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シナプト pHluorin は、小胞の放出とリサイクルの遺伝子コード化された光学的指標です。神経科学では、伝達物質の放出を研究するために使用されています。シナプト pHluorin は、小胞関連膜タンパク質(VAMP)の内腔側に融合したpH 感受性の緑色蛍光タンパク質 (GFP) で構成されています。伝達物質小胞内の酸性 pH では、シナプト pHluorin は非蛍光性 (消光) です。小胞が放出されると、シナプト pHluorin は中性の細胞外空間にさらされ、シナプス前末端が明るい蛍光を発します。エンドサイトーシスの後、小胞は再び酸性化され、サイクルが再開されます。シナプト pHluorin 信号の標準化には、すべての小胞の化学的アルカリ化がよく使用されます。シナプトpHluorinは、pKaがGFPよりも高い（7.1対6.0）ため、細胞質を監視するために黄色蛍光タンパク質（YFP）で構成されることがあります。 [1]
歴史
シナプト-pHluorinは1998年にゲロ・ミーゼンベックによって発明されました。 [2] 2006年には、シナプトフィジンを使用してGFPを小胞に標的とする改良版が発表されました。 [3] 2013年には、個々のシナプスのリサイクルプールのサイズを決定するために2色放出センサー（ratio-sypHy）が導入されました。[4]
アプリケーション
シナプトpHluorinは主に神経生物学者によってシナプス前終末における伝達物質の放出と再利用を研究するために使用されています。[4]また、膵臓のβ細胞におけるインスリン分泌の研究にも応用されています。[5]
参考文献
- ^ Ashby, Michael C.; Ibaraki, Kyoko; Henley, Jeremy M. (2004 年 5 月). 「外は緑: pH 感受性 GFP による細胞表面タンパク質の追跡」. Trends in Neurosciences . 27 (5): 257–261. doi :10.1016/j.tins.2004.03.010. PMID 15111007. S2CID 23124974.
- ^ Miesenböck, Gero; De Angelis, Dino A.; Rothman, James E. (1998 年 7 月). 「pH 感受性緑色蛍光タンパク質による分泌とシナプス伝達の可視化」. Nature . 394 (6689): 192–195. Bibcode :1998Natur.394..192M. doi :10.1038/28190. ISSN 1476-4687. PMID 9671304. S2CID 4320849.
- ^ Granseth, Björn; Odermatt, Benjamin; Royle, Stephen J.; Lagnado, Leon (2006 年 9 月). 「Clathrin を介したエンドサイトーシスは海馬シナプスにおける小胞回収の主要なメカニズムである」. Neuron . 51 (6): 773–786. doi : 10.1016/j.neuron.2006.08.029 . PMID 16982422.
- ^ ab Rose, Tobias; Schoenenberger, Philipp; Jezek, Karel; Oertner, Thomas G. (2013). 「Schaffer Collateral Synapses における小胞サイクリングの発達的改良」。Neuron . 77 (6): 1109–1121. doi : 10.1016/j.neuron.2013.01.021 . PMID 23522046.
- ^ ツボイ タカシ; ラター ガイ A. (2003 年 4 月). 「エバネッセント波顕微鏡で明らかになった「キスアンドラン」エキソサイトーシスの多様な形態」. Current Biology . 13 (7): 563–567. doi : 10.1016/S0960-9822(03)00176-3 . PMID 12676086.