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接種針は、微生物学の分野で生きた微生物を移し、接種するために使用される実験器具である。[1] [全文引用が必要]これは、最も一般的に使用される生物学実験器具の1つであり、使い捨てまたは再利用可能なものがある。[1]標準的な再利用可能な接種針は、金属製のハンドルに取り付けられたニクロムまたは白金線でできている。 [2] [3]使い捨ての接種針は、多くの場合、プラスチック樹脂で作られている。針の基部は鈍くされており、先端は丸みを帯びている。[2] [3]
用途
接種針は主に微生物学で半固形培地上の細菌や真菌を研究するために使用されます。バイオテクノロジー、細胞生物学、免疫学でも針を用いた培養法が利用されることがあります。[2] [4] [5]
接種針の用途は、培養物の非常に限定された領域への接種と分離、および2つの密集した微生物コロニー間の撹乱を最小限に抑えることに重点を置いています。 [5]また、低倍率の顕微鏡下での銛打ちにも使用できます。[6]
接種針は、画線プレートへの画線、斜面培養のフィッシュテール接種、および穿刺培養の接種に使用できます。[1] [7]穿刺培養には特に接種針が必要であり、細胞運動性、チオグリコール酸培養を使用した微生物の酸素要求量、および細菌のゼラチン液化を研究するために使用されます。 [2] [3] [4]
手術
殺菌
接種針は無菌技術を使用して滅菌される。[1] [2] [3] [7]焼却炉、ブンゼンバーナー、またはアルコールバーナーからの直火を使用して、接種物（または伝播体）と接触する針の先端と長さに沿って炎を当てる。[2] [3]操作を容易にするために、針を鉛筆を扱うように利き手で持つのが一般的です。針は炎の内側の円錐を通して下向きの角度で赤熱するまで炎を当てられます。[1]下向きの角度にすることで、生成される微生物エアロゾルの量が最小限に抑えられます。[1] [2] [3]
接種針は、培養物、滅菌培地、および周囲の環境が汚染されないように、微生物との接触前と接触後に滅菌する必要があります。[1]
移行
接種では、まず接種針を使用して培養物から針に微生物の生命体を移し、その後の接種手順に使用します。接種源には、ブロス培養、斜面培養、平板培養などがあります。[1] [2] [3] [5]
- ブロス培養
接種針は、最初にボルテックスミキサーを使用して培養液内の微生物の均一な懸濁液を確保することにより、培養液から微生物を移すために使用されます。 [1]次に、針に無菌技術が適用されます。針が火で焼かれて滅菌されると、培養液のキャップが針の手で取り外されます。培養液の開いた端は、汚染やエアロゾルの発生のリスクを減らすために火で焼かれます。[2] [3]
針の位置を固定したまま、培養液を針の先端が水に浸るまで針の上に移動します。[3]培養液を引き上げる際には、針と針の持ち手が動かないようにします。そうしないと、針が跳ね上がります。 [3] [5]培養液を針に移す作業は、培養液の開いた端を火であぶり、針の持ち手を動かさないようにしながら蓋を閉めることで終了します。
- 傾斜文化
斜面培養の移植では、まず接種針を火炎処理して無菌技術で処理します。次に斜面培養キャップを取り外し、針の手を使って固定します。斜面培養の開放端を火炎処理することで、汚染やエアロゾルの形成を防ぐことができます。[2] [3]
接種針の先端が斜面培養の寒天表面に接触すると、接種針が移動します。接種針は、このプロセス中に動かないでください。針の揺れを防ぐために、寒天斜面培養を針まで移動させます。[1] [3]斜面培養から針への移動が完了したら、培養の開いた端を炎で処理し、キャップを取り付けます。
- プレート文化
接種針は、汚染を防ぐためにまず針を滅菌し、プレート培養から針に微生物を移す際に使用されます。次に、寒天プレート培養の蓋を外して、針が寒天プレート上で培養された微生物にアクセスできるようにします。蓋は、周囲の環境からの汚染を防ぐために培養プレートの上に浮かせたままにします。[1]
