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EuroFlowコンソーシアムは、2005 年に 2U-FP6 資金提供プロジェクトとして設立され、2006 年春に発足しました。当初、EuroFlow は、フローサイトメトリーと免疫表現型の分野で補完的な知識とスキルを持つ、ヨーロッパ 8 か国からの 18 の診断研究グループと 2 つの中小企業 ( SME ) で構成されていました。2012 年に両方の中小企業がプロジェクトを離れ、プロジェクトは完全な科学的独立性を獲得しました。EuroFlow コンソーシアムの目標は、フローサイトメトリーを革新および標準化し、血液悪性腫瘍の診断と治療の個別化における世界的な改善と進歩につながることです。
背景
1990 年代以降、免疫表現型検査(蛍光色素と結合した抗体で細胞を染色し、フローサイトメーターで検出する)は、血液悪性腫瘍の診断で好まれる方法になりました。この方法の利点は、スピードとシンプルさ、一度に 6 つ以上のパラメーターを測定できること、悪性集団に正確に焦点を当てられること、そして診断において幅広く適用できることです。抗体、蛍光色素、マルチカラー デジタル フローサイトメーターの開発が大きく進歩したため、サイトメトリー データをどのように解釈し、施設間で比較可能な結果をどのように達成するかが問題になりました。推奨事項とガイドラインのコンセンサスは確立されましたが、異なる抗体クローン、蛍光色素とその最適な組み合わせ、またはサンプル調製が考慮されていなかったため、標準化は部分的でした。そのため、サイトメトリーは専門知識のレベルに大きく依存し、多施設研究では再現性が限られている方法であると認識されています。
ユーロフローの目標
これらの目標は2012年にLeukemia誌に掲載されました。[1]
- 新しい抗体の開発と評価
- 新しい免疫ビーズアッセイ技術の確立
- 複雑な免疫表現型パターンを認識するための新しいソフトウェア ツールとそれに続く新しい分析アプローチの開発。
- 新しいマルチカラープロトコルと標準操作手順(SOP)の設計
- 高速、正確、高感度のフローサイトメトリーの開発と標準化
実績
過去数年間で、EuroFlowは目標のほとんどを達成しました。血液悪性腫瘍の診断、分類、追跡のための8色パネルが確立されました。[2]スクリーニングチューブと補足特性評価チューブで構成されるパネルは、経験と文献の知識に基づいていますが、蛍光色素の選択、機器設定とSOPの標準化を重視しながら、多数の研究センターで大量のサンプルを使用してさらに最適化およびテストされています。[3]さまざまな会社の抗体クローン、蛍光色素、その他の試薬は、詳細なテストと比較を受けました。同時に、より複雑で大規模なデータファイルを分析するための新しいソフトウェアが開発され、正常データサンプルと患者サンプルの多次元統計比較が可能になりました。[4] [5]また、急性白血病と慢性骨髄性白血病で最も頻繁に見られる融合タンパク質を検出するために、染色体転座に関与するタンパク質の厳密に選択されたエピトープに対する新しい抗体クローンが開発されました。また、免疫ビーズアッセイを用いた融合タンパク質の検出も導入された。[6] [7] [8]
参考文献
- ^ Van Dongen , JJM; Orfao, A; Euroflow, Consortium (2012). 「EuroFlow: 白血病およびリンパ腫の免疫表現型のリセット。コンパニオン診断および個別化医療の基礎」。白血病。26 ( 9 ): 1899–907。doi : 10.1038/leu.2012.121。PMC 3437406。PMID 22948488。
- ^ ヴァン・ドンゲン、JJM;レルミット、L;ベッチャー、S;アルメイダ、J;ヴァン・デル・フェルデン、VHJ;フローレスモンテロ、J;ローストロン、A;アスナフィ、V;レクレヴィス、Q;ルシオ、P;メイストリコワ、E;シュチェパンスキー、T;カリーナ、T;ドゥーテ、R;ブリュッゲマン、M;セデク、L;カレン、M;ランゲラック、AW;メンドンサ、A;マッキンタイア、E;マーティン・アユソ、M;フルサック、O;ビドリアレス、MB;オルファオ、A (2012)。 「正常白血球、反応性白血球、および悪性白血球の標準化されたn次元フローサイトメトリー免疫表現型検査のためのEuroFlow抗体パネル」。白血病。26 (9): 1908 ～ 1975 年。土井：10.1038/leu.2012.120。PMC 3437410。PMID 22552007。
- ^ カリーナ、T;フローレスモンテロ、J;ヴァン・デル・フェルデン、VHJ;マーティン・アユソ、M;ベッチャー、S;リトゲン、M;アルメイダ、J;レルミット、L;アスナフィ、V;メンドンサ、A;ドゥーテ、R;カレン、M;セデク、L;ビドリアレス、MB;ペレス、JJ;テ・マルベルデ、JG;メイストリコワ、E;フルサック、O;シュチェパンスキー、T;ヴァン・ドンゲン、JJM;オルファオ、A (2012)。 「フローサイトメーターの機器設定と免疫表現型検査プロトコルの EuroFlow 標準化」。白血病。26 (9): 1986 ～ 2010 年。土井：10.1038/leu.2012.122。PMC 3437409。PMID 22948490。
- ^ Pedreira, Carlos E.; Costa, Elaine S.; Barrena, Susana; Lecrevisse, Quentin; Almeida, Julia; Van Dongen, Jacques JM; Orfao, Alberto; Euroflow, Consortium (2008). 「潜在的に無限の次元を持つフローサイトメトリーデータファイルの生成」Cytometry Part A . 73A (9): 834–46. doi :10.1002/cyto.a.20608. PMID 18629843. S2CID 12560225.
