混合リンパ球反応

混合リンパ球反応（MLR）は、製薬会社やバイオテクノロジー会社が薬剤やインプラント材料の安全性を示すために使用するテストです。これは、FDA 承認プロセスの一部として一般的に使用されています。^[1]簡単に言えば、T リンパ球（白血球の一種）の集団を混合し、発生する反応を測定することです。技術的には、2 つの同種リンパ球集団（同じ種だが遺伝的に異なる）間で行われる ex-vivo 細胞免疫アッセイです。^[2]一方向 MLR では、1 つのリンパ球集団のみが反応または増殖できます。双方向 MLR では、両方の集団が増殖できます。MLR は、T 細胞が外部刺激にどのように反応するかを評価するために実行されます。T 細胞は、細胞の異常や感染をスキャンする白血球の一種です。人間の免疫にとって不可欠です。^[3]

MLR は、研究者が 2 人の血縁関係のないドナーからの白血球を培養で混合したときに初めて認識されました。 ^{[4] [5]} 数日後、リンパ球は、応答細胞と刺激細胞と呼ばれる 2 つの細胞集団間の主要組織適合抗原 (MHC クラス I および II) の違いに反応して、芽球化、DNA 合成、細胞増殖を起こしました。応答細胞は、刺激 MHC 抗原に事前に曝露されることなく増殖しました。この反応は、混合細胞懸濁液に放射性 [3H] 標識チミジンまたは5-ブロモ-2'-デオキシウリジン (BrdU)を組み込むことで定量化できるようになりました。MLR で発生する組織適合抗原に対するこの細胞反応は、個体内の細胞性免疫反応にも関与しており、細胞免疫機能の in vitro 相関関係を提供しました。 ^{[6] [7]} 標準的な MLR アッセイは、ヒトおよび他のほとんどの動物種で実施されました。^[要出典]

MLRに関与する白血球サブポピュレーションは、新生児期に胸腺摘出および嚢切除された鶏の細胞を使用して最初に特徴付けられました。レスポンダー細胞が胸腺摘出動物から採取された場合、MLRは発生しませんでしたが、嚢切除された鶏の白血球は培養で反応し、T細胞がレスポンダー細胞集団の主な細胞タイプであることが示されました。^[8]

もともとこの検査は、移植片移植におけるドナーとレシピエントの不適合の可能性を研究し、より良い結果を予測するために使用されていました。^[9] しかし、現在では移植片適合の基準は、分子タイピング法による一連のHLA適合に依存しています。^[10]

アッセイのセットアップは、末梢血、胸腺、リンパ節、または脾臓からレスポンダーリンパ球を精製し、刺激細胞と共培養することから成ります。T 細胞も含む刺激細胞集団 (双方向混合リンパ球反応) は、レスポンダー細胞の存在下で複製されるため、一方向混合リンパ球反応の場合、刺激細胞は放射線照射または細胞複製を防ぐ DNA 架橋剤であるマイトマイシン Cによる処理によって複製が防止されます。測定可能な最大細胞増殖は、約 5～7 日で発生します。^[要出典]

研究目的で、MLR細胞ベースのアッセイは、T細胞機能のin vitro相関を提供し続けています。このアッセイはin vitroでの細胞免疫機能を理解するためのメカニズムを定義するために引き続き使用されているため、MLRに関与するリンパ球、補助細胞（樹状細胞、マクロファージ）、およびサイトカインのさらなる特徴付けが行われています。^[11]