接種針は焼却後、寒天培地の未接種領域で冷却されます。[1]接種針が炎上すると、接種物が直接接触して熱くなりすぎ、接種物が死滅します。[1]小さなコロニーが得られたら、接種針を寒天培地から引き抜き、寒天培地の蓋を戻します。
接種
微生物の接種は、培養物から接種針に移した後、直接行われます。接種物は通常、ブロス培養、斜面培養、平板培養、および穿刺培養に接種されます。[1] [2] [3] [4] [5] [7]
- ブロス培養
接種針は滅菌培養液に接種する際に使用されます。培養液の開放端を火であぶると滅菌状態が保たれます。培養液は針まで移動し、針の元の位置を維持しながら針先が浸るようにします。[1]針を注意深く回転させることにより、針から滅菌培養液への微生物の接種が容易になります。[1]
次に、接種した培養液を針から取り出します。培養液の開放端に無菌技術を適用して汚染を防ぎ、針を火で加熱して滅菌します。
- 傾斜文化
接種針は、フィッシュテール接種法で斜面培養に接種するために使用されます。[1]微生物が元の微生物培養物から接種針に移行した後、滅菌斜面培養のキャップが外されます。次に、キャップを外した斜面培養の開口端を火であぶります。斜面は、接種針の先端が滅菌培地のベース表面に軽く接触するまで針の上を移動するように配置されます。[1] [2] [4]接種針は、針先が寒天表面をジグザグにかすめるように培地を操作することで滅菌寒天に接種します。[1]次に、引き抜いた接種針に無菌技術を適用します。
- プレート文化
平板培養の接種は、画線法によって画線平板を作ることによって行われます。[1] [2] [4]蓋を持ち上げて滅菌寒天平板の上に浮かせた後、接種針を制御された方向に平板全体に画線させます。[1]接種チップが寒天平板の側面に当たることで微生物エアロゾルが生成されます。[1] [2] [4]次に、接種針を接種した寒天平板培養から引き抜き、火で焼きます。
- 刺し傷文化
接種針は、穿刺培養に接種する際に不可欠なツールです。[4] [7]滅菌された穿刺培養キャップを取り外し、開いた端を火であぶります。次に、針の先端とその長さを穿刺培地に押し込み、針の先端が穿刺培地の底から0.5インチ離れたところで止めます。[7]接種針は、培養を妨げる可能性のあるぐらつきを防ぐため、穿刺培地に押し込んだのと同じ方向と経路で培地から引き抜かれます。[4] [7]針は火であぶり滅菌されます。
参照
ギャラリー
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参考文献
- ^ abcdefghijklmnopqrstu v 一般的な無菌培養法と接種法. pp. 4–8.
- ^ abcdefghijklmn Dubey, RC (2014). Practical for Class XI (第2版). S. Chand Publishing. ISBN 978-81-219-2417-7。
- ^ abcdefghijklm Maheshwari, DK (2002).微生物学実験室: 基本的なルールと要件(第2版). S. Chand Publishing. p. 6.
- ^ abcdefgh Parija、Subhash Chandra (2012)。微生物学と免疫学の教科書（第2版）。エルゼビア。p. 38。ISBN 978-81-312-2810-4。
- ^ abcde 「サンプリングと接種」。細胞生物学実験マニュアル。ヘンドリックス大学細胞生物学実験マニュアルおよび安全ガイド。 2016年10月28日閲覧。
- ^ Ørskov, J. (1992年1月17日). 「単一細胞からの純粋培養細菌の分離方法および固体培地上での細菌増殖の直接追跡手順」Journal of Bacteriology . 7 (6): 547–548.
- ^ abcdef 微生物学入門。アメリカンタイプカルチャーコレクション。2015年。pp.10-11, 26, 28, 30-31。