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寒天希釈法は、研究者が抗生物質の最小発育阻止濃度（MIC）を決定するために使用する2つの方法のうちの1つです（ブロス希釈法と並んで）。これは、いくつかの抗生物質を多数の異なる細菌に対してテストする場合に、新しい抗生物質の有効性をテストするために最も頻繁に使用される希釈法です。[1] : 149 [2]
プロセス
試験する抗生物質を水で希釈して、一連の濃度を作ります。次に、適切な量を溶かした寒天と混合して、最終的な抗生物質濃度が2倍希釈系列を表すプレートを作成します。この後、標準濃度に調製した細菌を、スポットあたり10 4コロニー形成単位（CFU）で各プレートにスポットとして追加します。この技術により、1つの細菌タイプの反復スポットを試験することも[3]、異なる細菌のスポットを試験して、複数のタイプの細菌に対する抗生物質のMICを試験することもできます。必要なコントロールには、抗生物質を一切投与しないコントロールプレートと、含まれる細菌が適切な濃度範囲であることを示す細菌塗布プレートがあります。次に、希釈プレートを37℃の温度でインキュベートします[ 4]。次に、プレートを16〜18時間インキュベートしますが、急速に分裂する細菌集団の場合はインキュベーション時間が短くなる場合があります。[1] : 374 培養後、プレートを検査し、接種した箇所で細菌の増殖が起こったかどうかを判定します。細菌の増殖を阻止した抗生物質の最低濃度が、その抗生物質のその細菌に対する最小発育阻止濃度とみなされます。[4]
利点
寒天希釈法は感受性試験のゴールドスタンダード、つまり細菌の抗生物質耐性を測定する最も正確な方法と考えられています。寒天希釈法の結果は簡単に再現でき、他の希釈法に求められるコストよりもはるかに安価に監視できます。さらに、一度に最大 30 個の病原体サンプル (および 2 つのコントロール) をテストできるため、寒天希釈法はバッチテストに便利です。 [1] : 149
デメリット
寒天希釈試験では、各希釈プレートに検査対象の病原体を手作業で接種する必要があるため、寒天希釈試験は労働集約的で費用もかかります。[1] : 149 ブロス微量希釈試験とは異なり、寒天希釈法では一度に複数の抗生物質を検査することはできません。 [5]
参考文献
- ^ abcd ロリアン、ビクター（2005）。臨床検査医学における抗生物質。リッピンコットウィリアムズ＆ウィルキンス。ISBN 9780781749831。
- ^ Wiegand, Irith; Hilpert, Kai ; Hancock, Robert EW (2008 年 1 月 17 日)。「抗菌物質の最小発育阻止濃度 (MIC) を決定するための寒天およびブロス希釈法」。Nature Protocols。3 ( 2 ) : 163–75。doi :10.1038/nprot.2007.521。PMID 18274517。S2CID 3344950 。
- ^ 欧州臨床微生物学および感染症学会抗菌薬感受性試験委員会（2000 年 9 月）。「寒天希釈法による抗菌剤の最小発育阻止濃度（MIC）の測定」。臨床微生物学および感染症。6 (9): 509–515。doi : 10.1046 / j.1469-0691.2000.00142.x。PMID 11168187。
- ^ ab Parija (2009). 微生物学と免疫学の教科書. Elsevier India. p. 73. ISBN 9788131221631。
- ^ リー、メアリー（2013）。実験データの解釈における基本スキル（第5版）。ASHP。p.723。ISBN 9781585283453. 2014年11月16日閲覧。