GSD顕微鏡検査

基底状態空乏顕微鏡法（GSD顕微鏡法）は、 RESOLFTコンセプトの実装です。この方法は1995年に提案され^[1]、2007年に実験的に実証されました。^{[2]これは、} Stefan Hellによって発表された遠距離場光学顕微鏡法の回折障壁を克服する2番目のコンセプトです。ダイヤモンドの窒素空孔中心を使用して、2009年に最大7.8 nmの解像度が達成されました。^[3]これは回折限界（約200 nm）をはるかに下回っています。

GSD 顕微鏡法では、蛍光マーカーが使用されます。ある条件では、マーカーは基底状態から自由に励起され、蛍光光子の放出によって自発的に戻ります。ただし、適切な波長の光を追加で適用すると、染料は長寿命の暗状態、つまり蛍光が発生しない状態に励起されます。分子が長寿命の暗状態 (たとえば、三重項状態) にある限り、基底状態から励起することはできません。光を当ててこれらの 2 つの状態 (明状態と暗状態) を切り替えると、RESOLFT の概念とサブ波長スケールのイメージングのすべての前提条件が満たされ、非常に高解像度の画像が得られます。GSD 顕微鏡法を正常に実装するには、三重項収率の高い特殊な蛍光体^[4]を使用するか、Mowiol や Vectashield などのさまざまなマウント メディアを使用して酸素を除去する必要があります。^[2]

顕微鏡での実装は誘導放出消光顕微鏡と非常に似ていますが、励起と消光に 1 つの波長のみで動作できます。分子を暗状態に切り替える光に適切なリング状の焦点を使用すると、焦点の外側の部分で蛍光を消光できます。したがって、蛍光は顕微鏡の焦点の中心でのみ発生し、空間解像度が向上します。