- ^ Costa, ES; Pedreira, CE; Barrena, S; Lecrevisse, Q; Flores, J; Quijano, S; Almeida, J; Del Carmen García-Macias, M; Bottcher, S; Van Dongen, JJM; Orfao, A (2010). 「B細胞慢性リンパ増殖性疾患の自動パターン誘導主成分分析と専門家による免疫表現型分類：臨床免疫表現型検査の標準化に向けた一歩」白血病. 24 (11): 1927–33. doi :10.1038/leu.2010.160. PMC 3035971. PMID 20844562 .
- ^ デッキング、E.;ヴァン・デル・フェルデン、VHJ;ベッチャー、S.ブリュッゲマン、M.ゾンネフェルト、E.コーニング・ゲードヒアー、A.ボクス、N.ルシオ、P.セデック、L.シュチェパンスキー、T.カリーナ、T。コバック、M.エヴァンス、P.ホーヘフェーン、PG;フローレスモンテロ、J.オルファオ、A.コマンズ・ビター、WM。スタール、FJT;ヴァン・ドンゲン、JJM (2010)。 「フローサイトメトリーイムノビーズアッセイによる白血病患者におけるタンパク質レベルでの融合遺伝子の検出」。臨床血液学のベストプラクティスと研究。23 (3): 333-45。土井：10.1016/j.beha.2010.09.010。PMID 21123134。
- ^ デッキング、EHA;ヴァン・デル・フェルデン、VHJ;バロ、R;ワイ、H。ベッチャー、S;クネバ、M;ゾンネフェルト、E;コーニング、A;ボクス、N;ヴァン・ポッケ、N;ルシオ、P;メンドンサ、A;セデク、L;シュチェパンスキー、T;カリーナ、T;カンデロバ、V;ホーヘフェーン、P;フローレスモンテロ、J;シヨン、MC;オルファオ、A;アルメイダ、J;エヴァンス、P;カレン、M;アラバマ州ノールダイク;フェルミューレン首相。モンタナ州デ・マン。ディクソン、EP;コマンズ・ビター、WM。ヴァン・ドンゲン、JJM (2012)。 「急性前骨髄球性白血病の診断のためのPML-RARA融合タンパク質の迅速かつ容易な検出のためのフローサイトメトリー免疫ビーズアッセイ」。 白血病。26 （9）：1976–85。doi ： 10.1038 /leu.2012.125。PMC 3437408。PMID 22948489。
- ^ ヴェーアカンプ、F;デッキング、E;ン、YY;ヴァン・デル・フェルデン、VHJ;ワイ、H;ベッチャー、S;ブリュッゲマン、M;ファン・デル・スルイス、AJ。コーニング、A;ボクス、N;ヴァン・ポッケ、N;ルシオ、P;メンドンサ、A;セデク、L;シュチェパンスキー、T;カリーナ、T;コバック、M;ホーヘフェーン、PG;フローレスモンテロ、J;オルファオ、A;マッキンタイア、E;レルミット、L;チェン、R;ブラウワー・デ・コック、KAJ;ヴァン・デル・リンデン、A;アラバマ州ノールダイク;コマンズ・ビター、WM。スタール、FJT;ヴァン・ドンゲン、JJM;ユーロフロー、コンソーシアム (2009)。 「白血病患者におけるBCR-ABL融合タンパク質の検出のためのフローサイトメトリー免疫ビーズアッセイ」白血病. 23 (6): 1106–17. doi :10.1038/leu.2009.93. PMID 19387467.
外部リンク
- ユーロフロー