ニッキング酵素増幅反応

ニッキング酵素増幅反応(NEAR) は、ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)のようなin vitro DNA増幅法です。NEAR は等温で、ポリメラーゼ(およびニッキング酵素) を使用して一定温度で DNA を複製し、55 °C ～ 59 °C の温度範囲で DNA を指数関数的に増幅します。

PCRの欠点の1つは、二本鎖DNAを熱で解いて一本鎖にするのに時間がかかることです（変性と呼ばれるプロセス）。これにより、増幅産物を大量に生成するには通常30分以上の増幅時間が必要になります。^{[1] [循環参照]}

PCRに対するNEARの潜在的な利点は、速度の向上とエネルギー要件の低減であり、これは他の等温増幅スキームと共有される特性です。^[2] PCRと比較したNEARの主な欠点は、非特異的増幅産物の生成が等温増幅反応で一般的な問題であることです。^[3]

NEAR反応は、二本鎖DNA切断部位の1本鎖のみに鎖切断を導入する天然または人工のエンドヌクレアーゼを使用する。これらの酵素のいくつかが等温DNA増幅を触媒する能力は、酵素自体に発行された特許では開示されていたが、主張されていなかった。^{[4] [5]}

• 米国特許出願 20090081670。2009 年 3 月 26 日。核酸の指数関数的増幅のためのニッキングおよび伸長増幅反応。