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| 目的 | 特定の抗原または抗体を検出する |
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補体結合試験は、補体結合が起こるかどうかに基づいて、患者の血清中の特定の抗体または特定の抗原の存在を検出するために使用できる免疫学的 医療検査です。これは、特に培養法では簡単に検出できない微生物による感染症やリウマチ性疾患の診断に広く使用されていました。しかし、臨床診断ラボでは、ELISAなどの他の血清学的方法や、特にPCRなどのDNAベースの病原体検出方法に大きく取って代わられました。
プロセス
補体系は、抗原抗体複合体と反応する血清タンパク質のシステムです。この反応が細胞表面で起こると、膜貫通孔が形成され、細胞が破壊されます。補体固定試験の基本的な手順は次のとおりです。[1]
- 血清は患者から分離されます。
- 患者の血清中の補体タンパク質のレベルは、当然異なります。これが検査に及ぼす影響をなくすには、患者の血清中の補体タンパク質を破壊し、一定量の標準化された補体タンパク質に置き換える必要があります。
- 血清は、その中の補体タンパク質がすべて破壊されるように加熱されますが、抗体は破壊されません。(補体タンパク質は抗体よりも熱による破壊を受けやすいため、これが可能になります。)
- 既知量の標準補体タンパク質が血清に添加されます。(これらのタンパク質は、モルモットの血清から得られることが多いです。)
- 目的の抗原を血清に加えます。
- 抗sRBC抗体にあらかじめ結合した羊赤血球(sRBC)[2]を血清に加えます。この時点で溶液がピンク色に変われば検査は陰性、そうでなければ陽性と判定されます。
患者の血清に目的の抗原に対する抗体が含まれている場合、ステップ 3 で抗原に結合して抗原抗体複合体を形成します。補体タンパク質はこれらの複合体と反応して枯渇します。したがって、ステップ 4 で sRBC 抗体複合体が追加されると、血清には補体は残りません。ただし、目的の抗原に対する抗体が存在しない場合は、補体は枯渇せず、ステップ 4 で追加された sRBC 抗体複合体と反応して sRBC を溶解し、その内容物を溶液に流出させ、溶液をピンク色に変色させます。[1]
抗原検査
抗体の検出は最も一般的な検査形式ですが、抗原の存在を検査することも可能です。この場合、患者の血清に特定の抗体を補充して複合体の形成を誘導し、補体と指標となる sRBC の添加は前述と同様に行われます。[引用が必要]
半定量的テスト
患者の血清を一連の希釈系列で準備し、CF 検査が陽性となる最高希釈率を決定することで、検査を定量化できます。この希釈率は力価に相当します。[要出典]
参考文献
- ^ ab 「アニメーションクイズ4 - 補語固定テスト」。highered.mheducation.com。
- ^ C. Vaman Rao (2005). 免疫学:教科書。Alpha Science Int'l Ltd. pp. 112–. ISBN 978-1-84265-255-8. 2010年12月3日閲覧。
外部リンク
- 米国国立医学図書館医学件名表(MeSH)の補体結合検査
