リバースピペッティング

リバースピペッティングは、空気置換ピペットを使用して測定された量の液体を吐出する技術です。この技術は、高粘度または泡立ちやすい溶液に主に推奨されます。^{[1]飛散、泡、気泡形成のリスクが軽減されるためです。リバースピペッティングは、}緩衝液、希釈酸、アルカリなどの水溶液に主に使用されるフォワードピペッティングと比較して、タンパク質や生物学的溶液を含む少量の液体を吐出するのに正確です。 ^[2]

仕組み

リバースピペッティングでは、チップに吸引される量は、受容容器に供給される量よりも大きくなります。この超過量は、吐出中にチップ内に膜として残る液体を補うものです。液体の吸引は、気密スリーブ内の金属またはセラミックのピストンの垂直移動によって真空を作り出すことで実現されます。ピストンがプランジャーの押し下げによって上昇すると、ピストンによって空いたスペースに真空が生成されます。チップからの空気は上昇して空いたスペースを満たし、チップの空気は液体に置き換えられます。液体はチップに吸い上げられ、他の場所への輸送や吐出に使用できるようになります。空気置換型ピペットのピペットノブが押されると、器具内のピストンが下に移動して空気を排出します。空気はピストンによって置換されます。置換される空気の量は、吸引される液体の量に相当します。
これらのピペットは、非常に精密で正確です。しかし、空気置換に依存しているため、変化する環境、^[4]、特に温度とユーザーの技術^[5]によって引き起こされる不正確さの影響を受けます。これらの理由から、この機器は慎重に保守および較正する必要があり、^[6]ユーザーは正確で一貫した技術を習得する必要があります。
手動ピペッティング操作の再現性と精度を向上させる代替ソリューション^[7]は、空気置換ピペットを処理できる擬人化された液体処理ロボットに基づいています。

技術

手動ピペットによる逆ピペッティング

電動ピペットによるリバースピペッティング

一部の電子ピペットにはリバースピペッティングモードがあり、以下のパラメータを設定できます。^[8]

希望する音量
過剰量（ピペットの公称容量の約3～5％）
余分な量を破棄するか、次の吸引に含めるかを指定します
吸引速度
分配速度

参考文献

^ タンパク質サンプルのピペッティング精度の向上: リバースピペッティング技術の信頼性の評価、アプリケーションノート
^ リバースピペッティングによるタンパク質を含む液体のより確実な分注、アプリケーションノート(PDF)
^ ハンズフリーピペットロボット、2012年
^ 空気置換ピペットの精度に影響を与える要因
^ 人為的ミスが最も一般的なピペットの問題
^ ピペット校正システムはピペッティングエラーを最小限に抑え、データの整合性を強化します
^ Andrew は ISO-8655 標準に従って実行します。2012 年 10 月 22 日にオリジナルからアーカイブされました。
^ 「VIAFLO / VOYAGER ピペットの使用方法：リバースピペットモード」。YouTube 。 2020年4月16日。 2020年9月4日閲覧。

出典

ピペッティングガイド
優れた実験室用ピペッティングガイド
サーモサイエンティフィックピペッティングガイド
ウィキレクチャー
粘性溶液のピペッティング
適切なピペッティングのヒント
ピペットを正しく使う方法 - 10 のヒント

外部リンク

アンドリュー・アライアンスウェブサイト
ギルソンのウェブサイト
INTEGRA Biosciencesのウェブサイト
レイニンのウェブサイト
サーモサイエンティフィック
ソコレックス
バイオヒット

参照

[1] タンパク質サンプルのピペッティング精度の向上: リバースピペッティング技術の信頼性の評価、アプリケーションノート

[2] リバースピペッティングによるタンパク質を含む液体のより確実な分注、アプリケーションノート(PDF)

[3] ハンズフリーピペットロボット、2012年

[4] 空気置換ピペットの精度に影響を与える要因

[5] 人為的ミスが最も一般的なピペットの問題

[6] ピペット校正システムはピペッティングエラーを最小限に抑え、データの整合性を強化します

[7] Andrew は ISO-8655 標準に従って実行します。2012 年 10 月 22 日にオリジナルからアーカイブされました。

[8] 「VIAFLO / VOYAGER ピペットの使用方法：リバースピペットモード」。YouTube 。 2020年4月16日。 2020年9月4日閲覧。