
黄色蛍光タンパク質(YFP )は、もともとクラゲのオワンクラゲに由来する緑色蛍光タンパク質(GFP)の遺伝子変異体です。[1]励起ピークは513 nm、発光ピークは527 nmです。[2]親のGFPと同様に、YFPは励起ピークと発光ピークがGFPと区別可能であり、同じ実験内で複数のプロセス/タンパク質の研究を可能にするため、 細胞生物学と分子生物学で有用なツールです。
YFP の改良版として、Citrine、Venus、Ypet の 3 つがあります。これらは塩化物に対する感受性が低く、成熟が速く、輝度 (吸光係数と量子収率の積として定義) が高くなっています。通常、YFP は遺伝的にコード化されたFRETセンサーのアクセプターとして機能します。その最も可能性の高いドナー FP は単量体シアン蛍光タンパク質 (mCFP) です。GFP に対する赤方偏移は、突然変異によって導入された T203Y 置換の結果としてのPi-Pi スタッキング相互作用によって引き起こされ、これにより、基本的に局所的なクロモフォア環境の分極率が増加し、クロモフォアに電子密度が追加されます。
「ヴィーナス」には、成熟の律速段階である37°Cでのクロモフォアの酸化を促進する新しいアミノ酸置換(F46L)が含まれています。このタンパク質には他の置換(F64L/ M153T/ V163A/ S175G)もあり、ヴィーナスはうまく折り畳まれ、アシドーシスやCl -に対して比較的耐性があります。[3]
GFPからYFPへの進化
YFP変異体を作成するには、エクオレア・ビクトリアクラゲに見られる野生型GFPから4つのタンパク質変異が必要でした。最も重要な変異は、残基位置203のトレオニンをチロシンに置換することでした[1](この置換はT203Yで示され、TとYはそれぞれアミノ酸のトレオニンとチロシンの1文字コードを表します)。
参照
参考文献
- ^ ab Ormö, Mats; Cubitt, Andrew B.; Kallio, Karen; Gross, Larry A.; Tsien, Roger Y.; Remington, S. James (1996-09-06). 「Aequorea victoria 緑色蛍光タンパク質の結晶構造」. Science . 273 (5280): 1392–1395. Bibcode :1996Sci...273.1392O. doi :10.1126/science.273.5280.1392. ISSN 0036-8075. PMID 8703075.
- ^ Lambert, Talley. 「EYFP at FPbase」. FPbase . 2021年2月22日閲覧。
- ^ Nagai, T; Ibata, K; Park, ES; Kubota, M; Mikoshiba, K; Miyawaki, A (2002). 「細胞生物学への応用に向けた、迅速かつ効率的な成熟を実現する黄色蛍光タンパク質の変異体」Nature Biotechnology . 20 (1): 87–90. doi :10.1038/nbt0102-87. PMID 11753368.
