免疫固定法

免疫固定法は、血清または尿中のモノクローナル抗体または免疫グロブリンの検出と分類を可能にし、骨髄腫などの特定の血液関連疾患の診断とモニタリングに非常に重要です。

この方法は沈殿によって検出します。可溶性抗原(Ag) が対応する抗体と接触すると沈殿が起こり、肉眼または顕微鏡で確認できます。^[要出典]

免疫固定法では、まず混合物中の抗体をその特異的な電気泳動移動度に応じて分離します。同定の目的で、標的抗体に特異的な抗血清が使用されます。^[1]

具体的には、免疫固定法によって、骨髄腫やワルデンシュトレーム型マクログロブリン血症などの疾患の代表的なモノクローナル抗体の検出が可能になります。

この技術は、血清（または事前に濃縮した尿）サンプルをゲル上に置きます。タンパク質をサイズに応じて分離できる電流を流した後、各タイプの免疫グロブリンに特異的な抗体がゲル上に置きます。その結果、ゲル上には異なる免疫グロブリンのバンドが多かれ少なかれ細く見えるようになります。^[要出典]

免疫電気泳動としての免疫固定法は、次の 2 つのステップで行われます。

• 最初のステップは、どちらの技術でも同じです。血清または尿に含まれる免疫グロブリンをゲル上に置き、電界の影響下で免疫グロブリンを移動させることにより、電気泳動移動度に応じて免疫グロブリンを分離します。この移動は、抗原の質量と電荷に依存します。免疫グロブリンが分離されたら、次のステップに進むことができます。
• 2 番目のステップは、使用する技術に基づきます。免疫固定には、血清タンパク質を複製で移動させるための電気泳動が必要です。次に、特定の抗免疫グロブリン抗血清を使用して各複製を処理します。このため、抗血清は電気泳動のようにチャネルに配置されず、各移動レーンに個別に追加されます。モノクローナル免疫グロブリンが存在すると、複雑な沈殿物を染色した後に狭いバンドが現れます。たとえば、IgG ラムダの場合、抗 G が沈着したトラックと抗ラムダが沈着したトラックの両方に狭いバンドが現れます。

免疫固定法はタンパク質電気泳動法に取って代わる傾向がある。その理由は以下の通りである。^[要出典]

• より高速です（3 時間以内に結果が得られます）。
• 感度はいくぶん高くなります。免疫固定法では、特に低濃度（1 グラム/リットル未満）の場合、タンパク質電気泳動では検出されなかった免疫グロブリンが検出される場合があります。
• 部分的に自動化でき、より多くの研究室で使用できます。
• 読みやすく、解釈しやすくなります。

しかし、免疫固定法は免疫グロブリンにのみ反応し、タンパク質電気泳動法よりも高価です。

• 免疫電気泳動

• fr:免疫固定

• MedlinePlus 百科事典: 003543 - 「免疫固定 - 血清」
• MedlinePlus 百科事典: 003593 - 「免疫固定法 - 尿」