熱安定化

熱安定化は、組織サンプルの劣化と変化を即時かつ永久的に止める無添加保存技術です。熱安定化は、制御された圧力下で急速な伝導加熱を使用して、タンパク質の迅速かつ均一で不可逆的な熱変性を生成し、その結果、体外で組織サンプルにさらなる生物学的変化を引き起こす可能性のあるすべての酵素活性を完全かつ永久的に排除します。酵素が永久的に不活性化されるため、熱安定化は、阻害剤を使用する急速凍結などの従来の組織サンプル保存技術の欠点を克服します。^[1]

正常組織および病変組織におけるタンパク質、ペプチド、小分子の役割を理解することは、それらの薬剤、薬剤ターゲット、または疾患バイオマーカーとしての潜在的な用途を定義する上で非常に重要です。しかし、生物学的変化は、組織が本来の環境から取り出された瞬間に始まります。分子レベルでの劇的な変化は数秒以内に起こります。たとえば、代謝の変化、エネルギーを放出するための巨大分子（ ATPなど）の異化断片化により制御機構が破壊され、リン酸化状態が変化してタンパク質が分解し始めます。その結果、重要な情報が失われたり歪んだりする可能性があり、サンプル間の変動、誤ったデータ解釈のリスク、および誤解を招く可能性のある結論につながります。^[2]

熱安定化は、生物学的変化を防ぐ従来の方法に比べて大きな利点がある。^[3]阻害剤、pH変更、有機溶媒、または架橋に続く急速凍結の代替として使用できる。また、凍結組織にも使用できるため、保存サンプルの安定化が可能になる。熱安定化は、ほぼあらゆる種類の組織サンプルに使用でき、質量分析、^[4] リン酸化ショットガン、^[5] MALDIイメージング、^[6] ウェスタンブロット、^[7] 1Dおよび2Dゲル、逆相タンパク質アレイ、^[8] RIAおよびELISAなど、多くの下流分析技術と互換性があることが検証されている。この方法では、バイオセーフティレベルの研究室で収集および処理されたサンプルを、処理後にそのような研究室の外で処理することもできる。^[9]