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マウス胚線維芽細胞（MEF）は、マウスの胚から作製された線維芽細胞の一種です。MEFは、試験管内で培養すると、線維芽細胞の典型的な特徴である紡錘形を示します。MEFは限られた細胞株です。数回の伝達の後、MEFは老化し、最終的には死滅します。しかし、研究者は、ウイルス感染や反復伝達などのいくつかの戦略を使用してMEF細胞を不死化することができ、これにより、形質の多少の変化にもかかわらず、MEFを無限に成長させることができます。[1] [2]
MEF は生命科学研究、特に幹細胞生物学で広く使用されています。
準備と培養
MEFを作製するには、妊娠した雌マウスが必要です。雌マウスを殺した後、研究者はバイオセーフティキャビネット内でその胃を切開し、胎盤から胚を剥離します。次に肝臓と頭部を取り出します。最後に残骸を酵素で消化して単一の単離細胞を取得し、組織培養皿で細胞を培養します。MEF細胞は、 10% FBSを含むDMEM培地でin vitro培養できます。MEFを移植するには、研究者はトリプシンを使用して細胞を消化し（表面から剥離させます）、消化した細胞の1/5を新しい皿に移します。[3] [1]
生物学への応用
1962年、ニューヨーク大学の研究者ジョージ・トダロとハワード・グリーンは、MEFを繰り返し伝達することで不死化しました。これらの細胞は、一般的に使用される細胞株NIH 3T3に発展しました。[4]
マイトマイシンやガンマ線で処理されたMEF （このような処理によりMEFは有糸分裂を停止する）は、胚の微小環境を模倣できるため、胚性幹細胞培養のフィーダーとして広く使用されている。 [5] 2006年に山中伸弥は4つの因子を導入することでMEFをiPSCに再プログラムし、幹細胞生物学の発展において注目すべき成果を上げた。[6]
参照
参考文献
- ^ ab Jian-ming Xu (2005). 「マウス胎児線維芽細胞の調製、培養、および不死化」。分子生物学の最新プロトコル。28 ( 1): 1– 8。
- ^ Melissa M. St. Amand; John A. Hanover2; Joseph Shiloach1 (2016). 「マウス胎児線維芽細胞の不死化戦略の比較」J Biol Methods . 3 (2): e41. doi :10.14440/jbm.2016.110. PMC 6706133 . PMID 31453208.
{{cite journal}}: CS1 maint: numeric names: authors list (link) - ^ LANCTÔT. 「マウス胎児線維芽細胞の調製と凍結」（PDF）。LANCTÔT 研究室、MIT。[永久リンク切れ ]
- ^ TODARO GJ, GREEN H (1963). 「培養中のマウス胚細胞の増殖と確立された細胞株への発達に関する定量的研究」J. Cell Biol . 17 (2): 299– 313. doi :10.1083/jcb.17.2.299. PMC 2106200. PMID 13985244 .
- ^ Regad T、Sayers T、Rees R編 (2015)。幹細胞生物学とがんの原理：将来の応用と治療。John Wiley & Sons。pp. 3– 5。ISBN 978-1-118-67062-0。
- ^ 高橋一俊、山中伸弥 (2006-08-25). 「特定の因子によるマウス胚および成体線維芽細胞培養からの多能性幹細胞の誘導」. Cell . 126 (4): 663– 676. doi :10.1016/j.cell.2006.07.024. hdl : 2433/159777 . PMID 16904174.