段階的な延長プロセス

段階的拡張プロセス( StEP とも呼ばれる) は、1 つ以上の初期遺伝子の特性を持つ新しい変異遺伝子を作成するためにバイオテクノロジーと分子生物学で使用される一般的な手法です。

この技術自体は、非常に短い（約10秒）サイクルの改良ポリメラーゼ連鎖反応です。これらのサイクルでは、DNAの伸長が非常に速く（数百塩基対のみ）、合成された断片は他の鎖の相補的断片とアニールします。このようにして、最初の遺伝子の変異がシャッフルされ、最終的に新しい変異の組み合わせを持つ遺伝子が増幅されます。^[1]^[2]

StEPプロトコルは、産業に有用な酵素を発見するための指向性進化の方法として有用であることがわかっています。 ^[3]

参考文献

^ Zhao, Huimin; Giver, Lori; Shao, Zhixin; Affholter, Joseph A.; Arnold, Frances H. (1998). 「スタッガード伸長プロセス（StEP）によるin vitro組換えによる分子進化」Nature Biotechnology . 16 (3): 258–261. doi :10.1038/nbt0398-258. PMID 9528005. S2CID 20490024.
^ Zhao, Huimin; Zha, Wenjuan (2006 年 11 月 1 日)。「PCR ベースの段階的伸長プロセス (StEP) による試験管内「性的」進化」。Nature Protocols。1 ( 4 ) : 1865–1871。doi :10.1038/nprot.2006.309。PMID 17487170。S2CID 15317544 。
^ Marrs, Barry; Delagrave, Simon; Murphy, Dennis (1999年7月29日). 「産業用酵素を発見するための新しいアプローチ」Current Opinion in Microbiology . 2 (3): 241–245. doi :10.1016/S1369-5274(99)80042-3. PMID 10383866.

[1] Zhao, Huimin; Giver, Lori; Shao, Zhixin; Affholter, Joseph A.; Arnold, Frances H. (1998). 「スタッガード伸長プロセス（StEP）によるin vitro組換えによる分子進化」Nature Biotechnology . 16 (3): 258–261. doi :10.1038/nbt0398-258. PMID 9528005. S2CID 20490024.

[2] ^ Zhao, Huimin; Zha, Wenjuan (2006 年 11 月 1 日)。「PCR ベースの段階的伸長プロセス (StEP) による試験管内「性的」進化」。Nature Protocols。1 ( 4 ) : 1865–1871。doi :10.1038/nprot.2006.309。PMID 17487170。S2CID 15317544 。

[3] Marrs, Barry; Delagrave, Simon; Murphy, Dennis (1999年7月29日). 「産業用酵素を発見するための新しいアプローチ」Current Opinion in Microbiology . 2 (3): 241–245. doi :10.1016/S1369-5274(99)80042-3. PMID 10383866.