ニトロセルローススライド(またはニトロセルロースフィルムスライド)は、ニトロセルロースでコーティングされたガラス製顕微鏡スライドで、比色分析や蛍光検出アッセイのために、多くの場合タンパク質などの生物学的物質を結合するために使用されます。この目的のために、ニトロセルローススライドはガラスよりも優れていると一般に考えられています。これは、ニトロセルローススライドがはるかに多くのタンパク質を結合し、タンパク質(および他の生物学的物質、つまり細胞)の三次構造を保護するためです。通常、ニトロセルローススライドは、標準的な 25 mm × 75 mm のガラス製顕微鏡スライド上にニトロセルロースの薄い不透明なフィルムで覆われています。このフィルムは接触や異物に対して非常に敏感であり、接触すると変形や物質、特に液体の堆積を引き起こします。[要出典]
ニトロセルローススライドは、通常は溶液からタンパク質を濾過するニトロセルロース膜(例:医師の診察室での妊娠検査)とは異なりますが、特定の生物学的物質の存在や濃度レベルを検出するという同様の目的を果たします。
マイクロアレイ
ニトロセルローススライドは主にプロテオミクスで使用され、スライドを印刷して結果を記録する自動システムを使用してタンパク質マイクロアレイを行います。細胞分析物のマイクロアレイ、細胞溶解物のアレイ、抗体マイクロアレイ、組織印刷、[1] [2]免疫アレイなどもこのスライドで可能です。
ニトロセルロース蛍光
従来の白色ニトロセルロースフィルムは表面粗さが大きいため、マイクロアレイスキャナでの蛍光検出中に大量の励起光と発光光を散乱・反射します。また、ニトロセルロースは一般的に使用される検出波長で自然な自己蛍光を示します。[3]これらの要因は両方とも、これらの膜スライドからの高いバックグラウンド蛍光信号につながります。この問題を克服するために、散乱光を吸収する黒色膜を生成する新しいプロセスが開発され、バックグラウンドの自己蛍光が大幅に減少し、非常に低く均一な自己蛍光を提供してダイナミックレンジが大幅に改善されました。[4]これらのスライドは、 Schott AGから市販されています。[5] [自己出版ソース? ]それにもかかわらず、上記の主張がエンドユーザーの要件に関連していないことが証明されているため、従来の白色ニトロセルロースフィルムは多くのタンパク質マイクロアレイアプリケーションの主要な表面であり続けています。いずれにせよ、 Grace Bio-Labs などのニトロセルローススライドメーカーは、タンパク質マイクロアレイでの使用をさらに最適化するために、新しいニトロセルロース表面の開発を続けています。
ニトロセルロースコーティングされたガラススライド上のタンパク質定量法では、量子ドットを用いた 近赤外蛍光検出法が用いられる。従来の多孔質ニトロセルロースの信号対雑音比は、標準的な有機蛍光検出プローブの励起および発光の各必要波長におけるニトロセルロースの自己蛍光によって制限される。近赤外検出プローブは、ニトロセルロース蛍光の範囲外の発光波長で励起され、読み取られる。[6] [自費出版ソース? ]
参考文献
- ^ McGrath CM、Grudzien JL 、 Decker DA、Robbins TO (1991 年 9 月)。「微小多孔膜上の受容体タンパク質の細胞計測学的コヒーレント移動」。BioTechniques。11 ( 3 ) : 352–4、356、358–61。PMID 1718329。
- ^ McGrath CM、Grudzien JL、Levine AJ (1995)。「マイクロポーラスフィルムを使用 した高精細細胞分析」。Cell Vision。11 ( 3): 499–509。ISSN 1073-1180 。
- ^ Sauer, Ursula (2011). 「プローブ固定化における基質の影響」.タンパク質マイクロアレイ. 分子生物学の方法. 第785巻. pp. 363–378. doi :10.1007/978-1-61779-286-1_24. ISBN 978-1-61779-285-4. ISSN 1064-3745.
- ^ Hollas, M; Jallerat, E; Pflanz, K; Praulich, I; Walter, J; Stahl, F; Scheper, T (2006). 「ダイナミックレンジが向上したタンパク質マイクロアレイ用の新しい 3D ブラック基板」. Desalination . 199 (1–3): 230. doi :10.1016/j.desal.2006.03.055.
- ^ 「SCHOTT 社、Sartorius Stedim Biotech 社と提携し、タンパク質マイクロアレイ用のニトロセルロースコーティングスライドの新シリーズを開発」( PDF)。The Nexterion Newsletter。3 : 4–5。2007 年 9 月。
- ^ Marie‐Laure Schneider、Adriana Marquez‐ Lagraulet、Richard Pasquesi、Michael Shultz - (2014)、「赤外線検出はニトロセルロースの自己蛍光を減少させ、RPPAアッセイの信号対雑音比を可視波長検出よりも向上させる」、Innopsys Inc. シカゴ、イリノイ州、
