細胞様細胞と上皮様細胞の2つの表現型間を自発的に相互変換することができるが、このプロセスの根底にあるメカニズムは解明されていない。^[3]しかし、その形態と神経細胞系統に沿って細胞を分化させる能力を考えると、細胞株はN型（神経細胞）であると理解されている（SK-N-SHから派生したS型のSH-EPサブクローン化細胞株とは対照的）。^[4]短い棘状の神経突起のような突起を持つ細胞は、これらの付着した塊から遊走する。SH-SY5Y細胞は異常な染色体1を有し、1qセグメントの追加のコピーがあり、トリソミー1qと呼ばれる。 SH-SY5Y 細胞は、ドーパミン ベータ水酸化酵素活性、アセチルコリン作動性、グルタミン酸作動性、アデノシン作動性であることが知られています。細胞は、周囲の図に示されているように、非常に異なる成長段階にあります。細胞は有糸分裂によって増殖し、神経突起を周囲に伸ばすことによって分化します。分裂中、凝集細胞は、K'annul 指数腫瘍細胞密度 (TNF、腫瘍壊死因子) に従って分化した細胞と非常に異なって見えるため、新しい科学者はどちらか一方を汚染と間違えることがよくあります。分裂細胞は、癌の性質を思い出させる細胞のクラスターを形成することがあります。

レチノイン酸、BDNF、TPAなどの特定の治療法は、細胞を樹状細胞化させ分化させる可能性があります。未分化状態と分化状態の形態の違いは明確です。未分化細胞は、密集した成長により核密度が高く、密集して増殖する形態を示しますが、分化細胞は、よく発達した神経突起とより小さな細胞体を持つ特徴的な分散形態を示します。^[5]さらに、レチノイン酸による誘導は、細胞の成長を抑制し、SH-SY5Y細胞からのノルアドレナリンの産生を促進します^{[6] [7]}

最も一般的に使用される培養カクテルは、DMEMとハムF12培地の1:1混合物と10%の補助ウシ胎児血清です。DMEMには通常、3.7 g/Lの炭酸水素ナトリウム、2 mMのL-グルタミン、1 mMのピルビン酸ナトリウム、0.1 mMの非必須アミノ酸が含まれています。^{[8]細胞は常に95%の空気と5%の}二酸化炭素で37℃で培養されます。細胞培養接着のためにコーティングされたフラスコで細胞を培養することが推奨されます。これは神経芽細胞腫の分化と樹状化に役立ちます。一般に細胞は非常に丈夫で、最も広く使用されている組織培養培地で成長します。しかし、SH-SY5Yの増殖にはDMEMがDMEM:F12よりも優れていることが最近判明しました。^[9]

SH-SY5Y細胞の指数関数期の倍加時間は67.3時間±5.8時間です。平均世代時間（G）は4.23±0.84日、細胞単位あたりの分裂速度（r）は0.25±0.05、増殖係数（V）は3.49±1.21でした。SH-SY5Y細胞は、多くの記載されている不死化腫瘍由来細胞株の典型的またはそれよりも優れた成長関連パラメータを示しています。増殖能力は時間の経過とともに安定しており、継代10を超えても安定しています。^[10]

SH-SY5Y はドーパミン β-ヒドロキシラーゼ活性を持ち、ドーパミンをノルエピネフリンに変換できます。また、約 3 ～ 4 週間でヌードマウスに腫瘍を形成します。継代数の増加に伴い、ニューロン特性の喪失が報告されています。したがって、継代数 20 回目以降は使用しないこと、またはノルアドレナリン取り込みやニューロン腫瘍マーカーなどの特定の特性を確認することをお勧めします。

• SH-SY5Y の Cellosaurus エントリ
• ATCC - アメリカ培養細胞コレクション、SH-SY5Y細胞およびその他の生物製剤の供給源
• SH-SY5Y セルの ATTC 製品データ、カタログ CRL-2266
• シグマ製品ページ
• 運河、メリトセル;アングロ、エステル。カサド、ヴィセント。カネラ、エンリク I.マロル、ジョセファ。ヴィナルス、フランセスク。ステインズ、ウィリアム。ティンナー、バーブロ。アグナティ、ルイージ。フューゼ、ケル。フェレ、セルジ。ルイス、カルメン。フランコ、ラファエル。フランコ、R (2005 年 1 月)。 「神経芽腫細胞および線条体初代培養におけるアデノシン A1 および A2A 受容体誘導性神経分化に関与する分子機構」。神経化学ジャーナル。92 (2): 337–348。土井: 10.1111/j.1471-4159.2004.02856.x。PMID  15663481。S2CID 2766681  。
• ヒリオン、ジョエル。運河、メリトセル;トルヴィネン、マリア。カサド、ヴィセント。スコット、リザルディ。テラスマー、アントン。ハンソン、アニタ。ワトソン、スタンリー。ああ、マーク E。マロル、ジョセファ。カネラ、エンリク I.ゾリ、ミケーレ。アグナティ、ルイージ F.イバニェス、カルロス F.ルイス、カルメ。フランコ、ラファエル。フェレ、セルジ。フューゼ、ケル (2002 年 5 月 17 日) 「アデノシン A 2A 受容体とドーパミン D 2 受容体の共凝集、共内部化、および共感作」。生物化学ジャーナル。277 (20): 18091–18097。doi : 10.1074/jbc.M107731200 . hdl : 2445/122309 . PMID  11872740.
• 奥田 勝弘; 小竹 弥一郎; 太田 茂( 2006)。「1-メチル-1,2,3,4-テトラヒドロイソキノリン誘導体のC57BLマウスにおけるパーキンソン病予防活性」。 生物・薬学速報。29 (7): 1401–1403。doi : 10.1248/ bpb.29.1401。PMID 16819177。